多位点测序技术在病原菌核型分析中的应用

随着分子生物学研究技术的发展，有人说在未来5-10年中，对人类健康做出贡献的最关键生物技术是传染病的分子诊断技术。核酸分类法是对物种核酸分析得到的遗传相关性（genetic relatedness）分类，这种分类是以决定生物表型特征的遗传物质——核酸作为比较准绳，所以它是一种客观和可信度较高的分类方法。目前应用较广泛的方法如脉冲场电泳（pulsed-field gel electrophoresis，PFGE）和随意引物PCR（AP-PCR）都是依赖于相对核酸片段的大小，     

科研作为医学生第二课堂教学的实践

为了适应国家建设和发展的需要,培养创新能力强的高素质医学人才,作者在医学本科生中开展了科研作为第二课堂教学的活动。从建立科研小组、课题申报、项目实施、结题报告及论文撰写、论文的口头报告等全过程对医学生进行训练,使医学生学到了第一课堂不能学到的东西,学生的素质得到全面提高。因此,科研是培养医学生的创新精神、提高综合素质的有效途径。     

粪肠球菌sprE基因的功能研究

最近有报道在肺炎链球菌发现HtrA（high-tempemtttre requirement A）蛋白，与细菌克服高温、氧化和渗透压力有关。肠球菌原来属于D组链球菌，其许多特性与链球菌相似。肠球菌能否产生HtrA蛋白酶以及确切的功能目前尚不清楚。我们利用BLAST将肺炎链球菌HtrA蛋白酶编码基因与粪肠球菌染色体基因组进行同源性比较，发现粪肠球菌有一个全长为851bp的开放性读框与肺炎链球菌htrA基因有较高的同源性。进一步从基因文库查找此开放性读框，发现它是编码粪肠球菌假定的丝氨酸蛋白酶基因，被命名为sprE。     

双歧杆菌基因工程疫苗研究进展

双歧杆菌是人类最早发现的生理性细菌之一,是能在健康人肠道内定植的益生菌.如今,随着分子生物技术的发展,双歧杆菌基因工程疫苗研究日趋受到重视.此文综述了双歧杆菌基因工程疫苗的理论基础、研究进展以及前景.     

幽门螺杆菌粘附机制及抗粘附剂研究

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）对胃粘膜的粘附是其致病的首要条件，了解其粘附机制是开展对Hp感染及其相关疾病防治的关键。，本文就Hp的粘附机制及抗粘附的研究近况进行了综述。     

低毒力菌株小鼠细菌性腹膜炎模型的建立

目的 将无菌鼠粪提取物(sterile rat fecal extracts,SRFE)应用于低毒力菌株小鼠急性细菌性腹膜炎模型的构建并评价其应用效果.方法 用SRFE和/或5%高活性干酵母液将菌液稀释至感染动物所需终浓度,每只小鼠腹腔注射0.5 ml菌液,比较添加前后最低致死剂量的变化;比较SRFE浓度改变及与5%高活性干酵母液配伍体积比改变时小鼠死亡率的变化.结果 添加20%SRFE后,细菌的最低致死剂量降低了78%～90%.增加SRFE的浓度,可提高小鼠死亡率.单用SRFE的效果并不理想,仍需与5%高活性干酵母液配伍使用.SRFE和5%高活性干酵母液不同体积比(2∶1或3∶1)时的小鼠死亡率无显著性差异(P＞0.05).结论 在建立低毒力菌株小鼠急性细菌性腹膜炎模型时SRFE的添加可有效降低细菌的最低致死剂量.     

