梓醇对糖尿病大鼠肾脏保护作用及机制探讨

探讨梓醇对糖尿病大鼠肾脏是否具有保护作用及其可能机制.RT-PCR、免疫组化和Western印迹法检测糖尿病大鼠肾脏组织中胰岛素样生长因子I和蛋白激酶B表达,结果发现两者mRNA及蛋白表达均上调,梓醇可下调其表达并减轻肾脏损伤.     

HPLC法测定大鼠血清中梓醇的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定大鼠血清中梓醇浓度的方法。方法:选用Hypersil-C18反相色谱柱,流动相为水-乙腈(99.5∶0.5,V/V),流速为1.0mL.min-1,检测波长为210nm。结果:梓醇在0.5～40μg.mL-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9995);平均绝对回收率为84.32%～87.52%,平均方法回收率为95.60%～102.63%,日内RSD小于6.14%,日间RSD小于7.01%。结论:本法操作简便,准确度高,适于梓醇血药浓度测定。     

正交试验法优选唇炎颗粒提取工艺

目的：研究唇炎颗粒水煎煮工艺。优选最佳水提工艺条件。方法：采用正交试验法，以干膏率和梓醇含量为检测指标，用正交试验考察3种因素（加水量、煎煮时间、煎煮次数）对其含量的影响。结果：唇炎颗粒的最佳水提工艺条件为：加12倍量水，每次煎煮1h，煎煮3次。结论：该方法为唇炎颗粒制剂的研究奠定了初步基础。     

多指标正交实验优选清热达郁口服液提取工艺

目的优化清热达郁口服液的提取工艺。方法采用正交实验设计,以梓醇、黄芩苷的含量为考察指标,并进行多指标综合评分,优化提取条件。结果清热达郁口服液的最佳提取工艺为:加8倍量水,回流提取3次,2 h/次。结论该提取工艺稳定可行。     

地黄中梓醇积累分布规律的初步研究

目的研究地黄中梓醇的积累分布规律。方法高效液相色谱(HPLC)法,流动相:乙腈-水(0.5∶99.5);检测波长:210 nm。结果标准曲线为:Y=347.93X 10.138(r=0.999 6),梓醇在0.322 4~2.901 6μg时呈良好的线性关系;平均回收率为96.21%,RSD为1.35%(n=5)。结论地黄中不同部位梓醇的积累分布具有一定的规律,值得进一步研究。     

调血祛斑胶囊的质量控制方法研究

目的：建立调血祛斑胶囊的质量标准.方法：采用薄层色谱法对调血祛斑胶囊中当归、川芎、栀子、陈皮及大黄进行定性鉴别;以高效液相色谱法对其君药地黄中的梓醇进行含量测定.结果：调血祛斑胶囊中的当归、川芎、栀子、陈皮及大黄薄层色谱中,在与对照药材或对照品相应的位置上,显相同颜色的斑点;梓醇进样量在0.767～4.603 μg范围内与峰面积积分值线性关系良好（r =1.000 0）,平均加样回收率为102.33％（RSD=2.23％,n=9）.结论：本方法简便、准确、稳定、可靠、重现性好,可用于本品的质量控制.     

高效液相色谱法测定枸芪复肾丸中梓醇的含量

目的建立枸芪复肾丸中梓醇的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定枸芪复肾丸中梓醇的含量。采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-0.1%磷酸=0.8∶99.2,流速:1.0 m L·min-1,柱温:30℃,检测波长:210 nm。结果梓醇在0.36μg~3.6μg进样量与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 8,加样回收率为98.84%,RSD为0.75%。结论该方法结果准确,重复性好,可用于枸芪复肾丸中梓醇的含量。     

基于药物体系的生地黄的质量评价研究

目的：基于药物体系的发现,并运用药物体系质量评价模式全面表征生地黄质量并关联分析,评价生地黄质量。方法：采用HPLC法首次同时测定15批生地黄饮片中梓醇、毛蕊花糖苷2种环烯醚萜苷及酚类的主要有效指标性成分的含量,首次采用香草醛-高氯酸显色法测定生地黄中总环烯醚萜含量,三氯化铁-铁氰化钾显色法测定生地黄中酚类含量,并使用非关联系数、非关联度、关联度等相关概念表征各批号生地黄饮片与基准饮片质量关联性。结果：批号2、8、14、5、4关键有效指标性成分和总环烯醚萜、总酚含量总体高于基准批号13,批号14、5关键有效指标性成分和总环烯醚萜、总酚含量与基准批号13接近。其中批号14、4、15、6、8与基准批号13关联性最高,综合评价得出批号14、5、4、8质量优良度居前,其次为批号2、15、6。结论：基于药物体系质量评价模式,通过将有效指标性成分含量、组成大类总含量与具有确切药效的基准饮片的关联度结合分析,可综合精准评价生地黄饮片质量优次,为生地黄饮片筛选、药物原料质量控制及应用提供了依据,同时为中药质量评价提供了方法学及其应用借鉴。     

Neuroprotective activities of catalpol against CaMKII-dependent apoptosis induced by LPS in PC12 cells

Background and Purpose

Neurodegenerative diseases present progressive neurological disorder induced by cell death or apoptosis. Catalpol, an iridoid glucoside isolated from the root of Rehmannia glutinosa Libosch, is present in a wide range of plant families. Although catalpol is an effective anti-apoptotic agent in LPS-induced neurodegeneration, the underlying mechanism has not been established. Here we have identified some of the mechanisms involved the prevention by catalpol of apoptosis induced by LPS in an experimental model of neurodegeneration in vitro.

Experimental Approach

Apoptosis was induced by adding LPS (80 ng·mL⁻¹) to pheochromocytoma (PC12) cells, pretreated with catalpol for 12 h. We measured intracellular reactive oxygen species (ROS), apoptosis and intracellular calcium concentration ( [Ca²⁺]i) by flow cytometry or laser confocal scanning microscopy. We also analysed the protein expression of Bcl-2, Bax and Ca²⁺-calmodulin-dependent protein kinase II (CaMKII)-dependent apoptosis signal-regulating kinase-1 (ASK-1)/JNK/p38 signalling pathway in PC12 cells by Western blot.

Key Results

Catalpol stimulated expression of Bcl-2 and inhibited the expression of Bax. Catalpol also attenuated the increase in Ca²⁺ concentration induced by LPS in PC12 cells and down-regulated CaMK phosphorylation. The CaMKII-dependent ASK-1/JNK/p38 signalling cascade was blocked by catalpol. All these changes were accompanied by a decrease of apoptosis induced by LPS in PC12 cells.

Conclusions and Implications

The data presented here provide new mechanistic insights into the links between the CaMKII-dependent ASK-1/JNK/p38 signalling pathway and the protective effect of catalpol on apoptosis induced by LPS in PC12 cells.     

高效液相色谱法测定保健食品中的梓醇

[目的]采用HPLC测定保健食品中梓醇的含量。[方法]以Symmetry Shield RPC18柱为固定相,水为流动相,检测波长为210 nm。[结果]梓醇与其它峰均能达到基线分离,其色谱峰形好。梓醇的浓度在0.01-0.80 mg/ml时与峰面积呈良好的线性关系（Y=2 724X-4 508,r=0.999 9）,平均回收率为98.6%,方法精密度RSD为0.55%。[结论]所用方法简便、准确、重复性好,可以作为保健食品中梓醇质量控制的方法。