2009、2012版国家基本药物目录与云南省“新农合”药物目录的比较研究

目的  通过比较两版基药目录与“新农合”目录的变化，分析两类目录的联系和差异，为促进云南省“新农合”药物目录的完善及与基药目录的对接提供参考。方法  对两类目录中化学药品和生物制品中的药物分类、数量及重合率进行比较。结果  两类目录存在归类不同、细分类别不同和品种增减变化等差异。结论  12版基药目录在分类依据、收载药品及疾病覆盖等方面更为科学化，但两类目录重合率偏低，不利于医保政策的衔接。

     

RNA干扰联合基因沉默ACE和AT1R对自发性高血压大鼠血压及心肌重构的影响

目的 用RNA干扰技术下调血管紧张素转换酶(ACE)和血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)表达,观察其对自发性高血压大鼠(SHR)血压及心肌重构的影响.方法 SHR随机分为5组:即空白对照组(注射生理盐水);病毒对照组(注射对照腺病毒);Ad5-ACE-shRNA治疗组;Ad5-AT1R-shRNA治疗组;Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组[分别注射表达ACE基因,AT1R基因,ACE和AT1R基因特异短发夹RNA(shRNA)的重组腺病毒载体];同时设WKY正常血压对照组(注射生理盐水).以上各组大鼠均于实验的第1,17天各注射1次,干预前后检测血压、心率的变化.于首次注射后第3天,用实时荧光定量PCR检测心肌、主动脉组织ACE,AT1R mRNA的表达.实验结束时,检测左心重/体重及心肌胶原蛋白的含量,并做电镜切片观察心肌超微结构的变化.结果 Ad5-ACE-shRNA治疗组,Ad5-AT1R-shRNA治疗组,Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组于每次注射后,尾动脉压分别下降24 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)、22 mm Hg、26 mm Hg左右,单次注射后降压作用至少可持续15 d,累计降压幅度分别达39 mm Hg、37 mm Hg、43 mm Hg;而SHR空白对照和病毒对照组血压则持续升高约26 mm Hg,且两组比较差异无统计学意义;WKY组尾动脉压无明显变化,治疗组(Ad5-ACE-shRNA,Ad5-ACE-AT1R-shRNA)心肌、主动脉组织中ACEmRNA和治疗组(Ad5-AT1R-shRNA,Ad5-ACE-AT1R-shRNA组)心肌、主动脉组织中AT1RmRNA表达明显低于空白对照和病毒对照组(P<0.05),而与WKY组比较差异无统计学意义.Ad5-ACE-shRNA治疗组,Ad5-T1R-shRNA治疗组,Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组左心重/体重与心肌胶原蛋白含量[(2.22±0.18)μg/mg、(2.23±0.19)μg/mg、(2.17±0.16)μg/mg与(1.291±0.019)μg/mg、(1.298±0.019)μg/mg、(1.276±0.019)μg/mg]明显低于空白对照组[(3.23±0.13)μg/mg与(1.683±0.013)μg/mg]和病毒对照组[(3.25±0.12)μg/mg与(1.693±0.013)μg/mg],P均<0.05,但还未降到WKY组水平[(2.06±0.12)μg/mg与(1.258±0.019)μg/mg].电镜观察显示治疗组心肌细胞超微结构明显改善,尤以Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组改善明显.结论 RNA干扰可有效下调ACE和AT1R表达,降低自发性高血压大鼠血压并改善心肌重构,尤以Ad5-ACE-AT1R-shRNA治疗组效果明显且副作用小.RNA干扰有望成为高血压病基因治疗的新方法.     

大学生运动损伤的原因及预防

体育运动不仅可以调节大学生的学习生活而且也增强大学生的身体素质。但是不合理的体育锻炼不但不能促进大学生的身体素质的提高，而且可以损伤大学生的身体健康，更能影响大学生的心理健康。所以，让大学生了解一些运动损伤的预防知识，对其合理地从事体育锻炼，促进其身体健康都将起到积极的作用。     

重组人HIF-1α真核表达载体质粒的构建和鉴定

目的构建重组人HIF-1α真核表达载体质粒,为进行治疗性血管再生研究做准备。方法从Hela细胞中提取总RNA,RT-PCR法反转录合成cDNA。设计两对引物分别调取目的基因片段A和B,与T载体连接后转化大肠杆菌JM109,LB平板培养基筛选菌落,抽提质粒。测序正确后双酶切先后克隆进入pcDNA4/HisMaxA载体。结果获得重组的人HIF-1α真核表达载体质粒,经PCR扩增获得的目的基因分子量与预计的相同,插入pcDNA4/HisMaxA载体部位正确。结论重组的人HIF-1α,所选用的pcDNA4/HisMax可高表达目的基因,为利用其进行治疗性血管再生研究奠定了基础。     

职业接触抗肿瘤药物对护士外周血淋巴细胞凋亡及Fas bcl-2基因表达的影响

目的探讨职业接触抗肿瘤药物对护士外周血淋巴细胞凋亡及Fas、bcl-2基因表达的影响。方法选择接触抗肿瘤药物5年以上,每日接触5人次以上的护士为接触组;无抗肿瘤药物接触史的健康志愿者为对照组。抽取接触组及正常对照组外周静脉血各2ml,乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝,利用流式细胞仪技术观察外周血淋巴细胞凋亡率及Fas、bcl-2基因的表达。结果接触组外周血淋巴细胞凋亡率明显增高(P<0.05);接触组Fas基因的表达明显增高(P<0.01);而bcl-2基因表达差异无统计学意义。结论抗肿瘤药物能促进职业接触护士外周血淋巴细胞的凋亡和Fas基因的表达。     

