基于UPLC-Q-TOF-MS的左归降糖解郁方体内外成分分析

目的 采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术对左归降糖解郁方(左归丸化裁)的体外及体内血清化学成分进行快速分析鉴别。方法 采用Agilent ZORB AX Eclipse Plus C₁₈色谱柱，以乙腈-水为流动相，梯度洗脱，质谱扫描采用正负离子模式，对左归降糖解郁方的提取液、空白血清和含药血清进行分析，结合精确相对分子质量、保留时间、碎片离子、中性丢失等信息鉴定其体内外化学成分。结果 使用Agilent Masshunter Qualitative Analysis工作站结合复方成分数据库，从复方提取物中共鉴别出化合物57个，其中从提取物中首次发现Glycine。从血清样本中共鉴定出入血成分15个。结论 运用UPLC-Q-TOF-MS技术，可对左归降糖解郁方化学成分进行快速且系统地分析鉴定，为左归降糖解郁方的质量控制、临床应用以及更深入的药效作用研究提供了一定的理论依据。     

左归降糖解郁方改善糖尿病并发抑郁症大鼠N-甲基D-天冬氨酸受体过激致海马突触损伤的作用机制

目的 研究左归降糖解郁方通过调节吲哚胺-2，3-双加氧酶（indoleamine 2，3-dioxygenasel，IDO）信号抑制糖尿病并发抑郁症大鼠海马N-甲基D-天冬氨酸受体（N-methyl D-aspartate receptor，NR）过激致海马突触损伤的作用机制。方法 建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型，并随机分为空白组、模型组、IDO抑制剂（3 mg/kg）组、左归降糖解郁方（20.52 g/kg）组和阳性对照（二甲双胍0.18 g/kg＋氟西汀1.8 mg/kg）组。各组大鼠ig给药28 d后，采用旷场实验、强迫游泳实验和Morris水迷宫检测大鼠抑郁样行为和记忆认知功能；采用Western blotting和qRT-PCR检测海马IDO蛋白和基因表达；采用ELISA试剂盒检测血清和海马中γ-干扰素（interferon-γ，IFN-γ）、CC族趋化因子配体2（CC chemokine ligand 2，CCL2）、色氨酸、5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）、犬尿氨酸、犬尿喹啉酸（kynurenine acid，KA）、喹啉酸、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和IL-6水平；采用免疫荧光法检测海马中离子钙接头蛋白-1（ionized calcium binding adaptor molecule-1，Iba-1）、胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）、突触素（synaptophysin，Syn）、突触后致密蛋白-95（post synaptic density protein-95，PSD-95）的表达；采用Western blotting检测海马中腺苷A1R受体（adenosine A1 receptor，A1R）、腺苷A2AR受体（adenosine A2A receptor，A2AR）、腺苷A3R受体（adenosine A3 receptor，A3R）、N-甲基D-天冬氨酸受体2A（N-methyl D-aspartate receptor 2A，NR2A）、N-甲基D-天冬氨酸受体2B（N-methyl D-aspartate receptor 2B，NR2B）和脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）蛋白表达；采用苏木素-伊红染色、Nissl染色和TUNEL法检测海马病理损伤及凋亡情况。结果 左归降糖解郁方能显著降低模型大鼠血糖水平（P<0.01），并改善抑郁样行为，表现为旷场实验总距离和中心时间显著增加（P<0.01）、强迫游泳不动时间显著缩短（P<0.01）、Morris水迷宫实验定位巡航时间显著降低（P<0.05）和空间探索时间显著增加（P<0.01）。左归降糖解郁方组和IDO抑制剂均能通过显著下调IDO蛋白和基因表达（P<0.001），并不同程度降低IFN-γ、CCL2、犬尿氨酸、喹啉酸水平（P<0.05、0.01），逆转色氨酸-犬尿氨酸代谢紊乱；同时显著抑制Iba-1、GFAP表达（P<0.05、0.01），并降低IL-1β、TNF-α、IL-6水平（P<0.05、0.01），抑制体内炎症水平；进而降低A2AR、NR2A、NR2B蛋白表达（P<0.05、0.01），增加A1R、A3R蛋白表达（P<0.05），改善NR过度激活；最终提高Syn、PSD-95、BDNF表达（P<0.05），显著改善海马病理损伤及降低神经元凋亡（P<0.05、0.01），对海马突触损伤和神经元产生保护作用。结论 左归降糖解郁方通过抑制IDO水平，调节糖尿病并发抑郁症大鼠海马色氨酸-犬尿氨酸代谢通路，从而改善NR过激致海马突触损伤，发挥抗抑郁作用。     

