朊蛋白突变体D178N在RT-QuIC实验中的转化研究

目的 利用RT-QuIC研究带有D178N突变的朊蛋白的自我转化能力.方法 以带有人PRNP基因的质粒为模板,通过定点突变,构建了带有D178N突变的人PRNP基因,利用原核表达系统表达并纯化了带有N端及N端缺失的D178N朊蛋白.分别将此蛋白作为底物,利用RT-QuIC体外纤维形成实时监测系统,对各种突变蛋白体外纤维形成进行了观察和比较,并对形成纤维蛋白的蛋白酶抗性进行了初步分析和比较.结果 正确构建了D178N突变的PRNP基因;在RT-QuIC的反应条件下,缺失N端的带有D178N突变的人朊蛋白,即使在不存在prpSc种子的情况下,在体外也能够发生自我转化,且形成的纤维具有蛋白酶抗性;而带有N端的D178N突变的朊蛋白,在RT-QuIC的反应条件下不发生自我转化.结论 朊蛋白N端对D178N突变的朊蛋白自发纤维形成具有一定影响,这为探索和研究遗传型克雅病的致病机制提供了重要线索.     

显微外科治疗外侧裂岛叶星形细胞瘤30例临床分析

目的探讨外侧裂岛叶星形细胞瘤的显微手术治疗方法。方法 30例外侧裂岛叶星形细胞瘤患者选择个体化的手术入路。采用显微手术方法,在保全神经功能的前提下,尽可能多的切除肿瘤。术后行放疗和/或化疗。平均随访24月,依据术后MRI和卡氏评分(karnofsky performance scale,KPS)评价治疗效果。结果肿瘤于镜下全切除20例,次全切除6例,部分切除4例。4例患者在随访2年内死亡,最短生存期5月;其余患者在随访期内均无严重新发并发症及复发情况。手术前后KPS差异无统计学意义。结论对于外侧裂岛叶星形细胞瘤,依据MRI表现,应用显微手术,选择个体化的手术进路,可取得较好的治疗效果。     

异物性食管穿孔并发周围组织及器官损伤5例诊治分析

目的探讨异物性食管穿孔并发周围组织及器官损伤的诊断和治疗。方法回顾分析5例异物性食管穿孔导致纵隔和周围器官损伤患者的临床诊治资料。结果5例患者中3例并发纵隔内组织感染,经内镜下异物取出术、抗炎、对症等非手术治疗治愈,1例合并心肌、心包损伤,经急诊开胸手术心包内异物取出等治疗后痊愈;另1例并发胸主动脉损伤,因上消化道大出血而死亡。结论异物经食管穿孔易并发食管周围组织及器官损伤,临床表现多样化,应注意早期诊断和及时处理,以避免严重并发症的发生和发展。     

我国人类朊病毒病检测监测体系建立及相关基础和应用研究

目的在我国开展克雅氏病(CJD)监测,探讨朊病毒病的发病机制。方法采用多学科交叉技术开展以疾病监测为导向的应用研究和发病机制为导向的基础研究。结果建立了CJD病原学诊断技术,制定了《克雅氏病诊断标准》,开展了覆盖12个省(市)自治区的CJD监测。首次较全面地了解了我国CJD病人的流行病学、临床和实验室特征;首次报道了我国多种遗传型CJD病例。建立了包括朊病毒实验动物平台、体外无细胞转化平台、PMCA平台、PrPSc抗原库等技术平台。首次发现了朊病毒可利用脾脏和肌肉组织进行复制、NADPH可促进PrPSc增殖;系统描述了PrPSc和其他神经因子在疾病潜伏期和终末期的变化;报道了PrP蛋白与多种神经蛋白发生相互作用;证明了PrP蛋白序列、二级结构、糖基化类型及胞内存在位置的改变均可诱导细胞凋亡。结论本研究直接服务于我国朊病毒病的防控工作,为朊病毒的研究积累了重要的科学数据。     

