靶向大鼠AT1-R基因的短发夹RNA重组腺病毒载体的构建及鉴定

目的利用AdMax腺病毒载体系统构建大鼠AT1-shRNA腺病毒载体并在293细胞中扩增制备重组病毒。方法自先期构建的pGenesil-1-AT1-shRNA真核表达载体中用RT-PCR法扩增出AT1-shRNA片段，将其克隆人PUC18质粒中。酶切构建好的pUC18-AT1-shRNA载体并克隆进入穿梭质粒pDC316中，将构建好的穿梭质粒pDC316AT1-shRNA载体和骨架病毒pBHGlox△1，3Cre共转染293细胞，包装成重组的病毒颗粒，荧光显微镜观察绿色荧光表达。结果经限制性内切酶、PCR检测和GFP表达证实成功地构建了携带AT1-shRNA的重组腺病毒载体并制备出高滴度重组病毒。结论成功地构建了携带AT1-shRNA片段的重组腺病毒载体，为进一步抗血压研究奠定了基础。     

抗癌药物对肿瘤科护士外周血粒细胞、单核细胞凋亡的影响及防护

随着癌症患病率的升高及抗癌药物的不断开发，越来越 多的抗癌药物应用于临床，职业接触抗癌药物的医护人员大 量增加。不少研究报道【’·2]，职业接触抗癌药物可能引起护 士乳腺癌和各种白血病。彭金莲等[31研究发现，职业接触抗 癌药物后护士可出现头晕、乏力、脱发、月经异     

血管紧张素－（1—7）对血管紧张素Ⅱ诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

目的 观察血管紧张素（1-7）[Ang-（1-7）]对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）凋亡的影响.方法 采用胰蛋白酶消化法原代培养HUVECs,取2～5代用于实验,培养的HUVECs随机分为：对照组、AngⅡ组、Ang-（1-7）组、AngⅡ＋Ang-（1-7）组、AngⅡ＋Ang-（1-7）＋A-779组,用吖啶橙（AO）/溴乙锭（BE）法观察细胞凋亡的形态学变化,用流式细胞术检测内皮细胞的凋亡率.结果 （1）AngⅡ（10-6 mol/L）可以诱导HUVECs凋亡率明显增加,与对照组相比差异有统计学意义（25.60%±3.17% vs 2.32%±0.24%,P＜0.005）;不同浓度的Ang-（1-7）（10-9～10-6 mol/L）呈剂量依赖性抑制AngⅡ所诱导的内皮细胞的凋亡,与AngⅡ组相比差异有统计学意义（20.04%±2.21%,16.04%±1.32%,10.04%±2.05%,7.79%±1.50%,P＜0.05）;力Ⅱ用Ang-（1-7）特异性受体拮抗剂A-779可阻断Ang-（1-7）的上述效应,与AngⅡ＋Ang-（1-7）组比较差异有统计学意义（23.37%±0.75%vs 20.04%±2.21%,16.04%±1.32%,10.04%±2.05%,7.79%±1.50%,P＜0.05）.结论 AngⅡ可诱导内皮细胞凋亡增加,Ang-（1-7）呈浓度依赖性抑制AngⅡ的上述效应,并且是通过其特异性受体Mas发挥作用.     

OX40配体蛋白基因多态性与高血压的相关性研究

目的研究中国人群OX40配体蛋白基因（TNFSF4）单核苷酸多态性与高血压及其并发症的相关性。方法从北京同仁医院和北京朝阳医院选取高血压病患者296例和匹配的对照组311例。记录所有研究对象的病史、体格检查等临床资料及其他流行病学资料,采取聚合酶链式反应和限制性酶切片断长度多态性分析方法（PCR-RFLP）检测各组TNFSF4基因rs3850641位点A/G的基因型并统计各组的基因型频率。结果高血压病组rs3850641G等位基因型频率与对照组相比无统计学意义（P〉0.05）。并在校正了年龄、性别、冠心病史、糖尿病史、三酰甘油和胆固醇等传统危险因素的影响后,二者依然不存在相关性（P〉0.05）。结论TNFSF4基因rs3850641位点A/G多态性中G等位基因可能与中国人高血压的发病不相关。     

靶向大鼠血管紧张素转换酶基因的短发夹RNA重组腺病毒载体的构建及鉴定

目的利用AdMax腺病毒载体系统构建大鼠血管紧张素转换酶-短发夹RNA(ACE-shRNA)腺病毒载体并在人胚胎肾-293细胞中扩增制备重组病毒。方法自先期构建的pGenesil-1-ACE-shRNA真核表达载体中用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法扩增出ACE-shRNA片段,并克隆进入穿梭质粒pDC316中,将构建好的穿梭质粒pDC316-ACE-shRNA载体和骨架病毒pBHGlox-E1,3Cre共转染293细胞,包装成重组的病毒颗粒,荧光显微镜观察绿色荧光表达。结果经限制性内切酶,聚合酶链反应(PCR)检测和绿色荧光蛋白(FGFP)表达证实成功地构建了携带ACE-shRNA的重组腺病毒载体并制备出高滴度重组病毒。结论成功地构建了携带ACE-shRNA片段的重组腺病毒载体,为进一步利用基因沉默技术抗高血压的研究奠定了基础。     

