家蝇抗菌肽Attacin在毕赤酵母中的异源表达

目的构建家蝇抗菌肽(攻击素,attacin)成熟肽的重组表达质粒并转化巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,诱导attacin表达。方法 PCR扩增家蝇抗菌肽attacin基因成熟肽编码区,克隆至酵母表达载体pPIC9K中,将重组质粒pPIC9K-attacin用SacⅠ酶切线性化后,采用电转化法将其转入毕赤酵母GS115中,通过抗性、表型和PCR筛选多拷贝整合株。甲醇诱导毕赤酵母GS115/pPIC9K-attacin的表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析鉴定表达产物,采用琼脂糖孔穴扩散法检测其对大肠埃希菌K12D31的抑制作用。结果重组表达质粒pPIC9K-attacin构建成功,电转化获得多拷贝整合转化子毕赤酵母GS115/pPIC9 K-attacin,表达产物经SDS-PAGE和Western-blotting鉴定,在约Mr22000处有蛋白条带,表达产物可抑制E.coli K12D31的生长。结论家蝇抗菌肽attacin在巴斯德毕赤酵母中成功进行了表达。     

人体寄生虫学开放性实验教学初探

针对目前人体寄生虫学实验教学中存在的问题,积极开展了一系列的开放性实验教学,初步探索了开放性实验在人体寄生虫学实验教学中的应用。实践证明,开放性实验增强学生对人体寄生虫学的认识,弥补了实验教学时数的不足,学生创新性和实际动手能力等综合素质得到了明显提高,促进了实验教学改革。     

梯度离心法分离人富含血小板血浆条件的优化

目的:优化梯度离心法提取人血小板过程中富含血小板血浆(Platelet rich plasma,PRP)的分离条件,以提高血小板的获得率及质量.方法:梯度离心分离人血小板,其中仞次离心采用正交实验设计,以离心力和离心时间为实验因素,均设置五水平,获得富含血小板血浆,利用血细胞分析仪分刖计数离心前全血及离心后PRP中m小板数量,计算血小板获得宰,并且涂片计数PRP中的杂质细胞.结果:离心力和离心时间对提取PRP中血小板效率和纯度有显著影响,并且两者存在交互作用.结论:采用离心力为100 g,离心时间为15 min分离提取的PRP中血小板数量较多,纯度较高.     

肺炎球菌无动物源性成分培养工艺及纯化新工艺探索

目的:比较无动物源性成分培养基和动物源性培养基培养肺炎球菌的差异;摸索不使用有机溶剂的肺炎球菌多糖纯化新工艺。方法:用无动物源性的原料替代肺炎发酵培养基中动物源性的成分,考察菌体密度和多糖收量的变化;采用柱层析纯化工艺收获肺炎球菌多糖,测定各阶段核酸、蛋白、多糖含量。结果:与疫苗生产所采用动物源性发酵培养基相比,无动物源性发酵培养基收获的1,7F,19A型菌体密度分别提高了1倍左右;发酵液中多糖含量分别提高了48%,50%和200%;多糖收量提高了30%～90%。纯化新工艺收获的17F,18C,19F精糖,核酸和蛋白的含量均远远低于企业的注册标准,HPLC检测多糖纯度分别为99.24%,98.92%和99.02%。结论:无动物源性成分发酵培养基适合于肺炎球菌生长,不仅增加了多糖产量,也提高疫苗的安全性;纯化新工艺能够收获合格的肺炎精制多糖。     

"同伴教育"在大学生艾滋病健康教育中的应用研究

目的：探索同伴教育在大学生艾滋病健康教育中的干预效果,为在大学生中开展预防艾滋病健康教育提供科学依据。方法：采用多阶抽样,以班级为单位随机分成两个组,即干预组（实施同伴教育组）和对照组。对干预前后学生艾滋病防治相关知识、态度和行为进行调查。结果：三所高校对照组、同伴教育组干预前后在知识、态度、行为的得分差异有统计学意义。医学院校的同伴教育组知识、态度得分均高于其他两所院校,而传统组仅知识得分高于其他两所院校。结论：同伴教育是大专院校值得推广的普及艾滋病相关知识,转变对待H IV/AIDS态度和行为的有效干预方式。     

