高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨率质谱法快速检测大鼠血浆中6种附子生物碱

目的:建立高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨率质谱法快速测定大鼠血浆中的乌头碱、新乌头碱、次乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱的方法。方法:血浆样品加入内标氢溴酸高乌甲素,以甲醇沉淀蛋白进行预处理。采用高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨率质谱法进行样品测定,色谱柱为Sinochrom ODS-BP C_(18),流动相为乙腈-1%甲酸水溶液(50∶50,V/V),流速为0.6 m L/min,进样量为10μL,柱温为25℃,自动进样器温度为4℃;质谱扫描模式为全离子监测模式,正离子采集,设定检测离子质荷比(m/z)分别为646.32(乌头碱)、632.30(新乌头碱)、616.31(次乌头碱)、604.31(苯甲酰乌头原碱)、590.29(苯甲酰新乌头原碱)、574.30(苯甲酰次乌头原碱)、585.31(内标)。取雄性Wistar大鼠6只,单剂量灌胃附子总生物碱提取物(4 mg/kg),分别于给药前(0 h)和给药后0.5、0.75、1.25、1.5、2、4、6、8、10、24 h时取血,测定血浆药物浓度并以PKSolver V2.0软件计算药动学参数。结果:血浆中6种附子生物碱质量浓度均在0.1~10μg/L范围内线性关系良好(r>0.992),定量限均为0.1μg/L;平均提取回收率均大于75%,日内精密度、日间精密度、基质效应、稳定性试验的RSD均小于15%。大鼠血浆中6种附子生物碱的t_(max)均分别为1.2 h左右,t_(1/2)均分别为10 h左右,单酯型乌头原碱的c_(max)均分别高于双酯型乌头碱。结论:本研究所建立的高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨率质谱法准确、灵敏、简便、快速,可用于6种附子生物碱的血药浓度监测。     

低压静电场对大肠杆菌生长过程的影响

目的:研究不同强度低压静电场对大肠杆菌 (E.coli)生长过程的影响．方法:将3 V和24 V两种不同强度低压静电场施加于培养大肠杆菌的大试管(Φ= 30 mm),测量大肠杆菌生长过程中的吸光度 A540nm及菌落数,并对24 V静电场作用下8 h 的大肠杆菌进行扫描电镜(SEM)观察,对比其与对照管的茵体形态变化特征．结果:大肠杆菌的生长在培养前期受到了明显的抑制．3 V和24 V静电场作用下大肠杆菌进入稳定生长期的时间分别提前了2 h和4 h, 当第1个稳定生长期持续6-8 h后出现第2次生长,即出现“生长修复”．且在试验条件下,外加静电场越强,修复速度就越慢．扫描电镜分析发现了试验条件下大肠杆菌茵体形态出现了一定的变异,进一步说明了外加低压静电场对大肠杆菌生长存在一定程度的影响作用．结论:外加低压静电场对大肠杆菌生长存在一定的抑制作用．     

淡色库蚊卵期静电场处理对其生命系统影响的初步研究

笔者以静电场为实验电场，以淡色库蚊（Ｃｕｌｅｘｐｉｐｉｅｎｓｐａｌｌｅｎｓ）的卵为处理对象，测定不同电场强度和处理时间对该蚊虫生物学特性的影响。研究结果提示：该蚊卵经静电场处理后，明显地改变了蚊虫胚后发育的各种特性；在１００ＫＶ／ｍ２固定场强下，９０ｍｉｎ处理后的幼虫存活率仅为０．５８．发育为成蚊后，其所产的卵块中约７０％左右的卵为未受精卵；在３０ｍｉｎ固定处理时间下，５０ＫＶ／ｍ２场强处理对蚊虫各项特性有利，而较高的场强则会起抑制作用；静电场的处理也明显增加了个体发育的差异，处理过的幼虫完成发育的时间要比未处理过的迟１～４天     

应用高压静电治疗更年期综合征47例

采用高压静电场治疗更年期综合征４７例，平均治疗４７次，显效３３例，占７０．２１％，总有效率９５．７４％。观察看出，高压静电场对更年期引起的植物神经功能失调具有很好的调整、改善和治疗作用。     

