癫痫持续状态对发育期大鼠认知功能的影响及cAMP/PKA信号通路所起作用

目的 探讨癫痫持续状态(SE)对发育期大鼠认知功能的影响及环磷酸腺苷/蛋白激酶A(cAMP/PKA)信号转导通路在其中所起的作用.方法 SD大鼠32只按照完全随机数字表法分为SE组、生理盐水(NS)组,每组16只.戊四氮(PTZ)诱导大鼠SE,Morris水迷宫和Y迷宫实验观察大鼠学习记忆功能的改变,放射免疫分析法测定海马组织cAMP的含量,免疫组织化学方法检测海马各区PKA的表达.结果 SE组大鼠在Morris水迷宫中平均逃避潜伏期延长,原平台所在象限的游泳时间缩短,与NS组比较差异有统计学意义(P<0.05).在Y迷宫中达标所需的训练次数增多,24 h记忆保持率下降,与NS组比较差异有统计学意义(P<0.05).NS组大鼠海马cAMP的含量为(280.38±22.66)pmol/g,SE组为(147.25±16.83)pmol/g,差异有统计学意义(P<0.05).SE组CA3区和CA1区PKA的表达较NS组明显减少.结论 SE可以导致发育期大鼠认知功能障碍,其机制可能与cAMP/PKA信号转导通路的功能受损有关.

Abstract：

Objective To observe the influence of status epilepticus (SE) on cognitive function of immature rats and explore the role of hippocampal cAMP/PKA signaling pathway in cognitive function impairment of immature rats. Methods Immature male SD rats were assigned randomly to 2 groups: SE group, induced by intraperitoneal injection of pentylenetetrazole (PTZ, n=16), and normal saline control group (n=16). Learning and memory tests using the Morris water maze and Y-maze were performed 7 d after SE. After testing, alterations of content of cAMP were detected by radioimmunoassay,and the expression of PKA in the hippocampus was examined by immunohistochemistry. Results SE rats exhibited learning and memory deficits in the Morris water maze and Y-maze tests: as compared with those in the controls in Morris water maze, the mean escape latency of searching the platform obviously prolonged and the swimming time in the original platform region significantly shortened in SE rats (P<0.05); as compared with those in the controls in Y maze, the number of standard training times obviously increased and the rate of retention of memory significantly decreased in SE rats (P<0.05). At the same time, the cAMP content in hippocampus of SE rats ([147.25±16.83] pmol/g) was significantly lower as compared with that in controls ([280.38±22.66] pmol/g), and the expression of PKA in the CA3 and CA1 areas within hippocampal area of SE rats was obviously decreased as compared with that in controls (P<0.05). Conclusion SE could result in learning and memory deficits in immature rats, which may be related to the impairment of hippocampal cAMP/PKA signaling pathway.     

合成人降钙素基因实验研究的初步报告

目的 :合成含人胰岛素分泌信号的人降钙素基因。方法 :将人胰岛素分泌信号和人降钙素基因的序列分成六个片断合成单链寡核苷酸作为PCR的引物和cDNA合成的模板。应用动态模板PCR反应直接扩增出人胰岛素和降钙素的编码序列。结果 :经含EB的 1.5 %琼脂糖凝胶电泳 ,证明合成的基因含编码人胰岛素分泌信号和人降钙素的全长DNA序列。结论 :本研究为基因合成提供了一种新的可靠方法。     

癌症患者的信息需求--《癌症患者信息选择问卷》的编制与评估

目的：研制和测评癌症患者信息选择问卷(IPQCP)。方法：以严谨的程序编制问卷，并随机抽取501例癌症患者、169位亲属和86位医护人员进行测定，对问卷作筛选和信度、效度等分析。结果：1．最后问卷共有19个条目，含诊断、治疗、预后、其他四个维度。2．四个维度和总分的重测信度分别为0．85、0．81、0．83、0．76和0．96；Cronbach α分别为0．82、0．89、0．99、0．89和0．95；分半信度为0．95。3．问卷能较好反映癌症患者对信息内容和量的需求，结构与设计的理论构思相符，参照Cassileth信息清单的效标效度为0．9l。结论：IPQCP具有较好的信度和效度，在临床上有一定的实用价值。     

