TLR4-NOD2协同信号传递增强树突状细胞活性的作用

目的探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)-核苷酸结合寡聚化结构域样受体2(nucleotide-binding oligomerization domain 2,NOD2)协同信号(T4N2)传递在增强树突状细胞(dendritic cell,DC)活性中的作用。方法对数生长期DC随机分为空白对照1组(RPMI-1640培养基1mL)、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)1组(RPMI-1640培养基1mL+LPS 10μg)、胞壁酰二肽(muramyl dipeptide,MDP)1组(RPMI-1640培养基1mL+MDP 5ng)、LPS+MDP1组(RPMI-1640培养基1mL+LPS 10μg+MDP 5ng),培养24h,采用ELISA法检测4组细胞上清中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平;体外设计并合成针对NOD2基因的慢病毒shRNA干扰载体,转染DC 48h后,将DC分为空白对照2组、LPS2组、MDP2组,LPS+MDP2组,采用ELISA法检测培养24h时细胞上清中IL-6水平。结果培养24h,IL-6水平在LPS1组[(221.00±5.00)ng/L]、MDP1组[(213.3±6.11)ng/L]、LPS+MDP1组[(469.00±3.60)ng/L]均高于空白对照1组[(125.66±4.50)ng/L](P0.05),且LPS+MDP1组高于LPS1组、MDP1组(P0.05);沉默NOD2基因后,LPS+MDP2组及MDP2组IL-6水平[(238.66±7.02)、(125.66±7.67)ng/L]低于LPS+MDP1组和MDP1组(P0.05);空白对照2组及LPS2组IL-6水平[(116.30±5.68)、(207.00±8.54)ng/L]与空白对照1组及LPS1组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 TLR4、NOD2间存在协同作用并可促进DC活化。     

志贺菌感染的多重PCR快速诊断技术的建立

目的 探讨多重PCR技术在志贺菌感染快速诊断中的应用.方法 用多重PCR法对临床分离的68株志贺菌毒力基因shet1A、shet1B、ial和ipaH进行扩增检测.结果 68株志贺菌均在423bp(ipaH)处出现条带,在147bp(shet1B)、309bp(shet1A)、320bp(ial)处均出现了至少一个条带,与常规鉴定法的符合率达100%.结论 成功建立了志贺菌感染的多重PCR快速诊断技术.     

志贺菌的疫苗研究进展

志贺菌属是人类细菌性痢疾的病原菌,俗称痢疾杆菌,属于革兰氏阴性兼性细胞内致病菌,临床上可引起细菌性痢疾。由于经济发展水平的不平衡、卫生条件不能得到充分的改善、抗药菌株的不断出现,决定了当前迫切需要研制痢疾疫苗。现对第一代（全细胞死疫苗）、第二代（减毒活疫苗）和第三代（亚单位疫苗）痢疾杆菌疫苗的研究进展作一概述。     

肠球菌生物被膜形成的分子机制研究进展

肠球菌是医院感染的重要条件致病菌,随着对肠球菌致病机制研究的逐步深入,研究者们发现肠球菌与多种置入医疗器材如导尿管、静脉插管和人工瓣膜所引起的生物被膜相关感染有关.生物被膜不仅为细菌提供良好的避护所,而且机体防御系统及抗菌药物难以将其清除,因此对肠球菌生物被膜形成机制的深入研究,在感染的防治中具有重要的意义.此文对肠球...     

医学本科生艾滋病相关知识和态度的现况调查

[目的]了解高低年级医学生艾滋病知识的现状、AIDS知识来源及其对AIDS/HIV感染者的态度,探讨有效的干预模式,为开展艾滋病的健康教育提供科学依据. [方法]通过整群抽样用问卷调查方式对2005级在校医学本科生和2008级医学新生进行AIDS相关问题的现况调查,并运用SPSS11.5软件进行统计分析. [结果]医学本科生对艾滋病知识均有一定认识,高年级学生对回答艾滋病的相关知识的正确率明显高于低年级学生.2005级和2008级学生获取艾滋病相关知识的途径总的差异有统计学意义(X2=644,P<0.001).高年级学生艾滋病知识主要来源于专业课程、专题讲座以及校园网络;低年级学生主要来源于父母亲戚、报刊杂志和电视广播等媒体.[结论]医学本科生对艾滋病知识有一定认知,但仍需加强医学本科生特别是新生艾滋病知识、态度和行为方面的健康教育.     