高压静电疗法的临床应用

高压静电疗法是利用静电场作用于机体以达到治疗作用的一种全身性疗法，也称为电位治疗，它是利用高压静电场来调节机体血液酸碱平衡，促进新陈代谢，从根本上提高人体免疫力和对疾病的抵抗力，消除缓解患者的临床症状，使各器官逐渐恢复正常功能。我院理疗科自1997年采用该疗法治疗多种疾病取得良好效果，现将结果报告如下。     

高压芒刺静电场对小鼠胸腺细胞和腹腔巨噬细胞中CD2、CD48表达的影响

目的:通过时程/量效研究观察不同强度芒刺高压静电场对表面分子CD2、CD48表达的影响.材料和方法:采用不同强度芒刺高压静电场对小鼠进行全身辐射,荧光免疫流式细胞术检测小鼠胸腺细胞CD2蛋白和腹腔巨噬细胞CD48蛋白表达的变化.结果:剂量-效应结果显示,在10 kV～20 kV之间处理组的CD2、CD48表达量显著高于对照组(P＜0.01);在30 kV以上电压表达量明显低于对照组(P＜0.01);15 kV电压时间进程研究结果表明,CD2于处理后2 h表达开始增加,在4 h～8 h表达量达到高峰,与对照组比较差异显著(P＜0.001),24 h时表达量趋于恢复,接近对照组;CD48于处理后4 h开始增加,高峰出现在8 h,与对照组比较差异显著(P＜0.001),24 h时的表达量接近对照组;35 kV电压时间进程研究结果表明,CD2于处理后2 h表达量即达到最低值,之后表达量逐步回升,但持续到24 h未能恢复到对照组水平;CD48表达量的下降晚于CD2,在4 h开始下降,最低值出现在处理后8 h,其后逐步回升.结论:不同强度高压芒刺静电场可引起CD2、CD48表达量不同的生物效应,二者的相互作用在免疫调节反应中发挥重要功能.     

负极性驻极体静电场对5-氟尿嘧啶贴剂体外释放规律的影响

目的 研究5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)贴剂的处方优化工艺及负极性驻极体静电场对5-FU体外释放规律的影响.方法 采用常温电晕充电技术制备-1 000 V负极性驻极体和-2 000 V负极性驻极体,以压敏胶Eudragit E100为基质、柠檬酸三丁酯为增塑剂、水溶性氮酮为化学促渗剂制备负极性驻极体5-FU贴剂.单因素考察压敏胶Eudragit E100、增塑剂、水溶性氮酮和负极性驻极体对5-FU贴剂相关参数的影响,通过正交设计试验筛选5-FU贴剂的最优处方.利用改良的Franz扩散池和高效液相色谱仪研究负极性驻极体静电场对5-FU体外释放规律的影响.结果 (1)0.25 g Eudragit E100、增塑剂和Eudragit E100的质量比为55∶100、水溶性氮酮的质量分数为3％组合时为5-FU贴剂的最优处方.(2)-1000V驻极体和-2 000V驻极体均促进了5-FU的体外释放,且电压越高促进作用越强.(3)与单用3％水溶性氮酮相比,负极性驻极体联合质量分数为3％的水溶性氮酮进一步提高了5-FU的体外释放量(P＜0.05).结论 负极性驻极体与水溶性氮酮均能降低5-FU贴剂的持黏力,促进5-FU的体外释放,两者联合使用时促进作用更为显著.     