酸性神经肽1对VD小鼠脑内SOD、MDA和NO的影响

目的：探讨酸性神经肽1（BANP－1）对血管性痴呆（VD）小白鼠脑内超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）的影响。方法：将小白鼠随机分为5组，每组12只，除正常对照组外，其余4组分别在高脂血症的基础上，用颈总动脉缺血再灌注法建立VD模型，其中1组为VD模型组，其它3组在手术后分别给予BANP－1 1.5g/(kg.d),0.75g(kg.d),0.3g/(kg.d)，连续灌胃15d，每天1次，每次1ml，15d后将小白鼠断头处死并立即在冰盘中开颅取脑做组织匀浆，取上清液测MDA、NO含量和SOD活性。结果：VD模型组较正常对照组脑内SOD活性明显降低（P＜0．01），MDA、NO含量明显升高（P＜0．01）。BANP－1各治疗组较VD模型组脑内SOD活性明显升高（P＜0．01），MDA、NO含量明显下降（P＜0．01）。结论：BANP－1可明显升高VD小白鼠脑内SOD活性，降低MDA和NO含量。     

癫(癎)持续状态对发育期大鼠学习记忆及海马磷酸化的c-AMP反应元件结合蛋白表达的影响

目的探讨癫癎持续状态(SE)对发育期大鼠学习记忆功能及海马磷酸化的c-AMP反应元件结合蛋白(pCREB)表达的影响。方法6周龄SD大鼠32只随机分为SE组和9g/L盐水对照组(NS组)。戊四氮(PTZ)诱导发育期大鼠SE。采用Morris水迷宫和Y迷宫观察大鼠学习记忆功能的改变,应用免疫组织化学方法检测大鼠海马各区pCREB的表达。结果与NS组比较,SE组在Morris水迷宫测试中平均逃避潜伏期明显延长(P<0.05),原平台所在象限的游泳时间明显缩短(P<0.05);Y迷宫中达标所需的训练次数显著增多(P<0.05),24h记忆保持率明显降低(P<0.05)。海马CA1区和齿状回(DG)区pCREB表达显著下调(P<0.05)。结论SE可使发育期大鼠学习记忆功能受损,其机制可能与海马pCREB表达减少有关。     

丹参对幼年大鼠癫痫持续状态学习记忆及海马ChAT、AChE活性的影响

目的：观察丹参（RSM）对幼年大鼠癫痫持续状态（SE）学习记忆及海马胆碱乙酰转移酶（ChAT）和乙酰胆碱酯酶（AChE）活性的影响。方法：戊四氮（PTZ）诱导大鼠SE,丹参（RSM）进行干预,苯巴比妥钠（PB）作为对照,采用Morris水迷宫观察大鼠空间记忆的改变,应用匀浆比色法检测大鼠海马ChAT、AChE活性。结果：Morris水迷宫测试中PTZ组逃避潜伏期延长（P〈0.05）,有效搜索策略百分比降低（P〈0.01）,平台象限游泳时间百分比降低（P〈0.01）,海马ChAT、AChE活性降低（P〈0.01）;RSM组SE后下降的ChAT、AChE活性有所提高,平均潜伏期较PTZ组显著缩短,目标象限停留时间显著高于PTZ组,第1～3天有效搜索策略百分比高于PTZ组,第2～3天高于PB组（P〈0.05）;PB组仅提高AChE活性,PB组平均潜伏期较PTZ组有缩短趋势,但仅第1天有统计学意义,PB组目标象限停留时间显著高于PTZ组。结论：SE可使幼年大鼠学习记忆受损,ChAT、AChE可能参与这一变化的病理生理过程。丹参用药可能通过修复海马胆碱能系统改善幼年大鼠SE学习记忆损伤。     

癌症高危因素及先兆表现清单的编制

目的:编制癌症高危因素及先兆表现清单并测定其信效度.方法:根据癌症发生最常见的高危因素及先兆表现建构理论维度,参考前期研究、C型行为特征及量表编写条目,随机抽取693例癌症患者进行测定,请患者、129位亲属和103位医护人员做条目重要性评分,并请706位人口统计学资料与患者类似的健康人填写清单.结果:①经过项目分析和探索性因素分析,最后保留19个条目,归纳为躯体、心理、社会因素、生活习惯4个因子(维度).②清单具较好的结构效度,4因子累计解释方差变异的77.92%;比较患者与健康人群的四个维度均分和总均分有显著性差异.③四个维度均分和总均分的重测信度分别为0.82、0.76、0.80、0.77和0.83;Cronbach α分别为0.76、0.79、0.83、0.80和0.86;分半信度为0.90.结论:症高危因素及先兆表现清单具较好的效度和信度,在临床上有一定的实用价值.     

