浅议药物临床试验中三轴垂直培训模式的体会

药物临床试验是新药研发过程中一个必不可少的重要环节,而药物临床试验质量管理规范（简称GCP）是其法定要求,以确保临床试验真实、科学合理、符合伦理原则。在我国,医院药物临床试验机构保障其实施。国家食品药品监督管理总局（CFDA）定期对机构核查认定,对存在问题的机构限期整改。2012年10月我院接到国家食品药品监督管理总局整改复核通知,接通知后医院领导高度重视,全院上下进入全面整改迎接复核检查阶段。     

不同浓度舒芬太尼复合小剂量罗哌卡因腰硬联合麻醉在剖宫产术中的应用

目的观察不同浓度舒芬太尼复合小剂量罗哌卡因腰硬联合麻醉应用于分娩镇痛的效果。方法将258例采用腰硬联合阻滞行剖宫产术的患者随机分为A、B、C三组,每组各86例,分别给予O．2、0．4、0．6μg／mL舒芬太尼复合0．1％盐酸罗哌卡因。结果与A组比较,B、C组感觉阻滞起效时间明显缩短,感觉阻滞时间明显延长（P〈0．05）;而B组与C组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。三组患者运动阻滞起效时间和运动作用时间比较;差异均无统计学意义（P〉0．05）。B、C组术后2、6、12hVAS评分显著低于A组（P〈0．05）,而B组与C组VAS评分比较差异无统计学意义（P〉0．05）。三组术后24hVAS评分比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。A组和B组不良反应的发生率分别为7．0％、9．3％,显著低于C组（20．9％）,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论0．4μg／mL舒芬太尼复合0．1％盐酸罗哌卡因腰硬联合麻醉应用于分娩镇痛安全有效．可增强感觉阻滞作用,缓解术后早期疼痛。     

冠心病健康教育效果评价指标研究现状与思考

健康教育作为有效的干预手段,在冠心病预防和康复中的作用已众所周知。通过分析我国冠心病健康教育效果评价指标存在问题、解决方法及研究方向,提出构建近期与远期评价指标相结合的规范、合理、完善的评价指标体系及相关量表等建议,以促进健康教育效果评价的科学化、标准化、规范化。     

环境激发吗啡条件性位置偏爱重现大鼠海马内脑源性神经营养因子及c-fos的表达

目的:观察吗啡条件性位置偏爱(CPP)重现大鼠海马内脑源性神经营养因子(BDNF)及即早基因c-fos的表达.探讨BDNF和c-fos对吗啡成瘾记忆的影响.方法:雄性SD大鼠36只,随机分为吗啡CPP激发组(MR组)、吗啡CPP消退组(ME组)及生理盐水对照组(NS组),每组12只.实验1～7天,MR组、ME组采用CPP实验,建立大鼠码啡精神依赖动物模型,实验第8天进行训红后CPP测试,给予7d消退期,实验第16天进行消退后测试,实验第17天对MR组大鼠进行环境激发,第18天进行激发后CPP测试.记录CPP实验过程中15min内伴药箱停留时间;激发后CPP测试完毕后,应用免疫组化方法测定大鼠海马内BDNF和c-foc的表达.结果:3组不同时间点大鼠伴药箱停留时间差异有统计学意义(F时间=5076,P=0.007;F组别=4.07,P=0.028).MR组大鼠海马中BDNF、c-fos的阳性细胞数及平均光密度均高于NS组和ME组(P均<0.01).结论:BDNF、c-fos可能通过成瘾记忆的形成,参与环境激发的大鼠吗啡CPP重现.     

