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51.
52.
BACE1抑制剂分子水平高通量筛选体系的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 建立体外分子水平β?鄄分泌酶(BACE1)抑制剂高通量筛选体系。方法 采用均相时间分辨荧光法(HTRF),通过优化反应时间、酶浓度、检测仪器等实验条件,建立BACE1抑制剂高通量筛选体系,根据待测样品对BACE1活性抑制程度筛选其抑制剂。结果 采用HTRF法建立了BACE1抑制剂高通量筛选体系,其中反应时间确定为6 h、BACE1浓度为670 U/L,采用VICTOR3酶标仪测得信噪比为649.6,信背比为44.6,Z′因子为0.91,变异系数小于10%,并筛选到一系列IC50小于10-6 mol/L的化合物。结论 采用HTRF法建立的BACE1抑制剂筛选体系灵敏度高、特异性和稳定性好,可用于BACE1抑制剂的高通量筛选。 相似文献
53.
异噻唑酮取代的间苯二甲酸衍生物的设计、合成 及其抑制β–分泌酶活性 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:发现新结构的β-分泌酶抑制剂。方法:基于对β-分泌酶与其典型的抑制剂结合位点的分析,辅以分子对接实验,设计并合成异噻唑酮取代的间苯二间羧酸衍生物;采用时间分辨荧光法(time-resolved fluorescence,TRF)检测化合物对β-分泌酶的抑制活性。结果:合成了10个异噻唑酮取代的苯二羧酸衍生物,其结构经MS和1H-NMR确证,其纯度经HPLC测定;时间分辨荧光法(TRF)检测结果显示有4个化合物对β-分泌酶具有显著的抑制活性,其中化合物22a抑制β-分泌酶的IC50值为13.7 nmol&;#8226;L-1。结论:发现了新的β-分泌酶抑制剂,得出了初步的构效关系,为进一步的结构优化奠定了基础。 相似文献
54.
目的 研究快速老化模型小鼠(senescence accelerated mice,SAM)学习记忆能力及其大脑皮层、海马和下丘脑单胺递质含量的增龄性变化及它们之间的关系。方法 分别采用跳台实验和穿梭箱实验测定SAM的被动和主动回避反应能力,采用高效液相色谱电化学检测法测定脑内单胺递质的含量。结果 2月龄快速老化亚系SAM-prone/8(SAMP8)的被动和主动回避反应能力已较同龄抗快速老化亚系SAM-resistance/1(SAMR1)明显降低,且其主动回避反应能力随增龄进一步降低。同时,SAMP8大脑皮层、海马及下丘脑内单胺递质水平多明显高于同龄SAMR1,且随增龄明显增高。结论 SAMP8学习记忆能力的衰退可能与其相关脑区单胺递质的变化密切相关。 相似文献
55.
未经治疗梅毒患者脑脊液检测的意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 观察艾滋病病毒 (HIV)阴性、未经治疗、且无神经损害临床表现的梅毒患者的脑脊液常规及梅毒抗体的检测情况 ,并探讨这些指标的诊断意义。方法 对 36例未经治疗且无神经系统临床表现的梅毒 (其中二期16例 ,隐性 2 0例 )患者脑脊液进行脑脊液常规、梅毒暗视野检查、聚合酶链反应 (PCR)及脑脊液梅毒抗体试验、梅毒血清快速反应素试验 [(RPR)、IgM、梅毒参比试验 (VDRL)、荧光密螺旋体抗体 (TPPA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验 (FTA Abs) ]检测。结果 在所检测的 36例梅毒患者脑脊液中 ,常规检测发现 2 4例 (6 6 6 7% )蛋白升高 ,11例 (30 6 % )葡萄糖升高 ,未发现红细胞和白细胞 ;有 19例 (5 2 78% )梅毒患者脑脊液存在≥ 1种梅毒抗体。其中 6例 (16 7% )VDRL阳性 ,13例 (36 39% )FTA Abs阳性 ,14例 (38 33% )TPHA阳性 ,RPR、IgM、TP PCR及梅毒暗视野检查均阴性 ;二期和隐性梅毒各项指标检测结果之间差异无显著的统计学意义 (P >0 0 5 ) ;而脑脊液VDRL、FTA Abs、TPPA三种检测结果之间差异有显著的统计学意义 (P <0 0 5 )。结论 未经治疗的梅毒患者其脑脊液存在异常 ,这些异常的结果表明部分未经治疗的梅毒患者存在无症状神经梅毒。 相似文献
56.
目的 采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术对僵蚕水溶性物质中化学成分进行定性分析,建立僵蚕的指纹图谱和共有峰识别的分析方法.方法 采用Acclaim PA 25 μm C18色谱柱(4.6 mm×250.0 mm),流动相A和B分别为0.2%磷酸溶液和乙腈,流速为0.2 mL/min,柱温为30℃,检测波长为265 nm.采用电喷雾离子源正负离子模式,检测LC-MS/MS获得的特征峰的分子量和分子碎片,并进行特征峰结构指认.结果 僵蚕水溶性成分的指纹图谱发现19个共有峰,通过LC-MS/MS识别出其中10个共有峰.10批不同产地的僵蚕药材指纹图谱的相似度评价结果显示,相似度值为0.985~1.000.结论 本研究建立的基于LC-MS/MS的僵蚕指纹图谱分析方法具有选择性好、专属性强和灵敏度高等优点,可以为僵蚕药材的质量评价提供技术参考. 相似文献
57.
