中性粒细胞/淋巴细胞比值、胆红素与冠状动脉粥样硬化性心脏病的相关性分析

目的 分析淋巴细胞/中性粒细胞及胆红素与冠状动脉粥样硬化性心脏病（以下简称冠心病）的相关性。方法 选取2019年4月—2019年10月山西医科大学第二医院收治的经冠状动脉造影确诊的冠心病患者180例作为观察组,根据Gensini积分对观察组冠状动脉情况进行评分。另选取同期该院收治的冠状动脉造影未见明显异常的92例患者作为对照组。根据Gensini积分将观察组划分为不同的亚组,低危组（Gensini积分≤ 21）,中危组（21<Gensini积分≤ 51）,高危组（Gensini积分> 51）,每组60例。比较各组患者外周血淋巴细胞（Lym）、中性粒细胞（NEU）、中性粒细胞/淋巴细胞（NLR）、单核细胞（MONO）、平均血小板体积（MPV）、血小板分布宽度（PDW）、血清胆红素水平。结果 观察组NEU、NLR、PDW高于对照组（P <0.05）,Lym、TB、DB、IB低于对照组（P <0.05）。两组患者MONO、MPV比较,差异无统计学意义（P >0.05）。Lym与冠状动脉狭窄Gensini积分呈负相关（r =-0.249,P <0.05）,NEU、NLR和PDW与冠状动脉狭窄Gensini积分呈正相关（r =0.416、0.342和0.292,均P <0.05）,TB、DB、IB与冠状动脉狭窄Gensini积分无相关性（r =-0.082、-0.097和-0.084,P >0.05）。低危组、中危组及高危组Lym、NEU、NLR、PDW水平比较,差异有统计学意义（P <0.05）。低危组、中危组及高危组MONO、MPV、TB、DB及IB比较,差异无统计学意义（P >0.05）。NLR预测冠心病的特异性为87.0%（95% CI：0.779,0.928）,敏感性为53.9%（95% CI：0.463,0.613）,ROC曲线下面积为0.719（95% CI：0.660,0.778）。PDW预测冠心病的特异性为69.6%（95% CI：0.590,0.785）,敏感性为50.6%（95% CI：0.430,0.580）,ROC曲线下面积为0.607（95% CI：0.535,0.679）。TB预测冠心病的特异性为77.2%（95% CI：0.703,0.830）,敏感性为43.9%（95% CI：0.337,0.546）,ROC曲线下面积为0.611（95% CI：0.543,0.678）。结论 NLR、PDW和血清胆红素水平对冠心病有诊断价值,NLR和PDW对冠心病冠状动脉病变有一定的预测作用,且独立于传统的冠心病危险因素。     

编码大鼠血管紧张素转换酶短发夹环RNA质粒的构建与鉴定

目的构建编码大鼠ACE mRNA的shRNA真核表达载体质粒,为利用基因沉默技术从转录后水平进行高血压治疗的研究做准备。方法根据大鼠ACE mRNA序列设计并合成shRNA寡核苷酸片段,退火形成双链并克隆进入载体pGenesil-1,并进行酶切鉴定和测序。结果酶切证明构建的shRNA已插入载体,经测序证明与设计的相同,获得大鼠ACE的shRNA表达载体质粒。结论构建的编码大鼠ACE mRNA的shRNA真核表达载体可进入哺乳动物细胞内表达短发夹RNA,经Dicer酶裂解成si R-NA并降解靶基因mRNA,而达到基因干扰的作用。为利用其进行自发性高血压大鼠的降压治疗研究奠定了基础。     

OX40配体蛋白基因多态性与冠心病的相关性研究

目的研究中国人群OX40配体蛋白基因（TNFSF4）单核苷酸多态性与冠心病的关系。方法从北京同仁医院和北京朝阳医院选取冠心病患者369例和匹配的对照组360例。并记录所有研究对象的病史、体格检查等临床资料及其它流行病学资料，采取聚合酶链式反应和限制性酶切片断长度多态性分析方法（PCR—RFLP）检测各组TNFSF4基因rs3850641位点A／G的基因型并统计各组的基因型频率。结果冠心病组rs3850641G等位基因型频率显著高于对照组（P〈0．05）。并在校正了年龄、性别、高血压病史、糖尿病史、甘油三脂和胆固醇等传统危险因素的影响后，这种相关性依然存在（P=0．039）。结论TNFSF4基因rs3850641位点A／G多态性中G等位基因可能是中国人冠心病发病的独立危险因素之～。     