胃癌组织中烯醇化酶 α和肿瘤型丙酮酸激酶蛋白的表达及其临床意义

目的:探讨胃癌组织中烯醇化酶-α(enolase-α,ENO1)和肿瘤型丙酮酸激酶(tumor M2 pyruvate kinase,M2-PK)的表达、相互关系及其临床意义。方法:取兰州大学第一医院2009年6月至2010年10月石蜡包埋胃组织标本78例,其中胃癌55例,胃溃疡组织23例。免疫组织化学法检测胃癌组织和胃溃疡组织中ENO1、M2-PK的表达,分析两者的相互关系及临床意义。结果:胃癌组织中ENO1阳性表达率为67.3%(37/55),明显高于胃溃疡组的30.4%(7/23)(P<0.01);ENO1表达与胃癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均相关(均P<0.05);M2-PK在胃癌组织中的阳性表达率为78.2%(43/55),明显高于胃溃疡组织的39.1%(9/23)(P<0.01),M2-PK表达与胃癌分化程度、浸润深度相关(均P<0.05)。胃癌组织中ENO1与M2-PK的表达呈正相关(r=0.5729,P<0.05)。结论:胃癌组织ENO1和M2-PK的表达上调与胃癌的发生、发展可能有关,联合检测该两种蛋白在胃癌组织中的表达对判断预后有一定意义。     

不同年龄患者慢性硬膜下血肿临床特征及疗效分析

慢性硬膜下血肿是老年人的常见疾病,亦可发生于非老年人群,不同年龄患者临床表现略有不同.我院神经外科2003 年1 月-2007 年12 月采用单侧单孔钻颅冲洗引流术治疗慢性硬膜下血肿患者73 例,现对其临床特征、影像学表现及治疗效果进行回顾分析.     

影响类风湿关节炎患者服药依从性差的原因分析及护理对策

目的：明确影响类风湿关节炎患者服药依从性差的原因,探讨护理对策。方法：对6个月内反复住院的类风湿关节炎患者114例运用Morisky-Green测评表测评出的72例类风湿关节炎服药依从性差的患者采用描述性研究设计的方法,应用自设调查问卷调查表进行调查,分析并总结影响患者服药依从性差的原因并给予指导和护理。结果：72例患者服药依从性增强,减少反复住院次数。结论：纠正其错误的观点和态度,构建和谐的医患关系,良好的社会支持,可以提高类风湿关节炎患者的服药依从性,提高治疗效果,降低并发症,保证生活质量。     

朊蛋白N端和C端多肽特异性抗体的制备及ELISA检测技术的研究

目的 制备朊蛋白N端和C端多肽特异性抗体，并对ELISA方法在朊病毒病检测中的应用进行研究。方法构建人朊蛋白N端和C端多肽原核表达重组质粒，分别表达纯化融合蛋白。以此为抗原制备朊蛋白N端和C端多肽特异性抗体。ELISA和Western Blot检测所制备抗体与重组和天然的PrP蛋白的免疫反应性。初步建立间接ELISA检测技术。结果 所制备的N端和C端抗体可特异性识别重组全长PrP蛋白和相应的PrP片段，无明显交叉反应。C端抗体还可有效地识别感染羊瘙痒因子263K的仓鼠脑组织中经PK消化后的prp^Se，其Western Blot反应带型与PrP单抗3174相似。5000r／min离心处理脑组织悬液可有效保留上清中PrP^Se成分而不影响ELISA检测。蛋白酶K虽经灭活处理，但可明显抑制重组和天然PrP在液相中与相应抗体的结合。间接ELISA方法可根据反应A值区分正常或感染动物样本。结论 所制备的朊蛋白N端和C端抗体具有良好的特异性，C端抗体可用于实验性朊病毒病的检测。建立的间接ELISA方法可试用于朊病毒病的初步筛查。     

2015-2019年天津市东丽区百日咳流行病学特征

目的分析天津市东丽区2015-2019年百日咳流行病学特征,为探讨目前百日咳防控策略、改进相关防控工作提供依据。方法收集2015-2019年中国疾病预防控制信息系统及天津市免疫规划信息管理系统中报告的现住址为天津市东丽区的百日咳病例信息,采用Excel 2007软件整理数据,以描述流行病学方法分析数据。结果天津市东丽区2015-2019年共报告百日咳诊断病例196例(实验室诊断77例,临床诊断119例),年平均报告发病率为5.38/10万,各年报告发病率分别为4.19/10万、3.82/10万、4.76/10万、7.12/10万和6.71/10万;1~4月低发;除丰年街外,各街道均有百日咳病例报告;<1岁的病例占53.57%,>10岁的20例病例中90.00%是作为实验室确诊儿童密切接触者被发现的。男女性别比为1.04:1,散居儿童占74.49%。61.23%的病例有免疫史。结论天津市东丽区近年来百日咳发病率呈上升趋势,报告病例主要集中于<1岁年龄组,大年龄组病例数可能被低估,多数病例有至少一剂次免疫史。因此诊断、监测、预防接种等相关防控工作仍有待完善。