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目的 探讨大理地区志贺菌的血清型分布以及多重PCR技术在志贺菌检测中的应用.方法 用常规分离培养、生化鉴定和血清学分型法对腹泻患者粪标本进行检测,分离到的标本再用多重PCR法对志贺菌的毒力基因shetA、shetB、ial和ipaH进行扩增检测.结果 通过常规培养和生化反应鉴定,得到68株志贺菌.血清学鉴定显示福氏志贺菌41株,宋内志贺菌25株,鲍氏志贺菌2株.通过多重PCR扩增后68株志贺菌均在423 bp(ipaH)处出现了条带,检出率为100%,其余在147 bp(shetB)、309 bp(shetA)处以及320 bp(ial)处均出现了至少一个条带,与常规鉴定法的符合率达100%.5份直接用阳性粪便标本提取DNA为模板进行多重PCR扩增后,也得到了同样的结果.结论 大理地区细菌性痢疾患者感染以福氏志贺菌为主,多重PCR技术可用于志贺菌的快速检测和流行病学调查. 相似文献
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幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)被公认为是慢性活动性胃炎、消化性溃疡等疾病发生的主要病因,并与胃腺癌、胃淋巴瘤的发生密切相关,是一级致癌因子[1]。虽然HP确切的致病机制尚未完全阐明,但HP必须首先定植于胃粘膜,然后再进一步侵入宿主防御系统,由其毒素的直接作用和诱导的炎症反应等间接作用损伤组织而致病。流行病学调查研究显示,我国幽门螺旋杆菌感染率约为40%~60%,儿童也有相当高的感染率。 相似文献
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目的 了解肺炎链球菌的5种常见毒力基因(psaA、pspA、nanA、ply、lytA)在临床分离株中的分布情况.方法 以2006-2008年从临床分离133株肺炎链球菌为研究对象,采用PCR法对5种常见的毒力基因进行检测.结果 lytA、psaA、nanA、pspA、ply这5种基因在133株菌中的检测阳性率分别为94.7%、85.0%、84.2%、60.2%、82.7%;5种毒力基因在87株常见血清型菌中的阳性率分别为100%、87.4%、89.7%、67.8%、86.2%.结论 5种毒力基因在本地区肺炎链球菌中的阳性检测率均较高,在常见血清型菌株中的阳性检测率较其他血清型高.这5种基因是肺炎链球菌致病的主要毒力基因,可能作为新刑肺炎蛋白疫苗的候选基因. 相似文献
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分子生物学的发展 ,促进了结核病诊断的发展。以往多数方法局限于对可疑结核患者的痰标本进行多聚酶链反应 (PCR)检测。但痰标本的传染性、标本中影响 PCR的因素、采集标本的困难促使人们寻找更可行的有利于诊断结核的标本。经过多年探讨 ,笔者应用 PCR检测患者外周血结核杆菌 DNA(TB- DNA) ,获得较为满意的效果。现将结果报道如下。1 临床资料正常对照组 :共 48例 ,男 2 8例 ,女 2 0例 ,年龄 16~ 6 2岁 ,均为附属医院门诊正常体检者。患者组 :共 6 0例 ,其中肺结核2 6例 ,肾结核 3例 ,结核性胸膜炎 14例 ,结核性腹膜炎 10例 ,结核… 相似文献
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吴利先 《中华国际医学杂志》2003,3(2):169-171
幽门螺杆菌(Hp)作为各种常见胃十二指肠疾患的重要病原菌已得到确认,其确切的致病机制及防治用疫苗是国内外研究的热点。本就近年来这两方面研究的进展情况进行综述。 相似文献
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目的 构建粪肠球菌丝氨酸蛋白酶基因(sprE)突变株,并研究sprE基因的功能。方法 用自杀质粒pTX4577构建粪肠球菌基因重组自杀质粒pCQ001,通过体内同源重组,筛选获得sprE基因的突变株,体外研究不同温度和氧化条件对突变株生长能力的影响,通过小鼠腹膜炎和兔心内膜炎模型来研究突变株的毒力下降情况。结果 经同源重组,利用卡那霉素抗性筛选,PCR、脉冲场电泳和Southern印迹进行鉴定获得sprE基因突变株,命名为*sprE,突变株在40℃的生长能力及在氧化条件下的存活率均明显低于野生株。在小鼠腹膜炎模型中,存活率明显高于野生株,差异有统计学意义(P〈0.01),引起的兔心内膜炎也较野生株轻,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论 sprE基因突变株*sprEgg建成功,sprE基因在粪肠球菌致病中起重要作用,可能是粪肠球菌的毒力因子之一。 相似文献
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目的 构建表达幽门螺杆菌融合蛋白粘附素-细胞空泡毒素A-霍乱毒素B亚单位(HpaA-CtxB-VacA,HCTV)的原核表达载体。并诱导表达,为制备具有治疗与预防作用的多联疫苗奠定基础。方法用PCR技术从pQE-hctB扩增hpaA和ctxB目的基因片段。从pQE30-V质粒扩增出vacA基因,同时插入表达载体pQE-30,构建成pQE-hctv。再将poE-hctv转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导表达。SDS-PAGE分析表达结果。Western blotting鉴定其抗原性。结果融合蛋白的相对分子量约为68000,可溶性表达占全菌的15%以上,经亲和层析后可获得纯度为90%以上的重组蛋白。Western blotting分析其能分别与HpaA抗血清、VacA抗血清和CT抗血清特异性反应。结论重组表达质粒pQE30-hctv表达成功,而且具有各自蛋白的抗原性,为进一步研究融和蛋白的功能和制备集预防和治疗为一体的Hp候选口服疫苗提供基础。 相似文献