RP—HPLC法测定传统朝医方两仪煎中梓醇的含量

目的：建立高效液相色谱法测定熟地黄和山茱萸水煎液梓醇含量的方法。方法：色谱条件DiamonsilC18（250mmx4．6mm,5Izm）,流动相为乙腈一水（1：99）,流速1．0ml·min^-1,柱温40°C,检测波长为210nm。结果：梓醇在0．0475～O．3325tzg范围内线性良好（r=0．9995）,平均加样回收率（n=9）100．48％,RSD为1．83％。结论：RP—HPLC法梓醇的含量,方法准确,灵敏,可靠。     

Catalpol prevents the loss of CA1 hippocampal neurons and reduces working errors in gerbils after ischemia-reperfusion injury

Catalpol, an iridoid glycoside, contained richly in the roots of Rehmannia glutinosa, was found for the first time to be of neuroprotection in gerbils subjected to transient global cerebral ischemia. Catalpol (1 mg/kg ip) used immediately after reperfusion and repeatedly at 12, 24, 48 and 72 h significantly rescued neurons in hippocampal CA1 subfield and reduced working errors during behavioral testing. The neuroprotective efficacy of catalpol became more evident when the doses of catalpol were increased to 5 and 10 mg/kg. In addition, it was exciting that the significant neuroprotection by catalpol was also evident when catalpol was applied up to 3 h after ischemia. But the neuroprotective efficacy of catalpol became weak when catalpol was given at 6 h after ischemia. Of great encouragement was the finding that the neuroprotection of catalpol could be seen not only in a short post-ischemic period (12 days) but also in a long period (35 days). All these indicated that catalpol was truly neuroprotective rather than simply delayed the onset of neuronal damage and might be of therapeutic value for the treatment of global cerebral ischemia.     

Efficacy of catalpol as protectant against oxidative stress and mitochondrial dysfunction on rotenone-induced toxicity in mice brain

Rotenone, a specific inhibitor of mitochondrial complex I, reproduces many features of Parkinson's disease. The aim of the study was carried out to investigate how rotenone affected the mitochondrial function and antioxidant/oxidant parameters of mouse striatum, and secondly, to evaluate the ameliorating effects of catalpol against rotenone-induced damage. Our results showed that rotenone induced significant changes in mitochondrial function such as complex I activity and mitochondrial membrane potential decreased, and enhanced antioxidant status as glutathione depletion, enzymatic (glutathione peroxidase and superoxide dismutase) disorders, and increased lipid peroxidation. Catalpol increased complex I, superoxide dismutase and glutathione peroxidase activities, reduced lipid peroxidation and loss of mitochondrial membrane potential in rotenone-treated mice. These in vivo data indicated that catalpol might have protection against deleterious mouse damage caused by rotenone.     

HPLC同时测定左归丸中的5种成分

目的 采用HPLC法同时测定左归丸中尿囊素、薯蓣皂苷元、梓醇、麦角甾苷和吉奥诺苷B1的含量.方法 采用依利特C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2％磷酸溶液,梯度洗脱,流速1.3 mL· min-1,柱温为30℃,检测波长为224(尿囊素)、210(薯蓣皂苷元和梓醇)和330(麦角甾苷和吉奥诺苷B1)nm.结果 尿囊素、薯蓣皂苷元、梓醇、麦角甾苷和吉奥诺苷B1的线性范围分别为7.270～145.4μg·mL-1(r=0.9999)、5.150～103.0 μg·mL-1(r=0.9992)、5.730～114.6 μg·mL-1(r =0.9998)、6.740 ～134.8 μg·mL-1(r =0.9995)和5.100～102.0 μg·mL-1(r =0.9997);其平均加样回收率分别为98.37％、96.92％、99.11％、96.65％、98.31％,RSD分别为0.89％、1.28％、1.10％、0.57％、1.34％(n=6).结论 所用方法简便快捷、回收率好、重复性好,可用于左归丸中尿囊素、薯蓣皂苷元、梓醇、麦角甾苷和吉奥诺苷B1的含量测定.     

地黄的化学成分研究

目的：研究生地黄的化学成分。方法通过柱层析、薄层制备等手段分离得到7个化合物并用多种波谱方法鉴定了结构。结果7个化合物分别是梓醇（Ⅰ）、甘露醇（Ⅱ）、黑曲霉糖（Ⅲ）、蔗糖（Ⅳ）、glutinosalactone A（Ⅴ）、齐墩果酸（Ⅵ）、香草酸（Ⅶ）。结论化合物Ⅵ为首次在地黄块根部位分离得到,化合物Ⅶ为首次在地黄中分离得到,化合物Ⅲ为首次在地黄属植物中分离得到。     