院内制剂金黄膏联合放血疗法对下肢丹毒病程及生活质量的影响

目的:探讨院内制剂金黄膏联合放血疗法对下肢丹毒病程及生活质量的影响。方法:选择2019年10月—2021年2月收治的下肢丹毒患者60例。按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组30例。对照组采用常规治疗,观察组在对照组基础上使用院内制剂金黄膏外敷联合放血疗法,比较两组治疗前、治疗1个疗程后血清炎症因子和抗氧化因子水平;比较两组治疗期间局部皮温、生活质量及临床效果。结果:治疗后观察组超敏C反应蛋白(hs-CRP)和肿瘤坏死因子(TNF-α)低于对照组(P<0.05),抗氧化因子丙二醛(MDA)低于对照组(P<0.05),超氧化物歧酶(SOD)高于对照组(P<0.05);治疗后3 d和治疗后7 d,观察组局部皮温恢复正常且低于对照组(P<0.05),诺丁汉健康问卷评分显著高于对照组(P<0.05),痊愈率显著高于对照组(P<0.05),无效率低于对照组(P<0.05)。结论:针对急性下肢丹毒患者,使用院内自制金黄膏联合三棱针放血治疗,能有效控制机体炎症反应,提高抗氧化能力,缩短病程,提高患者生活质量。     

不同剂量的艾司氯胺酮在剖宫产全身麻醉诱导中的应用

目的 观察不同剂量艾司氯胺酮对剖宫产全身麻醉诱导中丙泊酚用量的影响，并评估其应用安全性。方法 选择拟行剖宫产术的住院产妇60例，随机分为空白对照组(C组)、艾司氯胺酮低剂量组(L组)和高剂量组(H组)，每组20例。3组均采用快速静脉诱导，L组、H组分别静脉注射艾司氯胺酮0.25、0.5 mg·kg^-1,C组给予氯化钠注射液，随后均给予丙泊酚1 mg·kg^-1·min^-1、瑞芬太尼1μg·kg^-1、罗库溴铵0.6 mg·kg^-1。于Nacrotrend指数稳定在D₁～D₂水平时行气管插管，后以丙泊酚和瑞芬太尼静脉泵注维持麻醉，手术剖出婴儿后，静脉注射舒芬太尼0.5μg·kg^-1。比较3组产妇麻醉诱导中丙泊酚的用量，麻醉诱导前、气管插管时及胎儿取出时的平均动脉压(MAP)、心率(HR)和Nacrotrend指数，记录每组麻醉诱导时间、胎儿取出时间、手术时间、麻醉复苏时间以及围术期不良反应的发生情况。评估新生儿的Apg...     

逆转录病毒介导的HO-1基因在尼洛替尼诱导K562/A02耐药细胞凋亡中的作用

目的 研究逆转录病毒介导的血红素加氧酶-1(HO-1)基因在尼洛替尼(Nilotinib,AMN107)诱导慢性髓性白血病(CML)耐药细胞凋亡中的作用.方法 制备高病毒滴度的逆转录病毒载体pQCXIP-EGFP-HO-1,建立稳定转染HO-1基因的K562/A02细胞.采用RT-PCR鉴定K562/A02细胞中HO-1基因的表达.RT-PCR和Western blot法检测AMNl07作用24 h后K562/A02细胞中HO-1 mRNA和蛋白的表达,采用MTT法观察细胞增殖变化,通过实时荧光定量PCR(RQ-PCR)法检测bcr-abl融合基凶的表达.通过流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布.结果 成功构建重组逆转录病毒载体,并建立稳定转染HO-1基因的K562/A02细胞系;证实转基冈组细胞HO-1 mRNA显著表达.AMN107作用3组细胞后,转基因组细胞HO-1 mRNA和蛋白的表达明显高于转空载体组和未转染组,差异有统计学意义(P<0.05);MTT法检测显示AMN107处理后细胞增殖受抑.而转基因组细胞存活率明显高于转空载体组和未转染组,差异有统计学意义(P<0.05);RQ-PCR法检测结果显示,10 ILLmol/L AMNl07抑制bcr-abl基因的表达,但转基因组的bcr-abl基因表达水平(Ct值18.15±0.18)高于转空载体组(20.32±0.20)和未转染组(20.51±0.21),差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞术检测结果显示10 μmol/L AMNl07作用24 h后,转基因组、转空载体组、未转染组细胞凋亡率分别为(17.26±0.23)%、(39.47±0.17)%、(41.84±0.09)%.未加药转基因组、未加药未转染组细胞凋亡率分别为(3.74±0.03)%、(5.91±0.08)%;细胞周期分析结果显示经AMNl07处理后,Go/G1期和S期细胞明显减少,细胞阻滞在G2/M期,而转基因细胞组细胞周期改变不如转空载体组、未转染组明显.结论 AMN107可抑制CML耐药细胞增殖且诱导细胞凋亡,HO-1基因在CML耐药细胞凋亡过程中起保护作用,与促进CML耐药细胞的生长有关.     