目的:制备Ⅱ型胶原诱导的大鼠关节炎模型(CIA模型)并观察其关节炎症和血清中抗体的变化规律.方法:于第0天和第10天分2次多点皮内注射牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂以诱导大鼠CIA模型,应用足爪肿胀容积测定仪动态观察关节肿胀度,采用0~7级关节炎评分法进行关节炎评分,应用组织病理学、X线影像学动态观察踝关节组织的病理变化,应用ELISA方法动态检测血清中多种抗体.结果:CIA模型大鼠免疫后第12天即出现踝关节肿胀,第23天达高峰,持续至第72天(动物处死);X线检查显示:免疫后第30天,软组织明显肿胀,踝关节骨骼结构排列紊乱,间隙不清,可见囊性骨吸收和骨侵蚀;第60天后踝关节骨骼结构排列更加紊乱,骨质疏松和新骨形成并存,提示侵蚀性慢性关节炎.组织病理学观察显示,第72天踝关节滑膜炎性细胞浸润、滑膜增生,关节软骨及骨破坏,显示较明显的慢性关节炎症.血清中总IgG,IgM型类风湿因子(RF),IgG型RF和Ⅱ型胶原抗体于免疫后第15天均明显升高,以后维持在较高水平.结论:应用牛Ⅱ型胶原成功制备大鼠CIA模型,免疫后第12天即加强免疫之后即出现关节炎症的病理变化,至少可持续至第72天. 相似文献
58.
目的建立体外分子水平β-分泌酶(BACE1)抑制剂高通量筛选体系。方法采用均相时间分辨荧光法(HTRF),通过优化反应时间、酶浓度、检测仪器等实验条件,建立BACE1抑制剂高通量筛选体系,根据待测样品对BACE1活性抑制程度筛选其抑制剂。结果采用HTRF法建立了BACE1抑制剂高通量筛选体系,其中反应时间确定为6h、BACE1浓度为670U/L,采用VICTOR3酶标仪测得信噪比为649.6,信背比为44.6,Z′因子为0.91,变异系数小于10%,并筛选到一系列IC50小于10-6mol/L的化合物。结论采用HTRF法建立的BACE1抑制剂筛选体系灵敏度高、特异性和稳定性好,可用于BACE1抑制剂的高通量筛选。 相似文献
59.
六味地黄汤对悬吊应激小鼠下丘脑-垂体-卵巢轴激素的影响 总被引:9,自引:1,他引:9
目的 :观察悬吊应激雌性小鼠下丘脑 垂体 卵巢 (HPO)轴功能的变化及六味地黄汤 (LW )对其影响。方法 :用悬吊方法应激雌性小鼠 (第 1~ 3d悬吊 30min ,以后每 3d增加 30min) ,建立动物HPO轴功能失常模型 ,用放射免疫分析法检测下丘脑促性腺激素释放激素 (GnRH)含量及血清雌二醇浓度 ,用Westernblot检测垂体促黄体生成素 (LH)水平。结果 :悬吊应激组小鼠体重下降 ,动情周期及动情间期延长 ,下丘脑GnRH、垂体LH水平下降 ,血清雌二醇浓度升高。口服LW对应激小鼠动情周期无明显影响 ,但能一定程度减少其体重的下降 ;同时 ,口服LW能显著提高应激小鼠下丘脑GnRH和垂体LH的水平 ,并能明显降低应激小鼠血清雌二醇的浓度。结论 :悬吊应激可导致雌性小鼠HPO轴功能紊乱 ,LW对应激小鼠HPO轴功能紊乱具有明显纠正作用 相似文献
60.
目的探讨肝康颗粒治疗慢性乙肝的疗效。方法分治疗组和对照组进行对比观察,观察组药物为乙肝宁冲剂,严密观察用药后情况。结果治疗组40例1例,总有效率90%,对照组20例1次,总有效率70%,治疗组对慢性肝炎者的呕吐、恶心、黄疸、纳差、肝胀痛、乏力及肝肿大的复常率与对照组相比差异有显著性(P〈0.05),肝康颗粒对肝功能中ALT、AST和TBIL有明显改善作用(P〈0.05),退黄疸作用明显优于对照组。肝康颗粒对HBsAg、HBeAg和HBV-DNA的阴转率分别为10.00%、33.33%和45.83%明显优于对照组。结论肝康颗粒使用方便、安全可靠、效果显著和价格较低廉,未见任何毒副作用及不良反应,是目前治疗慢性乙型肝炎的有效药物之一。 相似文献