深圳儿童酿脓链球菌分离株多基因序列分型北大核心CSCD

目的探讨酿脓链球菌,即β溶血性A族链球菌(GAS)在深圳的流行病学特征。方法对2016年1月至2018年12月深圳市儿童医院分离的GAS流行克隆群进行多基因序列分型(MLST)回顾性分析。本研究中32株分属于7个不同emm分型的GAS菌株分别来自32例患有脓疱病、蜂窝组织炎、猩红热、脓毒症、肺炎、阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征、支气管炎、过敏性鼻炎、臀部脓肿、过敏性紫癜或咽扁桃体炎的患儿,分离自咽拭子23份,痰液5份,脓液3份和血液1份。应用聚合酶链反应技术对32株GAS菌株的7对等位看家基因(gki、gtr、murI、mutS、recP、xpt和yqiL)进行扩增,对目标基因产物进行测序。然后将获得的每个等位基因的基因序列提交至MLST网站,以获得相应的等位基因谱。最后将等位基因谱再次提交至MLST网站,以确认序列分型(ST)。结果emm 1.00及其亚型、emm 4.00、emm 12.00及其亚型、emm 22.00、emm 28.00、emm 75.00和emm 89.00的GAS克隆群分别属于MLST分型中的ST28、ST39、ST36、ST46、ST52、ST49和ST921。结论2016年至2018年导致深圳地区儿童感染的GAS分离株的MLST流行克隆群分别为ST28、ST39、ST36、ST46、ST52、ST49和ST921。     

以深圳市龙华新区社区为例分析中医药服务现状

从供需双方的角度探讨社区中医药服务现状,以及促进中医药社区卫生服务健康的发展策略。对龙华新区14个社区卫生服务中心的从业人员（80人）和服务对象（800人）进行问卷调查,运用比率、SWOT法进行分析,在回收从业人员合格问卷75份、服务对象合格问卷736份中,双方在中医药服务供需对比、治疗方法倾向和对中医药疗法的看法上存在不同程度的差异,社区中医药服务存在从业人员不足和/或服务对象需求不足,建议各社区卫生服务中心根据供需情况因时、因地、因人提供不同类别、不同层次的中医药服务。     

双酚A和邻苯二甲酸二丁酯暴露对雌性幼鼠青春期发育的影响

目的 研究双酚A(BPA)和邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对雌性幼鼠青春期发育的影响.方法 将64只21日龄SD雌性幼鼠用随机数字表法分为BPA干预组(BPA 0.25 mg/kg灌胃10 d)、DBP干预组(DBP 50 mg/kg灌胃10 d)、BPA+DBP干预组(BPA 0.20 mg/kg+DBP 40 mg/kg灌胃10 d)、雌二醇(E2)组(E20.1 mg/kg灌胃10 d)、BPA空白对照组(10 mL/kg不含BPA的玉米油溶液灌胃10 d)、DBP空白对照组(10 mL/kg不含DBP的玉米油溶液灌胃10 d)、正常对照组(不做任何处理)和溶剂组(10 mL/kg玉米油溶液灌胃10 d),每组8只.观察幼鼠阴道开口时间(VOD),收集子宫、卵巢进行病理学检查,采用酶联免疫吸附试验检测血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和Kisspeptin水平,采用实时荧光定量PCR检测下丘脑KISS-1、G蛋白偶联受体54(GPR54)和卵巢雌激素受体(ER)α、ERβmRNA表达水平.结果 与正常对照组和溶剂组相比,BPA干预组和E2组VOD提前,差异有统计学意义(P<0.05).BPA干预组血清LH、FSH、LH/FSH、E2、Kisspeptin水平明显高于BPA空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05).E2组血清LH、FSH和Kisspeptin水平明显低于正常对照组和溶剂组,差异有统计学意义(P<0.05).BPA干预组下丘脑KISS-1、GPR54 mRNA表达水平明显高于BPA空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05).E2组下丘脑KISS-1和卵巢ERβmRNA表达水平明显低于正常对照组和溶剂组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 BPA暴露可致雌性幼鼠性早熟,其致病机制可能与下丘脑Kisspeptin-KISS-1/GPR54-促性腺激素释放激素信号传导和下丘脑-垂体-性腺轴提前激活有关.     

双缩脲法评价医疗器械清洗质量的研究

目的采用双缩脲法检测清洗后医疗器械残留蛋白,探讨有效的评价器械清洗效果的检测方法。方法收集820件术后器械随机分为常规清洗组和多酶浸泡组;分别采用目测、放大镜检测、杰力试纸测试残留血和双缩脲法进行器械清洗后清洁度检测,评价污染器械的清洗效果。结果 410件常规清洗组直接目测、放大镜下、杰力试纸检测、双缩脲法检测阳性率分别为28.0%、29.0%、31.0%、34.5%,多酶浸泡组直接目测、放大镜下、杰力试纸检测、双缩脲法检测阳性率分别为6.0%、7.0%、9.0%、12.7%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论目测、放大镜检测、残留血测试在器械清洗效果的评价中均有一定的临床价值,而双缩脲残留蛋白测试法检测敏感性高、临床指导意义尤为明显。     