体外诱导K562细胞尼洛替尼耐药及其机制的初步探讨

目的 体外建立对尼洛替尼(nilotinib)耐药的白血病细胞株,并初步探讨其耐药机制.方法 以尼洛替尼浓度递增的方法诱导人白血病细胞系K562细胞对其产生耐药株,命名为K562-RN,MTT法确定其耐药倍数.流式细胞术检测细胞凋亡.采用荧光原位杂交(FISH)法检测K562-RN细胞中bcr-abl融合基因表达.实时荧光定量PCR (RQ-PCR)和Western blot法检测bcr-abl、HO-1、mdr1、Bcl-2和caspase-3 mRNA和相关蛋白在耐药和敏感细胞中的表达.结果 成功建立了针对尼洛替尼耐药的人白血病细胞株K562-RN.尼洛替尼对K562、K562-RN细胞的半数抑制浓度(IC50值)分别为(12.320±1.720) μmol/L和(24.742 ±2.310)μmol/L,K562-RN细胞相对于K562细胞的耐药倍数为2.01倍,且对阿霉素、高三尖杉酯碱、鬼臼乙叉甙和伊马替尼具有不同程度的交叉耐药性.在不同浓度尼洛替尼诱导下,K562-RN细胞凋亡率均较K562细胞明显下降.FISH法分析结果显示K562-RN细胞中bcr-abl融合基因阳性率为92％.K562-RN细胞中bcr-abl、HO-1 mRNA及其相应蛋白高表达,而促凋亡基因caspase-3 mRNA及蛋白呈低表达,与K562细胞相比表达水平差异有统计学意义(P＜0.05),多药耐药基因mdr1及其编码蛋白P-gp在K562-RN细胞中呈高表达.结论 通过药物浓度递增法成功建立了对尼洛替尼耐药的人白血病细胞株K562-RN,初步探讨了其耐药机制可能与bcr-abl、HO-1及mdr1高表达,同时下调caspase-3 mRNA及其蛋白的表达有关.     

AMN107联合血红素加氧酶-1抑制剂诱导慢性髓系白血病细胞凋亡

运用AMN107(尼洛替尼)联合血红素加氧酶-1(HO-1)抑制剂锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)作用于慢性髓系白血病(CML)细胞株K562细胞,研究其对CML细胞增殖的影响并探讨其作用机制。采用MTT法和台盼蓝染色法检测AMN107(10μmol/L)及ZnPPⅨ(10μmol/L)单独或联合处理不同时间的细胞增殖率;半定量RT-PCR法和Westernblot法检测空白对照组、ZnPPⅨ(10μmol/L)组、AMN107(10μmol/L)组、AMN107(10μmol/L)联合ZnPPⅨ(10μmol/L)组48 h时细胞HO-1的表达;AnnexinⅤ/PI双染色法检测处理48 h时各组细胞凋亡情况。结果表明:联合用药对细胞的抑制作用最强,且呈时间依赖性;联合用药组HO-1的表达量最低;空白对照组、ZnPPⅨ(10μmol/L)组、AMN107(10μmol/L)组、AMN107(10μmol/L)联合ZnPPⅨ(10μmol/L)组48 h时细胞凋亡率分别为(11.38±0.02)%、(17.44±0.08)%、(39.81±0.07)%和(56.46±0.19)%。结论:第二代酪氨酸激酶抑制剂AMN107具有诱导CML细胞凋亡的作用;抑制HO-1表达能加强AMN107对CML细胞的杀伤作用,这为临床进一步提高CML的疗效提供实验依据。