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成年大鼠破骨细胞体外培养及细胞凋亡的观察 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 为研究骨重建过程中破骨细胞的关键作用,建立成年大鼠(12 ~50 周龄) 破骨细胞的体外培养方法并进行细胞凋亡观察。方法 大鼠处死后,在无菌条件下取出股骨,剪去两骺端,以αMEM 将骨髓细胞冲洗出, 并离心洗细胞2 次,置于αMEM 培养液,内含αMEM,体积分数为10% 的胎牛血清(FCS) 和1α,25(OH)2 Vit D3 10 -8 mol/L,在24 孔板内,以体积分数为5 % 的CO2 ,37 ℃,培养8 天。按原位DNA 末端标记(TUNEL)检测试剂盒方法染色细胞,以荧光显微镜观察细胞凋亡。结果 经活体观察、HE染色、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP) 染色,光学显微镜、扫描电镜观察骨片之陷窝的形成,证实培养的细胞为破骨细胞;TUNEL 检测,荧光显微镜下可见破骨细胞核染色质浓缩、裂解等凋亡细胞的典型变化与未凋亡的破骨细胞。结论 本实验建立了成年大鼠破骨细胞的体外培养方法并进行细胞凋亡观察。 相似文献
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目的 探讨前列腺素E2(PGE2)对大鼠成骨细胞核因子-κB受体激活物配基(RANKL)和护骨素(OPG)mRNA表达的调节及其信号转导机制.方法 培养大鼠UMR106成骨细胞,采用不同浓度的PGE:和不同的信号通路调节剂干预细胞后,提取细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR检测RANKL和OPG mRNA的表达水平.结果 PGE2、福司可林和db-cAMP均促进RANKL mRNA表达和抑制OPG mRNA的表达,RANKL mRNA表达分别为对照组的2.8倍(P=0.002)、2.2倍(P=0.006)和2.1倍(P=0.005).OPG mRNA表达分别为对照组的12%(P<0.01)、85%(P=0.005)和70%(P=0.013).A23187则下调RANKL和OPG表达58%(P=0.002)和53%(P=0.017).KT-5720下调PGE2诱导的RANKL mRNA表达约53%(P<0.01),而白屈菜红碱、维拉帕米、钙调蛋白抑制剂(W7、KN-62和PD98059)则对PGE:诱导的RANKL mRNA表达无明显影响(P>0.05).KT-5720、维拉帕米和W7分别阻断PGE2对OPG mRNA表达的抑制作用47%(P=0.01)、38%(P=0.029)和43%(P<0.01),而KN-62、PD98059和白屈菜红碱则均不影响PGE2对OPG表达的调节(P>0.05).结论 PKA信号通路介导了PGE2诱导的RANKL表达,而PGE2对OPG表达的下调作用则由PKA和Ca2+钙调蛋白信号通路介导. 相似文献
54.
成人腰椎X线影像计量学参数测量与退行性腰椎管狭窄症关系的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用图像分析仪(MOP-videoplan)描记、测量了135名成人腰椎椎管造影X线片,70名腰椎正常,65名患有退行性腰椎管狭窄症,并计算了椎体体积和硬脊膜囊容积。数据表明,男性每个椎体的理想圆柱体体积与年龄显著相关,而女性则无相关;每个椎管的理想三棱柱形容积,男女均与年龄显著负相关。这可能与退行性腰椎管狭窄症的发病有关。而女性椎体体积与年龄无明显相关,可能是女性免于椎体好发压缩性骨折的自我保护机制。 相似文献
55.
56.
瘦素、骨保护素与骨代谢 总被引:5,自引:0,他引:5
骨组织时刻处于骨重建的动态变化之中,即不间断的骨形成、骨吸收贯穿生命的始终。骨重建的范围非常广泛,几乎每10年成人骨骼完全再生一次。对于健康青年人,骨形成量与骨吸收量保持动态平衡。随着年龄增长,骨吸收日益占据优势,由此可导致骨质疏松等衰老性疾病的发生。骨重建的过程有赖于两大类细胞的活性:其一是成骨细胞,负责生成新骨(骨形成);其二是破骨细胞,负责破坏旧骨(骨吸收)。骨代谢研究中的主要问题就是研究成骨细胞和破骨细胞分化和活性的调控机制,以期实现骨重建的动态平衡,达到预防和治疗各种代谢性骨病的目的。… 相似文献
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骨形态计量学与骨质疏松邱明才天津医科大学总医院内分泌科邱明才研究员衰老可使人骨量丢失,衰老的过程伴随着骨体积的减少,当达到一定程度时就出现了骨质疏松。骨质疏松所致的合并症,如病理性骨折,后果严重,常是老年人死亡的重要原因。正常人的骨组织处在不断的转换... 相似文献
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细胞凋亡信息分子Fas、FasL和NF-κB在氟化物作用后破骨样细胞凋亡过程中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的研究氟化物作用后破骨细胞样细胞凋亡过程中细胞凋亡配体Fas、FasLFasLigand和核因子NF-κB的表达变化。方法在培养基中分别加入不同浓度的氟化钠培养破骨样细胞,以免疫组织化学染色方法观察细胞的Fas、FasL和NF-κB表达。结果Fas、FasL在破骨样细胞表达量随培养基中氟化钠浓度增高而增高;NF-κB的表达量随培养基中氟化钠浓度增高而降低,两者均具有剂量依赖关系。结论在氟化钠所致的破骨细胞凋亡过程中,Fas,Fas-L的表达随氟化物浓度增高而加强;而核因子NF-κB的表达随氟化物浓度增高而减弱,两者都具有剂量依赖关系。 相似文献
60.
Houssay氏综合征诊断治疗的探讨 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 :探讨Houssay氏综合征的诊断和治疗策略。方法 :分析近4年来2型糖尿病合并垂体前叶功能低下10例的临床特点和采用激素替代疗法的效果 ,研究其诊断的敏感指标和治疗价值。结果 :治疗后病人的一般状况和精神状态明显改善 ;低血钠和低T3 水平增加与治疗前相比有统计学意义 (P<0.05) ,而对空腹血糖和餐后血糖的影响不大 (P>0.05)。结论 :毛发稀疏、低血钠以及低T3 水平可能是此综合征较敏感的指标 ;糖尿病合并垂体前叶机能减退时升糖激素的使用并不是绝对禁忌症 ,适量补充有利于达成升糖激素与降糖激素的动态平衡 ,维持内环境的相对稳定 ,也避免了严重低血糖的发生 ,有利于更好地控制糖尿病 ,提高病人生存质量 相似文献