Sysmex XN-3000血液分析仪WDF和WPC通道报警阈值的验证及调整策略

目的评价Sysmex XN-3000血液分析仪白细胞分类(WDF)通道和白细胞前体细胞(WPC)通道报警信息的可信性,验证并调整其报警阈值。方法用WDF和WPC通道同时检测61例无异常报警及521例有异常报警的EDTA-K2抗凝血液标本,仪器自动制作血涂片标本后人工镜检。以显微镜镜检结果为金标准,判断仪器报警信息的可靠性,验证厂商提供的初始报警阈值是否合理,结合实际工作要求,调整其阈值。结果 WDF通道异型淋巴细胞(atypical lymph)、原始细胞/异常淋巴细胞(blasts/abn lymph)报警信息的敏感性较高(分别为95.8%、100%),特异性较低(分别为34.7%、23.5%),WPC通道的atypical lymph、blasts、abn lymph报警信息的敏感性较低(分别为81.3%、66.7%、76.5%),特异性较高(分别为61.9%、55.5%、88.3%)。经ROC曲线分析,除WPC通道的abn lymph报警信息镜检判断价值较差外,其他报警信息镜检判断价值均为中等。结合实际复检规则要求,WDF通道atypical lymph、blasts/abn lymph,WPC通道atypical lymph最佳临界阈值调整为120,WPC通道的blasts、abn lymph最佳临界阈值调整为140。结论采用敏感性较高的WDF通道筛查时出现报警信息后再用特异性较高的WPC通道复检可缩短检验结果回报时间,提高工作效率。厂商提供的初始报警阈值需验证并调整为最佳临界阈值以保证检测结果的准确性。     

小儿αβ复合型地中海贫血基因型和表型分析

目的:分析深圳地区小儿αβ复合型地中海贫血的基因型以及血液学特征。方法:采用血常规和毛细管电泳对患儿红细胞参数和血红蛋白组分进行分析,采用反向点杂交(RDB)技术检测α和β地中海贫血基因点突变,应用跨越断裂点PCR(Gap-PCR)法检测α缺失型地中海贫血和α三联体,巢式PCR检测疑似HKαα地中海贫血的样本。结果:在74例αβ复合型地中海贫血中共计检出29种复合基因类型,其中1例β地中海贫血合并ααα~(anti4.2)/αα和5例双重杂合β地中海贫血复合α地中海贫血有中间型地中海贫血的表型,1例β~(-28)/β~(cap+40-43)双重杂合合并--~(SEA)/αα和其余的62例均表现为轻型β地中海贫血特征,2例β~(CAP+40-43)/β~N合并--~(SEA)/αα表现为轻型α地中海贫血特征。结论:深圳地区αβ复合型地中海贫血的基因类型复杂多样,常见的复合类型血液学指标同单纯性β地中海贫血相似,如果出现不相符的情况,要考虑稀有地中海贫血的存在。     

乙型肝炎病人污染器械清洗方法及其清洗效果

目的研究多酶洗液对乙型肝炎病毒污染器械的清洗消毒效果。方法采用杰力试纸测试方法和单克隆抗-HBs包被反应板方法 ,对清洗后器械清洗质量进行了检测。结果实验组器械经清洗消毒后残留血迹检测阳性1件,阳性率1.0%;对照组中阳性21件,阳性率21.0%。实验组器械清洗消毒后乙型肝炎病毒残留检测6件阳性,阳性率6.0%,而对照组阳性26件,阳性率为26.0%。2组器械清洗消毒后残留血迹检测和乙型肝炎病毒残留检测的差异均有统计学意义。结论采用多酶浸泡清洗对HBsAg阳性患者使用后的器械可以明显提高清洗质量和消毒效果。     

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症基因启动子甲基化研究

目的 了解葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因启动子区甲基化改变特点,探讨甲基化改变与G6PD缺乏症的关系。方法 将2013年8月至2014年7月期间195例贫血查因或体检儿童分为G6PD缺乏组(130例)和对照组(65例)。荧光定量PCR检测G6PDmRNA表达情况。甲基化敏感性高分辨率熔解曲线分析(MS-HRM)结合重亚硫酸盐PCR测序法(BSP)等方法分析G6PDmRNA表达偏低的G6PD缺乏症患者的基因启动子甲基化改变情况,另对G6PDmRNA表达正常的44例女性标本(G6PD缺乏组7例和正常对照组37例)的G6PD基因启动子甲基化情况进行分析。结果 22例(16.9%,22/130)G6PD缺乏症患者的G6PDmRNA表达偏低,其中的16例男性均无甲基化、6例女性均存在部分甲基化。44例G6PDmRNA表达正常的G6PD缺乏组及对照组女性中,40例检测到部分甲基化,4例无甲基化(G6PD缺乏组1例,对照组3例)。结论 基因启动子区甲基化与男性G6PD缺乏症没有关联。女性人群G6PD基因存在部分甲基化与无甲基化,提示甲基化改变对女性G6PD缺乏症可能有一定影响。     

运用PCR-DGGE技术检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏的初步研究

目的：运用多聚酶链反应-变性梯度凝胶电泳（PCR-DGGE）技术检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD）缺乏患者及基因携带者基因变异,探讨其对该病的诊断和研究价值。方法：提取G-6-PD缺乏症患者及其家系（患者父亲和/或母亲等）的外周血RNA,逆转录合成cDNA后,选取第11至12外显子部分cDNA片段进行PCR-DGGE,观察其电泳行为,将电泳行为异常的标本进行基因测序,最后做出基因诊断。结果:：36个家系中33个家系发现G-6-PD基因在1304至1520片段出现PCR-DGGE多种异常电泳区带。9例母亲G-6-PD/6-PGD比值低于1.00,其中3例比值低于0.50,而且PCR-DGGE电泳行为一致,基因测序发现为双重杂合子;比值正常的G-6-PD缺乏基因携带者母亲均为单杂合子。该片段基因测序发现3个突变位点分别为：C1311T,G1376T,G1388A。各基因突变的位点有其特殊的电泳行为。结论：PCR-DGGE技术是一种敏感性高、可靠性强的筛查基因突变的方法。在临床研究G-6-PD缺乏,特别是常规诊断技术不能发现的女性G-6-PD缺乏基因携带者的检测中具有很强的应用价值。［中国当代儿科杂志,2007,9（6）：529-532］