注射用法罗培南钠对金葡菌的体内外抗菌活性研究

目的研究注射用法罗培南钠对临床分离的金葡菌的体内外抗菌活性。方法用头孢西丁纸片法在近年来本室保存的临床分离金葡菌中筛选耐甲氧西林的金葡菌（methicillin resistant staphylococcus aureus，MRSA），用琼脂平板稀释法测定法罗培南和万古霉素对甲氧西林敏感的金葡菌（methicillin sensitive staphylococcus aureus，MSSA）和MRSA菌株的最低抑菌浓度（minimal inhibitory concentration．MIC）。根据MIC选择对法罗培南敏感、中度和高度耐药的MRSA菌株及1株MSSA建立小鼠腹膜炎模型，以注射用法罗培南钠及万古霉素通过静脉注射进行感染动物的治疗，评价对感染小鼠的保护作用。结果151株金葡菌中共分离出65株MRSA．阳性率为43％；体外试验法罗培南和万古霉素对86株MSSA均敏感。65株MRSA对法罗培南敏感者10株，其余均耐药；对万古霉素均敏感。注射用法罗培南钠对4株菌的ED50分别为38．3、38．6、71．9和7．07mg／kg；万古霉素则为2．25、10．18、20．85和1．77mg／kg。结论注射用法罗培南钠对MSSA有良好的体内和体外抗菌活性；注射用法罗培南钠对MRSA无效．即使体外敏感。     

AIDS合并非结核分枝杆菌肺病的研究进展

近年来,由非结核分枝杆菌(Non-tuberculosis mycobacteria,NTM)引起的肺部感染在许多国家呈现出上升趋势,NTM肺病常见于有基础疾病或免疫功能缺陷的患者,是AIDS患者常见死亡原因之一。由于AIDS合并NTM肺病与肺结核有着极其相似的临床表现,所以AIDS合并NTM感染面临着耐药和确诊困难的问题,针对这一问题,本文主要介绍了AIDS合并NTM感染在诊断方面的研究进展。     

屎肠球菌Hyl蛋白的免疫保护性研究

目的用基因工程方法获得屎肠球菌类透明质酸酶(Hyalronidase,Hyl)蛋白,经口服免疫小鼠后,探讨机体产生的免疫应答和抗感染保护作用。方法Hyl用Ni2+-NTA柱纯化后,作为抗原给小鼠灌胃进行免疫,ELISA检测小鼠血清IgG、IgA、小肠粘液sIgA和粪便sIgA。并用屎肠球菌TX0016腹腔攻击已免疫的小鼠,观察其免疫保护性。结果重组蛋白经Ni2+-NTA柱纯化后,灌胃免疫小鼠后。ELISA检测结果血清IgA、IgG,粪sIgA,肠粘液sIgA明显高于对照组(P<0.01)。通过细菌攻击后,小鼠的平均存活时间也明显长于对照组。结论重组蛋白Hyl经口服免疫可有效诱导粘膜免疫应答,产生高水平的sIgA,发挥局部粘膜免疫作用和抗菌保护作用。Hyl有望作为预防屎肠球菌口服疫苗的候选抗原。     

屎肠球菌类毒力基因hyl功能的动物实验研究

目的构建屎肠球菌透明质酸酶基因(hyaluronidase,hyl)突变株(*hyl),通过动物实验来研究hyl基因的功能。方法通过小鼠腹膜炎模型和兔心内膜炎模型来评价屎肠球菌hyl基因突变株(*hyl)的毒力下降情况。结果突变株在小鼠腹膜炎模型中的半数致死量(LD50)提高了7倍,存活率也明显高于野生株,引起的兔心内膜炎的病理改变也较野生株轻微。结论hyl基因在屎肠球菌致病中起着重要的作用,可能是屎肠球菌的毒力因子之一。     

紫地榆防龋活性筛选及其防龋机制初步研究

目的:研究紫地榆各提取物防龋活性和活性成分对口腔致龋菌的增殖抑制以及产酸、产多糖功能的影响.方法:以洗必泰和五倍子作为阳性对照,采用试管二倍稀释法研究紫地榆提取物对2种主要致龋菌生长和代谢的影响,先测定紫地榆5种提取物对变形链球菌(S.mutans)、黏性放线菌(A.viscosus)的最低抑菌浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC),从中筛选出防龋活性部位;再测定低于MIC的4个浓度的紫地榆防龋活性部位对2种致龋菌产酸、产多糖的影响.结果:紫地榆正丁醇萃取部位对2种致龋菌抑制效果最好,对细菌产酸、产多糖均有一定的抑制作用,但作用弱于洗必泰和五倍子.结论:紫地榆正丁醇萃取部位可抑制致龋菌生长代谢,可能是一种天然防龋药物.     