幽门螺杆菌粘附机制及抗粘附剂研究

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori ,Hp)对胃粘膜的的粘附是其致病的首要条件,了解其粘附机制是开展对Hp感染及其相关疾病防治的关键。本文就Hp的粘附机制及抗粘附剂的研究近况进行了综述。     

幽门螺杆菌HpaA-CtxB融合蛋白的表达及其免疫原性研究

目的 :探讨幽门螺杆菌融合蛋白粘附素 霍乱毒素B亚单位 (HpaA CtxB ,HCTB)经口服免疫小鼠后 ,机体产生的免疫应答。方法 :用PCR方法扩增HpaA和CtxB两个目的基因片段 ,将它们分别克隆至pET 32a( )和pQE 30质粒上 ,然后同时插入pQE 30表达载体中 ,构建含双基因的的表达质粒pQE HCTB ,转化E .coliDH5α,经IPTG诱导表达融合蛋白HCTB ;West ernblot分析其免疫反应性。融合蛋白经镍离子柱纯化后 ,HCTB和HpaA分别给小鼠灌胃进行免疫 ,ELISPOT和ELISA分别检测小鼠胃粘膜、派伊尔小结 (Peyer′spatches ,PP)抗原特异性抗体分泌细胞 (ASC) ,和血清IgG、IgA、小肠粘液sIgA和粪便sIgA。结果 :经测序HCTB融合基因片段由 116 1bp组成 ,为编码 387个氨基酸残基的多肽。经SDS PAGE分析相对分子量 (Mr)约为4 0 0 0 0。可溶性表达占全菌的 2 5 %以上 ,经亲和层析后可获得纯度为 92 %以上的重组蛋白。Westernblot分析其能分别与HpaA抗血清和CT抗血清特异性反应。灌胃免疫小鼠后ELISPOT和ELISA检测结果 ,胃和PPsIgA ASC、IgG ASC数量明显增加 ,尤以sIgA ASC为甚 ,同时血清IgA、IgG ,粪sIgA ,肠粘液sIgA也明显高于HpaA组和对照组 (P <0 0 5和P <0 0 1)。结论 :融合蛋白HCTB经口服免疫可有效诱导粘膜免疫应答 ,产生高水平     

粪肠球菌类毒力基因sprE功能的动物实验研究

目的构建粪肠球菌丝氨酸蛋白酶基因(sprE)突变株,通过动物实验来研究sprE基因的功能。方法通过小鼠腹膜炎模型和兔心内膜炎模型来评价粪肠球菌sprE基因的突变株(sprE mutant)的毒力下降情况。结果突变株在小鼠腹膜炎模型中的半数致死量(LD50)提高了7倍,小鼠的存活率明显高于野生株感染组,引起的兔心内膜炎的病理改变也较野生株轻微。结论sprE基因在粪肠球菌致病中起着重要的作用,可能是粪肠球菌的毒力因子之一。     

注射用法罗培南钠对金葡菌的体内外抗菌活性研究

目的研究注射用法罗培南钠对临床分离的金葡菌的体内外抗菌活性。方法用头孢西丁纸片法在近年来本室保存的临床分离金葡菌中筛选耐甲氧西林的金葡菌（methicillin resistant staphylococcus aureus，MRSA），用琼脂平板稀释法测定法罗培南和万古霉素对甲氧西林敏感的金葡菌（methicillin sensitive staphylococcus aureus，MSSA）和MRSA菌株的最低抑菌浓度（minimal inhibitory concentration．MIC）。根据MIC选择对法罗培南敏感、中度和高度耐药的MRSA菌株及1株MSSA建立小鼠腹膜炎模型，以注射用法罗培南钠及万古霉素通过静脉注射进行感染动物的治疗，评价对感染小鼠的保护作用。结果151株金葡菌中共分离出65株MRSA．阳性率为43％；体外试验法罗培南和万古霉素对86株MSSA均敏感。65株MRSA对法罗培南敏感者10株，其余均耐药；对万古霉素均敏感。注射用法罗培南钠对4株菌的ED50分别为38．3、38．6、71．9和7．07mg／kg；万古霉素则为2．25、10．18、20．85和1．77mg／kg。结论注射用法罗培南钠对MSSA有良好的体内和体外抗菌活性；注射用法罗培南钠对MRSA无效．即使体外敏感。     

医学细菌学实验课改革的尝试

为了在医学细菌实验课中培养学生实际操作能力和独立工作的能力,我们在我院98级临床医学及护理学五年制本科学生中进行了精心选择实验内容,将实验课相对独立;以病例讨论开始,开设连续性综合实验,增加学生动手机会,培养学生实际工作能力和配以录象及图片教学使教学规范化,内容直观化的细菌学实验课程的改革,结果显示。实验教学方式,方法及内容选择较好,得到了绝大部分学生的认可。