阿托伐他汀对TNF-α和IL-1β诱导的大鼠主动脉内皮细胞PAPP-A表达的影响

目的: 研究阿托伐他汀对炎症因子肿瘤坏死因子 α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)诱导大鼠主动脉内皮细胞表达妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)的影响。方法: 原代培养大鼠主动脉内皮细胞,选择生长良好的第3-4代细胞用于实验。实验分组:(1)空白对照组 :不加干预措施原培养液继续培养;(2)阿托伐他汀浓度组:加入浓度分别为 0.1、1、10 μmol/L的阿托伐他汀作用24 h;(3)阿托伐他汀时间组:加入浓度为10 μmol/L的阿托伐他汀分别作用6、12、24 h;(4)阿托伐他汀干预组:加入TNF-α(60 μg/L)或者IL-1β(20 μg/L)作用1 h后,再加入不同浓度的阿托伐他汀(0.1、1、10 μmol/L)进行培养,分别于作用6、12、24 h终止实验。MTT法观察药物对细胞增殖的影响, RT-PCR技术测定细胞中PAPP-A mRNA的表达, ELISA方法检测上清液中PAPP-A蛋白水平。结果: (1) 外源性加入阿托伐他汀及TNF-α或者IL-1β后,分别作用3、6、12、24、48 h,同对照组相比,细胞增殖能力无明显变化(P<0.05),说明干预药物本身对细胞没有毒性作用。(2)单独加入阿托伐他汀,细胞PAPP-A表达水平与空白对照组比较没有明显差异(P<0.05)。(3)炎症因子作用一段时间后再加入阿托伐他汀,PAPP-A mRNA和蛋白表达水平随着阿托伐他汀浓度和作用时间的增加而逐渐降低,有一定的浓度-时间依赖关系,与 TNF-α组和IL-1β组比较明显下降(P<0.05)。结论: 阿托伐他汀本身对细胞表达PAPP-A没有影响,但在一定程度上抑制TNF-α和IL-1β诱导的内皮细胞PAPP-A的表达,并有浓度-时间依赖关系。     

Effects of Ang-( 1-7 ) on the apoptosis of cultured endothelial cells induced by Ang Ⅱ

Objective To investigate the effect of Ang-(1-7) on the apoptosis in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) induced by Ang Ⅱ.Methods HUVECs were isolated and cultured.Cultured HUVECs were incubated for 24 h with Ang-(1-7), Ang Ⅱ, Ang-(1-7) A-779, Ang-(1-7) + Ang Ⅱ, A-779 + Ang Ⅱ + Ang-( 1-7), respectively.Cultured HUVECs without incubating stimulator were chosen as controls.The apoptosis of endothelial cells were detected by flow cytometry.Results The apoptosis of endothelial cells in HUVECs were upregulated by AngⅡ ( 10-6 mol/L) (25.60% ±3.17% vs 2.32% ±0.24%, P ＜0.005).Compared with the AngⅡ group, Ang-(1-7) dose-dependently inhibited the apoptosis of endothelial cells in HUVECs ( (20.04% ± 2.21% ,16.04% ± 1.32 %, 10.04% ±2.05,7.79% ±1.50% vs AngⅡ group 25.60% ±3.17%, P ＜0.05 , P ＜0.05).The effects of Ang-(1-7) could be blocked by A-779 (23.37% ±0.75% vs 20.04% ± 2.21%, 16.04% ± 1.32,10.04% ± 2.05% ,7.79%± 1.50%, P ＜ 0.05 ).Conclusion Ang-(1-7) can attenuate the apoptosis of endothelial cells induced by Ang Ⅱ in HUVECs in a dose-dependent manner.The effects of Ang-(1-7) could be blocked by A-779( P＜0.05).     

冠心病患者血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9与小而密低密度脂蛋白胆固醇的相关性研究

目的探讨冠心病患者血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)与小而密低密度脂蛋白胆固醇(sd LDLC)的关系。方法收集2014年3月至2014年12月在山西医科大学第一医院住院且行冠状动脉造影术确诊为冠心病的患者100例作为冠心病组,同期健康体检者67例作为对照组。Lipoprint脂蛋白分析仪检测LDLC颗粒大小、sd LDLC颗粒数及sd LDLC所占LDLC的百分比(简称sd LDLC百分比);酶联免疫吸附法测定血清PCSK9。结果冠心病组LDLC颗粒大小低于对照组(264.07±6.78比267.37±5.15,P0.01),sd LDLC颗粒数多于对照组(5.0±9.5比4.0±5.0,P0.05),sd LDLC百分比大于对照组(5.95%±10.50%比3.70%±5.85%,P0.01)。冠心病组血清PCSK9显著高于对照组(15.48μg/L比14.95μg/L,U=-2.74,P=0.006)。冠心病组血清PCSK9与sd LDLC百分比、LDLC呈正相关(r=0.212,P=0.034;r=0.202,P=0.032)。结论冠心病患者血清PCSK9与sd LDLC百分比呈正相关,抑制PCSK9可以预防冠心病。     