抗肿瘤药物对职业接触护士健康影响的研究及防护对策

随着抗肿瘤药物在临床上的不断应用，肿瘤科护士的职业健康和防护问题越来越受到国内外同行的关注。Angela等报道职业接触抗肿瘤药物使护士的淋巴细胞染色体突变，姊妹染色体交换频率增大，DNA断裂增多。为进一步探讨抗肿瘤药物对肿瘤科护士健康的影响，对在肿瘤科工作连续5a以上，每天从事抗肿瘤药物治疗操作的护士外周血粒细胞、单核细胞的凋亡进行了研究，以进一步揭示抗肿瘤药物的职业危害，加强防护措施。     

靶向血管紧张素Ⅱ受体基因干扰及有效shRNA的筛选(英文)

目的RNA干扰是基因技术的重要进展,人们可以在转录后水平减少基因的表达。对siRNA是否有效而言,基因靶序列的选择是至关重要的因素。我们研究了哺乳细胞中shRNA调节大鼠血管紧张素Ⅱ1型受体基因表达的有效性并探索有效shRNA的特征与shRNA功能性之间的关系。方法设计并构建四个靶向大鼠AT1受体基因的shRNA表达载体。4个shRNA靶向同一基因的不同区域。合成shRNA寡核苷酸片段的正义链和反义链,退火形成双链并克隆进入载体pGenesil-1。用构建完成的pGenesil-1-shRNA质粒和重新洗牌的对照质粒转染大鼠胶质瘤细胞,并在不同时相收集转染的细胞,进行RT-PCR和Western blot检测。结果转染24小时之后,各处理组均未见AT1mRNA水平有明显减少。与对照组相比,Pb组在转染后48小时血管紧张素Ⅱ受体mRNA基因水平下降到55.7±7.6%,72小时后达到最低点(43.7±8.2%)。其它组AT1受体mRNA表达无明显抑制(P>0.05)。抑制大鼠血管紧张素Ⅱ受体mRNA基因及其蛋白的结果类似。与对照组相比,Pb组血管紧张素Ⅱ受体蛋白在24小时和48小时分别减少至46.9±4.2%和36.98±3.7%,最大减少在转染后72小时(28.1±4%)。结论成功地构建了编码大鼠血管紧张素Ⅱ受体mRNA的短发夹RNA真核表达载体后,在体外转染哺乳细胞中表达shRNA可有效地抑制靶基因的表达,并导致其蛋白的翻译受到抑制,达到基因干扰的目的。在选择有效的shRNA序列时,除了一般的原则之外,我们认为靶位mRNA的环状结构以及siRNA是否能到达靶位对基因干扰实验能否成功具有重要作用。     

胆道蛔虫病的内镜诊断和治疗体会

目的探讨采用内镜诊断胆道蛔虫病的价值。方法采用纤维(电子)胃十二指肠镜、纤维胆道镜直视下诊断与治疗胆道蛔虫病32例。结果32例患者均经内镜直视下或胆管直接造影明确诊断,32条胆道蛔虫被全部取出,无1例并发症。结论内镜下对胆道蛔虫病的诊断与治疗具有准确率高、治疗效果确实可靠\能迅速消除患者痛苦等优点。     

太原市社区人群糖代谢异常患病率及危险因素调查研究

[目的]了解山西省太原市居民糖代谢异常患病率及相关危险因素.[方法]采用随机抽样、整群抽样的方法,对太原市迎泽区常住居民4 105人进行糖调节异常患病率及相关危险因素的调查.[结果]①糖尿病患病率16.88%,其中男6.11%,女10.77%;糖调节受损患病率7.28%,其中男2.34%,女4.94%;②新诊断的糖尿病167例,其中男63例,女104例,占患病总人数的24.10%.③女性45岁以后糖尿病、糖调节受损患病率随年龄增长而明显增加,男性45岁以后糖尿病患病率随年龄增长而明显增加.④从正常糖耐量、糖调节受损到糖尿病,年龄、三酰甘油、总胆固醇、空腹血糖逐渐升高,高密度脂蛋白逐渐降低,而体重指数、收缩压、舒张压、尿酸则在糖调节受损组最高.[结论]太原市糖代谢异常患病率高,45岁以上发病率显著增高,女性患病率高于男性.高血压、脂代谢紊乱、肥胖和增龄为糖代谢紊乱的危险因素.     

RNA干扰对大鼠血管内皮细胞血管紧张素转换酶表达的抑制作用

目的用RNA干扰技术选择性下调大鼠血管内皮细胞(ECs)上血管紧张素转换酶(ACE)的表达。方法构建携带ACE基因特异短发夹RNA(shRNA)编码序列的质粒载体pACE-shRNA,与脂质体转染剂制备成不同比例的复合物,转染原代培养的大鼠主动脉ECs,在荧光显微镜下检测转染效率,用四甲基氮唑盐比色法检测细胞存活率,选择出质粒与转染剂的最佳配比。然后以最佳配比复合物转染ECs,分别于转染前及转染后24、48、72h通过半定量RT-PCR和Western blot法检测ACE的表达。结果质粒与转染剂的最佳配比为质粒1.0μg、转染剂4μl,此时转染效率为(81.2±6.2)%,细胞生存率为(90.2±4.1)%。以最佳配比复合物转染ECs后24h,ACE的mRNA和蛋白质表达无明显变化;转染后48h,表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);72h时表达更低,只有微弱的条带显示。结论RNA干扰能选择性下调原代培养的大鼠血管ECs上ACE的表达,这可能为心血管疾病基因治疗的研究和应用提供新方法。