两种方法测定川芎油中藁本内酯、洋川芎内酯A和正丁基苯酞的含量

目的:建立同时测定川芎油中藁本内酯、洋川芎内酯A和正丁基苯酞含量的方法,比较两种方法分析结果的差异.方法:采用超临界CO2萃取法和水蒸气蒸馏法提取川芎油,分别采用气相色谱质谱联用(GC-MS)内标法和高效液相色谱( HPLC)外标法测定,并进行方法学考察.结果:SFE-CO2萃取法和水蒸气蒸馏法的出油率分别为10.49％,1.54％,以每克药材中提取得到的藁本内酯、洋川芎内酯A和正丁基苯酞的量计算,SFE-CO2萃取法分别可得19.676,15.56,0.957 4 mg,水蒸气蒸馏法提取可得2.16,1.56,0.11 mg.GC-MS法测定结果较HPLC法低1％ ～4％,平均精密度高10％、检测限低10倍.结论:GC-MS内标法精密度、灵敏度都较好,对川芎油的含量的分析较为准确;HPLG法是一种相对方便、经济的方法.     

半夏多糖脱蛋白工艺研究

目的:筛选半夏多糖除蛋白的最优工艺。方法:以半夏多糖保留率和蛋白脱除率为考察指标,研究3种脱蛋白方法对半夏多糖脱蛋白的影响,并用正交试验优选出最佳工艺。结果:确定了胰蛋白酶结合三氯乙酸的脱蛋白方法,最优脱蛋白工艺为:在胰蛋白酶最适酶解条件下酶解,酶解液与TCA溶液(5%)的体积比为4:1,振摇时间10 min,静置时间30 min;在此条件下半夏多糖蛋白脱除率为94.96%,多糖保留率为91.51%。结论:优选出的脱蛋白方法可以有效的去除蛋白,纯化多糖,为半夏多糖制备工艺的进一步研究提供了参考。     

大黄化学成分的液相色谱-质谱联用鉴别

目的 建立快速、准确鉴别大黄化学成分的液相色谱-质谱方法.方法 采用HPLC-MS技术,对大黄的主要化学成分进行分离、鉴别、结构分析.结果 根据负离子模式下获得各色谱峰质谱数据,参照文献,对主要色谱峰进行指认,共鉴别了25个化合物,其主要化学成分是多酚、蒽醌及其苷类化合物.结论 HPLC-MS可提高中药化学成分的分析效率,有利于化合物结构鉴别,可作为中药大黄化学成分的鉴定方法.     

气相色谱质谱联用结合保留指数分析薄荷挥发性成分

目的：分析薄荷中的挥发性成分。方法：采用水蒸气蒸馏技术采集薄荷的挥发性成分,气相色谱质谱联用（GC-MS）结合保留指数进行分析鉴定。结果：检出70个组分,质谱结合保留指数定性鉴定出36个主要挥发性成分,含量较高的组分为薄荷酮（26.08%）、长叶薄荷酮（11.58%）、β-毕澄茄烯（6.11%）、石竹烯（8.04%）。结论：GC-MS结合保留指数对薄荷挥发性成分进行定性分析,使定性结果更为准确。     

酸枣仁汤含药脑脊液指纹图谱研究

目的:通过对酸枣仁汤含药脑脊液指纹图谱的研究,为酸枣仁汤镇静催眠药效物质基础研究提供方法学基础。方法:采用反相高效液相色谱法,以梯度洗脱的方式,50 min内在同一图谱中同时完成水溶性成分和脂溶性成分指纹图谱的建立,同时将含药脑脊液、空白脑脊液、酸枣仁汤及各单味药HPLC指纹图谱进行对比分析。结果:通过对脑脊液采集方法、前处理方法及洗脱梯度、检测波长等色谱条件的筛选,建立了可将酸枣仁汤含药脑脊液中化学成分完全分开的指纹图谱,并进行归属分析,初步鉴定出含药脑脊液中的固有成分、药源性物质及代谢产物。结论:方法可作为探索酸枣仁汤药效物质基础研究的有效手段。     

多指标正交试验优选麻黄附子细辛汤提取工艺

目的:优选麻黄附子细辛汤提取工艺.方法:采用HPLC测定指标成分含量,以麻黄碱、伪麻黄碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头碱、苯甲酰次乌头碱和干浸膏得率为检测指标,采用L9(3)4正交试验考察提取时间、提取次数和溶剂用量对提取工艺的影响.结果:麻黄附子细辛汤最佳提取工艺为16倍量pH 2.0盐酸提取2次,每次2.5h.结论:多指标综合评定优化提取工艺更符合中医用药的整体观,优化的提取工艺方法合理可行,稳定可靠,具可操作性和重复性.     