数字人体原型——人体系统

笔者首先给出了数字人体原型的概念,然后对数字人体原型--人体系统的系统、结构、层次;人体系统的环境、行为、功能和人体系统的状态、演化、过程进行了详细地论述,为深刻认识数字人体的原型提供了理论基础和研究思路。     

葛根素抑制乙醇诱导骨髓基质细胞成脂分化的实验

背景:动物实验证明乙醇可引起股骨头内脂肪积聚,导致骨坏死。分子生物学实验证明乙醇能够诱导骨髓基质细胞成脂分化。若某种药物能够对抗乙醇诱导骨髓基质细胞的成脂分化作用,则可能防治酒精性骨坏死。目的:从细胞生物学角度观察葛根素对抗酒精诱导骨髓基质细胞成脂分化作用,探讨葛根素对酒精性骨坏死的防治作用。设计:随机对照实验。单位:郑州大学第一附属医院骨科和郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室。材料:实验于2000-04/2002-12在郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室实验室完成。选用清洁级健康昆明小鼠50只,6～8周龄,雌雄不拘。获取双侧股骨骨髓细胞,细胞接种密度1.5×106/cm2,置入6孔及24孔培养板内,随机分组,每孔作为1个样本,每组为24个样本。方法:分离培养小鼠骨髓基质细胞,随机分为3组:模型组(给予乙醇0.09mol/L处理细胞),实验组(乙醇0.09mol/L和葛根素终浓度为0.01g/L),对照组(无乙醇和葛根素)。苏丹Ⅲ染色,光镜下脂肪细胞计数;测定细胞内三酰甘油含量、碱性磷酸酶活性和细胞培养液中的骨钙素含量。主要观察指标:①3组小鼠骨髓基质细胞分化为脂肪细胞结果。②3组小鼠骨髓基质细胞内三酰甘油含量。③3组小鼠骨髓基质细胞内碱性磷酸酶活性值。④3组细胞培养液中骨钙素含量。结果:①处理细胞并培养21d后,实验组、对照组中脂肪细胞均比模型组显著为少。模型组中脂肪细胞数是实验组的8.9倍,是对照组的15.6倍[(319.17±19.92),(35.92±23.77)(20.42±12.15)个/cm2,P<0.001]。②处理细胞并培养21d后,实验组和对照组中三酰甘油含量均明显低于模型组[(4.15±1.92)和(3.42±1.60),(11.55±4.42)μg/孔,P<0.001]。③处理细胞并培养12d后,实验组和对照组细胞内碱性磷酸酶活性均明显高于模型组[(9.51±2.96),(11.18±3.11),(4.84±2.23)μkat/g,P<0.001]。④处理细胞并培养14d后,实验组和对照组培养液中的骨钙素含量分别是模型组的2.2倍和2.7倍,与模型组间的差异均非常显著[(11.11±4.57),(13.43±5.29),(4.95±2.31)μg/g,P<0.001]。结论:葛根素能够抑制酒精诱导骨髓基质细胞分化为脂肪细胞,维持其成骨分化,可能预防骨坏死。     

人骨肉瘤组织中cyclinE和ki-67蛋白的表达

目的 :探讨人骨肉瘤组织中cyclinE和ki 6 7蛋白的表达。方法 :采用免疫组化S P法检测 30例骨肉瘤和10例骨软骨瘤组织中cyclinE和ki 6 7蛋白的表达情况。结果 :骨肉瘤组织中cyclinE及ki 6 7蛋白阳性表达率分别为 93.33%和 6 6 .6 7% ,骨软骨瘤中分别为 30 %和 10 % ,2者的阳性表达率在不同组织中差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。cyclinE蛋白表达强度与ki 6 7蛋白表达强度之间呈正相关 (rs=0 .6 4 1,P <0 .0 1)。结论 :骨肉瘤组织中cyclinE和ki 6 7蛋白均为高表达 ,它们与骨肉瘤的发生、发展有相关性。