责任小组包干制排班模式护理工作满意度调查

目的探讨在优质护理服务示范工程活动中,采用责任小组包干制排班模式后护理工作满意度及相关分析。方法对病区护理人员、患者、医生各发放满意度调查问卷,进行结果统计。结果患者对护理工作的满意度、护理人员对工作的满意度、医生对护理工作的满意度分别为53.3%、98.89%、98.7%。结论责任小组包干制排班模式下护理人员对工作的满意度较医生和患者显著偏低;行护理工作满意度调查,能真实反映护理服务中存在的问题,对有针对性地改进护理工作、有效地促进优质护理工作的开展有实际意义     

应用siRNA抑制神经胶质瘤C6细胞受体表达的探讨

目的构建编码大鼠血管紧张素Ⅱ受体基因mRNA的短发夹RNA真核表达载体质粒,研究体外培养的哺乳细胞中siRNA抑制靶基因表达的有效性,为利用基因沉默技术从转录后水平进行高血压治疗的研究做准备.方法根据大鼠AT1受体mRNA序列设计并合成siRNA寡核苷酸片段,退火形成双链并克隆进入载体pGenesil-1.用构建完成的pGenesil-1-siRNA质粒和重新洗牌的对照质粒转染大鼠胶质瘤细胞,并在不同时相收集转染的细胞,进行RT-PCR和Western blot检测.结果 AT1R基因短发夹RNA抑制大鼠血管紧张素Ⅱ受体mRNA基因及其蛋白的结果类似.与对照组比较(100%),在转染后48 h血管紧张素Ⅱ受体mRNA基因水平下降到35.5%±3.0%,72 h后达到最低点(20.7%±4.0%).而与对照组相比,血管紧张素Ⅱ受体蛋白在24 h和48 h分别减少至46.9%±4.2% 和37.0%±3.7%,最大减少在转染后72 h(28.1%±4.0%).结论成功地构建了编码大鼠血管紧张素Ⅱ受体mRNA的短发夹RNA真核表达载体后,在体外转染哺乳细胞中表达siRNA可有效地抑制靶基因的表达,并导致其蛋白的翻译受到抑制,达到基因干扰的目的.为利用RNAi从转录后水平对心血管疾病进行治疗做有益的探索,为进一步研究基因沉默在自发性高血压大鼠的降压治疗研究奠定了基础.     

冠状动脉支架术对生活质量的影响

目的：应用普适性量表—医学结局研究简短量表（SF-36）对冠心病患者经皮冠状动脉支架术前、6个月后的生活质量进行评价,证明经皮冠状动脉支架术能显著提高冠心病患者的生活质量。方法：选取50例冠心病患者采用问卷调查方式,选用国际上通用的SF-36和自行设计的一般资料调查表。术前资料于手术前1 d采集,术后6个月以通知门诊复查、社区服务、电话随访的方式调查。结果：术后6个月SF-36中各纬度得分均比术前提高,差异有显著性（P〈0.01）。结论：经皮冠状动脉支架术能显著提高冠心病患者的生活质量,成功的支架术可迅速缓解心绞痛症状,是支架术提高患者生活质量的主要原因。     

抗癌药物对肿瘤科护士外周血粒细胞、单核细胞凋亡的影响及防护

随着癌症患病率的升高及抗癌药物的不断开发，越来越多的抗癌药物应用于临床，职业接触抗癌药物的医护人员大量增加。不少研究报道，职业接触抗癌药物可能引起护士乳腺癌和各种白血病。彭金莲等研究发现，职业接触抗癌药物后护士可出现头晕、乏力、脱发、月经异常、皮疹等非特异性临床表现，为进一步探讨抗癌药物对肿瘤科护士的危害，2004年3月-2005年3月，本研究对30例在肿瘤科工作连续5a以上，每天从事抗癌药物操作的护士外周血粒、单核细胞的凋亡进行研究，现报道如下。     

加强病房护理管理实效性的思考

随着医学科学技术及护理学科的发展 ,护理队伍不断壮大 ,完善的护理管理体系 ,对确保医院医疗护理质量 ,树立医院良好形象 ,促进医院建设和发展会起到积极的作用。护理作为一个与社会广泛接触 ,与人类健康息息相关的专业 ,需要认识到自身的不足 ,更需要与社会及相关学科协调发展。因此 ,对于以病房服务为主体的医院来说 ,如何对病房护理工作进行实效性管理 ,是值得每一个护理工作者尤其是护理管理者深思的问题。1　目前病房护理工作情况1.1　临床护理记录　目前 ,临床护理记录主要是护理交班报告、特护记录和护理病历。护理交班报告只记录一…