六味地黄丸HPLC指纹图谱建立及主要成分分析

目的:通过高效液相色谱法(HPLC)对20个不同批次同一厂家的六味地黄丸进行指纹图谱的建立,并对其主要成分进行分析。方法:所有20个批次的六味地黄丸均按照统一方法配制供试品溶液。本研究进样体积为2μL;色谱柱C_(18)限定窄径为2.1 mm,短柱限定为100 mm,填料粒径限定为1.7μm,温控箱将色谱柱的温度限定为35℃。流动相A的主要由0.01%磷酸和超纯水混合而成;流动相B的主要由乙腈和超纯水混合而成,研究中所有高效液相色谱均采用梯度洗脱程序。前期对HPLC法进行常规的方法学考察,当所有方法学考察均可靠良好时,再对所有批次六味地黄丸进行指纹图谱的建立,然后做进一步的相似度分析和主要成分分析。结果:1)六味地黄丸中主要成分梓醇、马钱苷、山药素Ⅰ均可见良好的分离度,最重要的是这3中成分之间并不存在任何内源性的干扰物质,显示各个成分的专属性均较好。2)对照品线性回归分析结果显示:梓醇对照品回归方程:Y=4 110X+798.99;马钱苷对照品回归方程:Y=4 201X-6.013 4;山药素Ⅰ回归方程:Y=2 632X+115.38。3)梓醇、马钱苷和山药素Ⅰ精密度试验的RSD值分别为0.32%、0.51%、0.27%;稳定性试验RSD值分别为1.98%、2.13%、1.11%;重复性试验RSD值分别为1.35%、1.16%、1.02%;加样回收试验的RSD值分别为2.37%、1.54%、1.93%,均符合当RSD值3%时,说明采用HPLC这一测定方法是可靠的。4)建立六味地黄丸HPLC指纹图谱后,经过相似度计算,从S1-S20的相似度均大于0.90,说明20个批次的六味地黄丸的样品相似度良好。5)20批不同批次的六味地黄丸中中梓醇、马钱苷和山药素Ⅰ的含量差异无统计学意义,20个不同批次的六味地黄丸中梓醇、马钱苷和山药素Ⅰ的含量的平均值分别为(2.176±0.290)mg/g、(1.875±0.119)mg/g、(1.776±0.095)mg/g。结论:采用HPLC建立六味地黄丸指纹图谱,20个不同批次六味地黄丸经过相似度良好,且各主要成分分析间未见明显差异。     

均匀设计考察壳聚精澄清法精制降糖通脉水提液

目的:利用均匀设计法探讨壳聚糖澄清剂用于精制降糖通脉水提液时对梓醇含量的影响。方法:用高效液相色谱法对壳聚糖澄清法及乙醇醇沉后的药液所含的梓醇含量进行测定。结果:壳聚糖澄清法可较好地保存降糖通脉君药地黄中有效成分梓醇的含量。结论:壳聚糖澄清法可替代醇沉用于精制降糖通脉水提液。     

高效液相色谱法测定六味地黄汤中梓醇含量

目的:利用高效液相色谱法分离、测定六味地黄汤中梓醇,完善质量控制方法。方法:用krom asil ODS-1柱(200 mm×4.6 mm)色谱柱,0.5%的乙腈溶液为流动相,检测波长为210 nm,柱温25℃。结果:梓醇在0.0673~1.346μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率为97.95%,RSD=0.96%(n=5)。结论:该法方便简便、快速,准确可靠。     

增液汤不同配伍对梓醇含量的影响

目的比较增液汤的几种配伍中梓醇含量的差异。方法方法以反向高效液相色谱法(RP-HPLC)测定增液汤不同配伍情况下的各处方中梓醇的含量。结果地黄单味药梓醇煎出量为1.13%,其他配伍煎出量为1.21%~1.51%。结论地黄与其他药味合煎可促进梓醇的煎出,其中与麦冬合煎梓醇的煎出量最高。     

梓醇通过调控miR-200表达抑制卵巢癌细胞的增殖和促进其凋亡

【摘要】 目的 探讨梓醇通过调控miR 200表达抑制卵巢癌细胞增殖和促进其凋亡的行为及其机制。方法 采用定量多聚酶琏反应（qPCR）检测不同浓度的梓醇对卵巢癌细胞的细胞活性影响情况，分析梓醇对卵巢癌细胞增殖行为的影响情况；2,5一二本基四唑溴化物（MTT）实验检测梓醇对卵巢癌细胞增殖能力的影响，qPCR检测梓醇对半胱天蛋白 3表达水平的影响，流式细胞术实验检测梓醇对卵巢癌细胞凋亡行为时间依赖性的的影响；Western blotting实验检测梓醇对卵巢癌细胞中基质金属蛋白酶 2（MMP 2）蛋白表达情况的影响及miR 200对其的逆转作用。结果 100μg/ml的梓醇对卵巢癌细胞的细胞活性的抑制作用最佳；而随着时间的进展，梓醇对卵巢癌细胞的增殖能力的直接抑制作用，可以在一定程度上干扰卵巢癌细胞的生长进程；而合适浓度梓醇对卵巢癌细胞中MMP 2蛋白有直接的抑制作用，转染miR 200 inhibitor后可以在一定程度上逆转梓醇对卵巢癌细胞增殖行为的作用。结论 梓醇可以通过调控miR 200表达抑制卵巢癌细胞的增殖和促进其凋亡行为，可为临床治疗和预后提供参考。