正交实验结合高效液相色谱指纹图谱优选芎汤醇提工艺

 目的优选芎汤醇提的最佳工艺条件。方法采用高效液相色谱指纹图谱技术,以阿魏酸含量、高效液相色谱指纹图谱特征峰总面积以及干浸膏得率为综合评判指标,通过L9(3)4正交实验设计,考察乙醇浓度、乙醇用量、回流时间和回流次数等因素对提取工艺的影响。结果醇提最佳工艺条件为加12倍量体积分数70%乙醇提取3次,每次1.5h。结论该醇提工艺合理可行,优于传统提取方法。     

华海乙肝方半仿生提取法提取药材组合方式的优选

目的：选择华海乙肝方成分提取时药材最佳组合方式。方法：将方药组合成15组,用半仿生提取法提取,提取液作黄芪甲苷、柴胡皂苷C、虎杖苷、五味子乙素、干浸膏及无水乙醇精制液的高效液相梯度洗脱总积分面积的测定。结果：6个指标综合评价Y值以AC+B+D最大。结论：华海乙肝方成分提取时以柴胡、五味子单独提取,黄芪与虎杖混合提取为最佳。     

柴胡桂枝汤挥发油的GC-MS分析及对人肺腺癌A549细胞体外增殖的抑制作用研究

目的:研究复方柴胡桂枝汤挥发油的组成成分,并评价其对人肺腺癌A549细胞体外增殖的抑制作用。方法:根据2015年版《中国药典》(四部)通则2204挥发油测定法中甲法提取柴胡桂枝汤中的挥发油。采用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)结合Kováts指数分析其挥发油成分,并采用峰面积归一化法计算各成分的相对含量。以不同质量浓度顺铂(4、8、16、32、64 mg/L)为阳性对照,采用MTT法检测不同质量浓度柴胡桂枝汤挥发油(25、50、100、200、400 mg/L)作用48 h后对A549细胞体外增殖的抑制作用;另设阴性对照组(加细胞但不加药物)。结果:从挥发油中共分离出71个成分,鉴定出其中59个成分,其峰面积之和占总峰面积的84.99%。其中,相对含量较高的成分为芳姜黄烯(17.65%)、β-甜没药烯(9.57%)、β-罗勒烯(7.05%)、α-姜黄烯(5.35%)、2,5-二甲基苯甲醛(4.24%)、异丁酸芳樟酯(2.70%)、α-雪松烯(2.48%)、δ-杜松烯(2.07%)。与阴性对照组比较,4~64 mg/L顺铂组和25~400 mg/L柴胡桂枝汤挥发油组细胞的增殖率均显著降低(P<0.05);顺铂和柴胡桂枝汤挥发油对A549细胞体外增殖的半数抑制浓度分别为10.150、73.526 mg/L。结论:柴胡桂枝汤挥发油中主要以芳姜黄烯、β-甜没药烯、β-罗勒烯、α-姜黄烯等成分为主,其对A549细胞的体外增殖具有一定的抑制作用。     

陈皮中多甲氧基黄酮类成分的高效分离及其抑制SARS-CoV-2 3CLpro的潜在活性研究＊

目的 实现陈皮中多甲氧基黄酮类成分（PMFs）的高效富集和纯化，研究其抑制SARS-CoV-2 3CL^pro的潜在活性。方法 采用固相萃取结合高速逆流对陈皮中的PMFs进行富集纯化，利用体外酶活实验测定其对3CL^pro的抑制活性，并借助分子模拟技术探讨其潜在机制。结果 从陈皮中分离得到高纯度（ > 97%）的川陈皮素、3， 5， 6， 7， 8， 3''， 4'' – 七甲氧基黄酮和橘皮素；体外酶活实验表明3个成分对3CL^pro均有一定的抑制作用，其中3， 5， 6， 7， 8， 3''， 4'' - 七甲氧基黄酮的活性较强，IC₅₀为（65.65 ± 1.00） μmol·L^-1；分子模拟显示各成分与蛋白结合活性强弱顺序与实验结果一致。结论 本研究实现了陈皮中PMFs的高效富集纯化，3， 5， 6， 7， 8， 3''， 4'' - 七甲氧基黄酮对3CL^pro表现出的较强抑制活性为抗SARS-CoV-2潜在先导化合物的发现提供了新的指引。