中叶素对糖尿病大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的观察中叶素(IMD)对糖尿病大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法健康雄性SD大鼠74只,给予适应性饲养一周后,随机分为糖尿病组(50只)和非糖尿病组(24只),非糖尿病组给予枸橼酸缓冲液腹腔注射,糖尿病组通过腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型。阻断大鼠左冠状动脉前降支制备心肌缺血再灌注损伤模型。非糖尿病组24只大鼠随机分为对照组和缺血再灌注组(NIR组),糖尿病组50只大鼠成功建立糖尿病模型为36只,随后随机分为糖尿病对照组、糖尿病缺血再灌注组(DIR组)、IMD组,每组12只。光镜观察心肌细胞的形态变化,电镜观察心脏超微结构,TUNEL法检测心肌细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2和Bax的蛋白表达量。结果光镜下可观察到NIR组、DIR组心肌细胞损伤变化比相应对照组更趋于严重,IMD组心肌细胞变性坏死的程度较糖尿病缺血再灌注组明显减轻。电镜下NIR组和DIR组心肌细胞损伤较相应对照组严重,IMD组心肌组织的超微结构特别是线粒体损伤与DIR组比较明显减轻。NIR组和DIR组心肌细胞凋亡率明显高于相应的对照组(P0.05),IMD组心肌细胞凋亡率则较NIR组明显减少(P0.05)。NIR组和DIR组Caspase-3、Bax和Bcl-2的蛋白表达量均与相应对照组比较差异有统计学意义(P0.05),IMD组心肌组织Caspase-3、Bax和Bcl-2的蛋白表达量与DIR组相比差异也具有统计学意义(P0.05)。结论IMD对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其保护作用可能与IMD减少心肌细胞凋亡有关。     

100例冠心病慢性心力衰竭患者室性心律失常的临床治疗体会

选取2012年1月~2013年8月我院收治的100例冠心病慢性心力衰竭室性心律失常治疗的患者,将患者分为对照组和治疗组各50例。对照组患者进行参松养心胶囊治疗,对治疗组患者进行参松养心胶囊联合盐酸胺碘酮片联合治疗,对两组疗效及不良反应发生情况进行对比。结果对照组13例患者治疗显效,26例患者治疗有效,11例患者治疗无效,治疗总有效率为78%,治疗组27例患者治疗显效,17例患者治疗有效,6例患者治疗无效,治疗总有效率为88%。两组疗效比较差异具有统计学意义(P0.05)。对照组1例头晕,1例头痛,2例胸闷,2例胃部不适,不良反应发生率为12%;治疗组2例头痛,1例胸闷,1例胃部不适,不良反应发生率为8%。两组患者不良反应发生率差异不具有统计学意义(P0.05)。冠心病慢性心力衰竭室性心律失常患者采用参松养心胶囊联合盐酸胺碘酮片治疗能够取得更加理想的疗效。     

流体剪切力对5-氮杂胞苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化NKX2.5的影响

目的观察5-氮杂胞苷（5-Azacytidine）诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞的分化,并探讨流体剪切力对诱导过程的作用。方法贴壁法从大鼠骨髓中分离骨髓间充质干细胞,进行纯化传代培养,取第4代BMSCs以10umol/l5-氮胞苷作用24h。⑴设立4组：①不加载流体剪切力;②加载5dyne/cm2的流体剪切力;③加载15dyne/cm2的流体剪切力;④加载25dyne/cm2的流体剪切力各组作用1h,通过倒置显微镜观察诱导后骨髓间充质干细胞形态的变化。⑵建立流体剪切力模型。⑶用免疫荧光方法鉴定分化的心肌样细胞的肌钙蛋白I（troponinI）表达。⑷RT-PCR测定分化的心肌样细胞Nkx2.5cDNA的表达。结果①骨髓基质干细胞（BMSCs）随着传代逐渐变成梭形,5-氮胞苷诱导后骨髓间充质干细胞胞体逐渐增大并伸出细长突起,在突起末端出现分支,部分相邻细胞的突起连接成网,形态学上表现出向心肌细胞方向转化的特征。②4周后免疫荧光显示troponinI表达阳性。③经过流体剪切力作用细胞后,Nkx2.5的表达增高,阳性条带均比未进行力学刺激的细胞表达明显,以15剪切力最明显。但是25剪切力的结果并没有随着力的增大而呈正相关变化,推测是由于过大的力学刺激引发的细胞骨架断裂、细胞毒性有关。结论 5-氮胞苷诱导的大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化;适当的流体剪切力与5-氮胞苷对骨髓间充质干细胞向心肌样细胞定向分化产生协同刺激作用。