不同基原八爪金龙药材中黄酮、香豆素类化学成分分析

目的:鉴定并分析不同基原八爪金龙药材中黄酮及香豆素类成分。方法:采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-QE-HF-MS/MS)。色谱柱为Zorbax Eclipse-C18,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(梯度洗脱),柱温为30℃,流速为0.3 mL/min,自动进样器温度为4℃,进样量为2μL。离子源为电喷雾离子源,扫描模式为正、负离子模式,加热器温度为325℃,鞘气压力为45 arb,辅助气压力为15 arb,吹扫气压力为1 arb,电喷雾电压为3.5 kV,毛细管温度为330℃,透镜电压为55%,扫描模式为一级全扫描(m/z 100~1500)、数据依赖性二级质谱扫描(dd-MS2,Top N=10),分辨率为70000(一级质谱)、17500(二级质谱),碰撞模式为高能量碰撞解离。通过参考ChemSpider、mzCloud、mzVault、PubChem等国内外专业数据库,同时结合相关文献和对照品数据对化合物结构进行鉴定并比较含量。结果与结论:从朱砂根、百两金、红凉伞等3种不同基原的八爪金龙药材中共分离47个成分,鉴定出17个黄酮类化合物,包括9个黄酮醇类(槲皮素3-O-鼠李糖苷7-O-葡糖苷、杨梅素、芦丁、毛里求斯排草素、山柰酚、槲皮素、异鼠李素、槲皮苷、美恩西汀)、3个黄烷-3-醇类(表棓儿茶素、儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯)、2个二氢黄酮类(黄颜木素、圣草酚)及3个其他类{3-(2,3-二氢苯并[1,4]二噁英-6-基)-7-羟基-2-三氟甲基-4-酮、墨沙酮、Oriciacridone F},10个香豆素类化合物{岩白菜素、[(7-羟基-4-甲基-2-氧代-2H-色烯-6-基)氧基]乙酸、[7-(羧基甲氧基)-4-甲基-2-氧-2-羟色基-3-基]乙酸、4,9-二羟基7H-呋喃并[3,2-g]色烯-7-酮、6,7-二羟基-4-甲基香豆素、七叶内酯、秦皮素、7,8-二羟基-4-甲基香豆素、4-甲基伞形酮葡萄糖醛酸、二十烷酮}。含量分析结果显示,黄酮、香豆素类化合物中,3种不同基原八爪金龙药材中共有5个共有成分,分别为岩白菜素(2号峰)、[7-(羧基甲氧基)-4-甲基-2-氧-2-羟色基-3-基]乙酸(5号峰)、墨沙酮(16号峰)、槲皮素(18号峰)、Oriciacridone F(26号峰),且共有成分的含量存在明显差异。除5个共有成分外,其余22个成分均为差异化学成分,分别为1、3、4、6~15、17、19~25、27号峰对应的化合物,其中3、6、8、23号峰对应的化合物仅存在于红凉伞中;12~15、19号峰对应的化合物仅存在于百两金中。UPLC-QE-HF-MS/MS法可高效、精确、快速地鉴别不同基原八爪金龙药材中黄酮类、香豆素类化学成分。     

UPLC-Q-Exactive四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用快速分析粗茎秦艽化学成分

目的利用UPLC-Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱仪联用技术,对粗茎秦艽块根中的化学成分快速识别和鉴定。方法以100%甲醇作为提取液制备供试液,采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,质谱采用正负离子监测模式、全扫描及自动触发二级质谱扫描的功能,快速识别和鉴定粗茎秦艽中的化学成分。结果通过高分辨数据共鉴定34个化学成分,包括环烯醚萜类13个、黄酮类5个、酯类5个、三萜类3个、有机酸类2个、苯丙素类1个、其他类5个,其中12个成分经与对照品比对而准确鉴定,15个化学成分为首次从该植物中分得。结论 UPLC-Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用技术可以快速鉴定粗茎秦艽中的化学成分,为粗茎秦艽化学成分的提取分离及其药效物质基础提供科学依据。     

靶细胞捕集及超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱质谱法分析预测姜黄中抗肺癌活性成分

该文建立了基于人肺腺癌A549细胞和超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱质谱(UHPLC/LTQ Orbitrap MS)的靶细胞捕集-化学表征技术,用于分析预测姜黄中抗肺癌的潜在活性成分。将A549靶细胞和姜黄提取物一起孵育培养,根据活性成分可以与靶细胞膜有特异性结合或者进入靶细胞内的原理,用液质联用方法可对培养后的细胞结合成分进行分析。因姜黄中的主要活性成分为脂溶性成分,在与A549细胞共同孵育时出现吸附于培养瓶内壁的现象,造成空白溶液有干扰。该文通过细胞消化后多次离心和转移,解决了空白干扰问题,成功从姜黄提取物中筛选出3个与A549细胞结合的成分,经鉴定,分别为双脱甲氧基姜黄素、脱甲氧基姜黄素和姜黄素,系姜黄中主要的抗肺癌活性成分。该文结果表明通过改进的方法,可以解决脂溶性成分因吸附瓶壁而造成假阳性的情况,是对现有靶细胞捕集-化学表征技术的有力补充。