中国人腓骨肌萎缩症线粒体融合蛋白2基因突变分析

目的 分析线粒体融合蛋白2(MFN2)基因在中国人腓骨肌萎缩症的突变情况,建立快速、有效和经济的基因诊断方法 .方法 应用变性高效液相色谱(DHPLC)结合DNA直接测序的方法 ,对9个常染色体显性遗传的CMT2先证者和26个散发CMT2病例共35例患者进行MFN2基因编码区17个外显子及其侧翼区的突变检测.结果 在35例腓骨肌萎缩症患者中共检测到3种MFN2基因序列变异:c.281G→A,c.395G→A和c.408A→T,其中c.395G→A(C132T)为首次报道的致病突变,c.281G→A(R94Q)为已知致病热点突变,c.408A→T(V136V)为单核苷酸多态.DHPLC突变检测的敏感性和特异性为100%.结论 首次在国内应用DHPLC结合DNA直接测序对MFN2基因进行突变检测,发现2个致病突变和1个单核苷酸多态.DHPLC结合DNA直接测序法可准确有效地用于大规模MFN2基因突变筛查.     

新疆出血热的研究进展

克里米亚-刚果出血热（Crimean Congo hemorrhagic fever,CCHF）于1944年发现于俄国的克果米亚,它是由克里米亚-刚果出血热病毒（Crimean Congo hemorrhagic fever virus,CCHFV）引起的,是一种流行于中国新疆南部、俄国北部、中东、南部欧亚大陆及非洲撒哈拉地区的烈性传染性疾病,其平均病死率在10％～50％之间。     

慢性阻塞性肺疾病合并焦虑抑郁障碍的临床治疗研究

目的观察抗焦虑治疗在慢性阻塞性肺疾病合并焦虑抑郁障碍中的应用和疗效。方法将47例COPD合并焦虑抑郁障碍的患者分为2组,对照组行COPD常规治疗,治疗组在常规治疗的基础上加用抗抑郁治疗。比较2组治疗前后患者肺功能、抑郁值、生活质量评分等的变化。结果治疗后治疗组抑郁值明显减少（P〈0．05）,而对照组治疗前、后抑郁值差异无统计学意义（P〉0．05）。2组经治疗后肺功能均有明显改善,其中治疗组FEV1％改善程度与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）,而2组FVC％改善程度差异无统计学意义（P〉0．05）。治疗组治疗后生活质量评分明显优于治疗前（P〈0．05）,而对照组治疗前后生活质量评分差异无统计学意义（P〉0．05）。结论抗抑郁治疗既能改善合并焦虑抑郁障碍的COPD患者的肺功能,又能明显改善其生活质量。     

厂矿医院药剂工作现状调查及对策

为进一步贯彻《药品管理法》、国务院目发(94)53号及国务院国办发(96)14号件精神，拓展我市药检工作新局面，提高药品抽检水平，蚌埠市药检所于1997年10月上旬，选调技术骨干，为期10d，有选择、有重点地对我市17家厂矿医院（卫生所)进行了药剂工作调研。现将调查的情况简述如下。     

胸腔镜加小切口行Heller手术治疗贲门失弛缓症

目的　探讨胸腔镜加小切口行 Heller手术治疗贲门失弛缓症的手术方法和效果 ,以提高手术疗效。方法　 1996年 1月～ 2 0 0 0年 12月 ,对 3 7例经病史、食管镜和食管 X线钡餐造影确诊为贲门失弛缓症患者 ,在胸腔镜加小切口下行 Heller手术治疗 ,并进行随访观察。　结果　 1例患者改行常规开胸手术。手术时间 1～ 3 .5小时 ,平均手术时间 1.8± 0 .4小时。所有患者术后均未发生食管漏和手术死亡 ,住院期间于胃肠道功能恢复后可正常进食 ,吞咽困难症状消失。至最后 1次随访 ,手术效果优 2 9例 ( 78% ) ,良 5例 ( 14 % ) ,差 3例 ( 8% ) ,后者术后 3个月因吞咽困难复发行食管扩张 ,发生食管反流 4例 ( 11% ) ,但不需手术或药物治疗。　结论　胸腔镜加小切口 Heller手术治疗贲门失弛缓症具有良好的效果。