导尿管相关粪肠球菌生物被膜形成的分子机制探讨

目的 探讨经筛选分离的导尿管生物被膜粪肠球菌的明胶酶编码基因gelE、菌毛操纵子ebpA,毒力调控器fsr系统的fsrB基因与粪肠球菌生物被膜形成的相关性,为深入研究粪肠球菌生物被膜形成的分子机制奠定基础.方法 运用刚果红培养基筛选导尿管生物被膜阳性菌并对其进行生物被膜半定量检测;通过细菌生理生化反应进行鉴定;采用PCR技术检测分离得到的生物被膜粪肠球菌及其相应的浮游菌的gelE、ebpA和fsrB基因.结果 从导尿管中分离鉴定筛选到21株生物被膜粪肠球菌和21株浮游状态粪肠球菌.21株粪肠球菌生物被膜菌组gelE、ebpA和fsrB基因检出的阳性率分别是9.52％(2/21)、95.24％ (20/21)、9.52％(2/21);其相应的21株浮游菌组粪肠球菌检出的阳性率分别是85.71％(18/21)、9.52％ (2/21)、90.48％(19/21),P均＜0.05.结论 gelE、ebpA和fsrB基因与粪肠球菌生物被膜的形成密切相关.ebpA基因能够促进粪肠球菌生物被膜的形成,gelE和fsrB基因会抑制粪肠球菌生物被膜的形成.     

幽门螺杆菌免疫学检测方法研究进展

幽门螺杆菌（helicobacter pylori,Hp）是1982年由澳大亚学者Warren和Marshall从胃炎和消化性溃疡病人胃黏膜活体组织中培养出来的一种革兰氏阴性螺旋形细长微弯杆菌。Hp感染不仅能引起慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃癌和胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤等多种胃肠道疾病,并且HP被证实为I类致胃癌致病因子[1,2]。     

屎肠球菌透明质酸酶全长基因的克隆表达和免疫原性

目的构建屎肠球菌透明质酸酶（hyaluronidase，hyl）基因重组表达质粒，在大肠埃希菌中表达获得重组蛋白，探讨Hy1蛋白经口服免疫小鼠后，机体产生的免疫应答。方法PCR扩增hyl基因片段，克隆至pQE-30质粒上，构建重组质粒pQE-hyl，转化E，coli DH5α，经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导表达融合蛋白Hy1；Western印迹分析其免疫反应性。融合蛋白经镍离子柱纯化后，Hy1和屎肠球菌全菌蛋白TX0016分别给小鼠灌胃进行免疫，ELISA法检测小鼠血清IgG、IgA、小肠黏液sIgA和粪便sIgA。用TX0016进行腹腔攻击已免疫的小鼠，观察其免疫保护性。结果经测序hyl基因全长1662bp，为编码553个氨基酸残基的多肽。经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）分析相对分子质量约为60000。可溶性表达占全菌的38％以上，经亲和层析后可获得纯度为92％以上的重组蛋白。Western印迹证实了其免疫反应性。灌胃免疫小鼠后，ELISA法检测结果Hy1组血清IgA、IgG、粪sIgA、肠黏液sIgA分别为0．365±0．048、0，431±0，064、0．743±0，056和1．112±0．113，对照组则分别为0，051±0．013、0．098±0．019、0．102±0，032和0，187±0，051，差异有统计学意义（P〈0．01）。用半数致死量（I，D50）的细菌量攻击后，Hy1免疫组小鼠的存活率为70％，而对照组为50％。结论融合蛋白Hy1经口服免疫可有效诱导黏膜免疫应答，产生高水平的sIgA，发挥局部黏膜免疫作用。     

屎肠球菌耐万古霉素的分子生物学机制及毒力因子

屎肠球菌与其他临床上重要的革兰阳性菌相比,具有更强的天然耐药性,而且也更易被诱导产生新的耐药性。近年来,屎肠球菌作为一种引起医院感染的重要病原菌已经引起了医学界的广泛关注。屎肠球菌感染率上升的主要原因可能与其毒力增强或获得新的毒力基因及获得耐药性有关,因此研究其耐药基因和毒力基因,发现屎肠球菌感染的耐药机制和发病机制,是控制屎肠球菌感染最有效的方法。