结核分枝杆菌重组Mtb8.1蛋白自诱导表达与抗原性分析

目的 通过自诱导表达系统重组表达结核分枝杆菌H37Rv菌株可溶性蛋白抗原Mtb8.1, 并对其抗原性进行分析。方法 应用PCR技术扩增结核分枝杆菌H37Rv 菌株Mtb81蛋白抗原编码序列, 将其插入克隆载体pMD18-T, 酶切后插入表达载体PET28a, 通过优化培养基和发酵工艺, 摸索出一条高效的可溶表达方法, 以间接ELISA法研究其免疫学特性。结果与结论 重组的Mtb81高效可溶性表达, 纯化后纯度达95%以上;用纯化的重组蛋白抗原作为包被抗原建立的间接ELISA法检测200份血清样本, 阳性率达34.0%, 阴性率达91.0%, , 符合率达62.5%。     

淋球菌的耐药性分析及其耐氟喹诺酮的分子机制研究

目的 检测108株临床分离淋球菌(NG)对9种药物的敏感性,并检测喹诺酮类耐药淋球菌对环丙沙星的MIC以及gyrA和parC基因突变情况.方法 用KB法检测淋球菌对9种药物的敏感性,用E-test法检测耐药菌株对环丙沙星的MIC,用PCR和DNA测序及序列比较检测基因突变.结果 淋球菌对大观霉素最敏感,其次为头孢曲松、头孢他啶、阿米卡星、四环素、红霉素和青霉素,对喹诺酮类药物高度耐药.环丙沙星的MIC范围在0.008-32μg/ml之间,10株淋球菌喹诺酮类耐药中有6株存在gyrA的Ser91→Phe突变的同时还存在gyrA的Asp95→Gly和/或parC的Aap86/Asn、Ser87→Arg/Ile,有4株只有gyrA基因Ser91→Phe的突变.结论 在淋球菌治疗中可首选大观霉素,其次为头孢曲松和头孢他啶.gyrA和parC基因突变与淋球菌耐喹诺酮类药物密切相关.     

重症监护病房铜绿假单胞菌的耐药性分析及其耐氟喹诺酮的分子机制研究

目的 了解重症监护病房铜绿假单胞菌的耐药情况以及对氟喹诺酮类耐药的分子机制,为临床合理用药提供依据.方法 用E试验法测定83株铜绿假单胞菌对13种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),从中筛选28株氟喹诺酮类耐药菌,以标准敏感菌株ATCC 27853作为质控菌株,PCR扩增gyrA及parC基因的喹诺酮耐药决定区(QRDR),扩增产物片段进行直接测序分析.结果 83株铜绿假单胞菌在痰标本的阳性率最高71.08%;28株氟喹诺酮耐药菌株的gyrA基因在83位(ACC-ATC)有突变,导致氨基酸Thr-Ile的改变;有11株高耐药菌gyrA基因同时在87位(GAC-GGC)有突变,导致氨基酸Asp-Gly的改变;有14株耐药菌株的parC基因在87位有TCG-TTG突变,导致氨基酸由Ser-Leu的改变,未发现parC突变单独存在.结论 重症监护病房铜绿假单胞菌对美罗培南保持较高的抑菌活性;而亚胺培南和氟喹诺酮类药物的滥用,已造成细菌对其耐药率急剧升高,gyrA和parC基因突变与铜绿假单胞菌耐喹诺酮类药物密切相关.     

粪肠球菌基因hyl1功能的实验研究

目的建立动物感染模型,检测粪肠球菌类透明质酸酶基因hyl1缺失后毒力的变化。方法用粪肠球菌建立小鼠腹膜炎模型和兔心内膜炎模型,然后比较标准株、等位基因缺陷突变株hyl1 mutant和hyl1 mutant回复突变株毒力的变化。结果用粪肠球菌成功建立小鼠腹膜炎模型和兔心内膜炎模型。在小鼠体内实验中,等位基因缺陷突变株hyl1 mutant的毒力比标准株下降了1/4,hyl1 mutant回复突变株的毒力与标准株相似;于感染后12h行外周血白细胞计数和腹腔液细胞因子TNF-α测定,hyl1 mutant组明显低于标准株组,hyl1 mutant回复突变组所测结果与标准株相似。在兔心内膜炎模型中,hyl1 mutant组对心脏的致病性和病理改变也没有标准株组严重。结论粪肠球菌类透明质酸酶基因hyl1可能在粪肠球菌的致病性中起到重要作用,是编码肠球菌毒力因子的基因之一。     

结核病的免疫机制及疫苗研发进展

结核是由结核分枝杆菌引起的严重危害人类健康的重大传染性疾病.卡介苗是目前对结核病唯一有效的疫苗,却不能预防结核病的发生和发展,新型疫苗可特异性诱导机体免疫应答,有助于弥补卡介苗的不足.同时,结核病免疫机制的深入研究为结核治疗药物和新型疫苗的研发提供了依据.本文就结核病的免疫机制及疫苗研发现状作一综述.