二十五味松石丸调节巨噬细胞表型改善CCL4诱导的大鼠肝纤维化

目的:探讨二十五味松石丸通过调节肝巨噬细胞表型改善CCL₄诱导大鼠肝纤维化的作用及可能机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、二十五味松石丸88、176、352 mg/kg组，除正常对照组外，其余大鼠采用皮下注射CCL₄橄榄油建立肝纤维化模型，造模的同时按分组给予相应药物治疗。4 w后检测大鼠肝组织中病理变化和胶原纤维沉积；生化检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活力；ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、透明质酸(HA)和层粘连蛋白(LN)含量；免疫组化检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)、CD68和CD163阳性表达；免疫印迹检测肝组织中α-SMA、TGF-β1、CD68、CD163、p-STAT1和p-STAT3蛋白表达；实时荧光定量PCR法检测肝组织中Cd68、Cd163 mRNA表达；免疫荧光双标检测CD68、CD163在肝组织中比例情况。结果:与正常对照组相比，模型对照组大鼠血清中ALT、AST活力显著升高...     

百合地黄汤多糖提取工艺优化及抗焦虑抑郁药效评价

目的 优化百合地黄汤多糖提取工艺并初步评价其抗焦虑抑郁药效。方法 在Plackett-Burman实验基础上，以多糖得率与多糖含量的综合评分为评价指标，提取时间、加水量、醇沉浓度为考察因素，结合Box-Behnken响应面法优化百合地黄汤多糖提取工艺并验证。将40只ICR小鼠分为对照组、文法拉辛组[阳性对照，13.5 mg/（kg·d）]和百合地黄汤多糖高、低剂量组[5.28、2.64g/（kg·d），以生药量计]，每组10只（雌雄各半）。药物组小鼠灌胃相应药液，对照组小鼠灌胃水10 mL/kg，每天1次，连续7 d。采用高架十字迷宫实验、旷场实验、强迫游泳实验、悬尾实验评价最优工艺所制提取物对小鼠焦虑抑郁样行为的改善情况，并采用酶联免疫吸附测定法检测其对小鼠脑组织中神经递质水平的影响。结果 百合地黄汤多糖的最优提取工艺为加25倍量水，提取1.5 h，醇沉浓度70%。3次验证实验的多糖得率、多糖含量平均值分别为33.10%、0.62 mg/mg，与预测值（36.14%、0.65 mg/mg）的相对偏差分别为8.40%、4.62%(RSD<2%,n=3)。所得百合地黄汤多糖提取物能...     

基于全转录组技术研究慢性应激抑郁模型中微小RNA、长链非编码RNA及环状RNA的表达谱及调控网络

目的 筛选慢性应激抑郁模型大鼠海马组织中微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)、环状RNA(circRNA)的表达谱及其竞争性内源RNA(ceRNA)调控网络，探讨抑郁症潜在的病理生理机制。方法 12只SD大鼠分为空白组和模型组，采用慢性温和不可预测性应激(CUMS)构建抑郁症大鼠模型，取大鼠海马组织进行全转录组分析，并用生物信息学方法找出可能存在的lncRNA-miRNA-mRNA、circRNA-miRNA-mRNA调控网络。结果 根据|差异倍数(fold change)|≥1.5和P≤0.05共鉴定出29个差异miRNAs(上调21个，下调8个),686个差异lncRNAs(上调163个，下调523个),8个差异circRNAs(上调3个，下调5个)。基因本体论(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路分析显示，miRNAs的靶基因主要富集于细胞膜内的高尔基体和钙离子结合过程；LncRNAs靶基因的功能涉及核酸结合的调节、细胞因子和蛋白质泛素化等；CircRNAs的宿主基因主要集中在细胞刺激反应、代谢进程、催化活性等过程中。LncRNAs和circRN...     

乳腺癌并发抑郁症模型小鼠血液及组织中白介素类细胞因子含量的变化

目的：观察乳腺癌并发抑郁症（BCRD）模型小鼠行为、白介素类细胞因子的变化。方法：BALB/c雌性小鼠，腋下接种1×106个4T1炎症乳腺癌细胞，7 d后观察是否成模，成模后的小鼠连续21 d背部皮下注射皮质酮（30 mg/kg）复制BCRD模型。所有小鼠按糖水消耗随机分为4组：乳腺癌组、抑郁症组、BCRD组、空白对照组。21 d后，测定各组小鼠糖水偏嗜度、旷场实验等行为学变化；采用悬液芯片技术检测血清、海马、肿瘤、皮质组织中IL-1β、IL-2、IL-6、IL-10、IL-12含量。结果：与空白组比较，BCRD小鼠蔗糖偏嗜度及垂直活动次数降低（P<0.01或P<0.05），血清、海马中IL-2、IL-6、IL-12含量显著升高（P<0.01或P<0.05），海马中IL-10含量显著增加（P<0.01或P<0.05）；与乳腺癌组比较，BCRD组血清、海马、皮质中IL-6含量显著升高（P<0.05），与抑郁症组比较，血清、海马、皮质中IL-6含量差异无统计学意义（P>0.05），但均有升高趋势。结论：IL-6在血清、海马、皮质中表达均较高且...