人重组白细胞介素-6对缺氧后海马培养神经细胞Fos表达的影响

用免疫组化方法，观察缺氧诱导体外培养大鼠海马神经细胞Fos表达及人重组白细胞介素-6（rhIL－6）的影响。结果显示，经rhIL－6孵育的海马神经细胞缺氧后Fos免疫反应阳性胞核的百分率和Fos免疫反应阳性胞核的平均光密度均明显低于对照组，表明缺氧能诱导体外培养海马神经细胞Fos的表达，rhIL－6能抑制缺氧神经细胞Fos的表达。提示rhIL-6可能参与脑缺氧损伤的调控。     

小鼠交感神经节细胞在开放和密闭培养时生长分化的比较

用新生小鼠交感神经节分散培养细胞观察了在7%CO_2条件下开放培养时神经元的生长发育,并与密闭培养进行比较.结果表明:交感神经元在7%CO_2条件下开放培养时不仅细胞生长较密闭培养快,而且细胞活存率亦明显高于密闭培养.     

缺氧诱导体外培养大鼠海马神经元c—fos的表达及腺苷的影响

缺氧诱导体外培养大鼠海马神经元ｃ┐ｆｏｓ的表达及腺苷的影响＊万勤丁爱石黄燕华王福庄军事医学科学院基础医学研究所北京１００８５０＊国家自然科学基金资助项目（３９４７０２７８）中国科学院上海生理研究所低氧生理开放实验室资助项目（８７５００１）近年来的研究...     

最大摄氧量间接测定方法的探讨

54名男受试者(20.3±1.8岁)分别完成了亚极量踏阶运动。用Shephard,Margaria和汪济民的计算公式及Maritz的回归方程法,根据亚极量踏阶运动的心率(HR)和氧耗量(Vo_2)间接估计出最大摄氧量(Vo_(2max))。三种计算公式估计的Vo_(2max)与回归方程法估计值进行了比较。结果表明,汪济民计算式估计的Vo_(2max)更接近回归方程法的估计值。预测Vo_(2max)的亚极量运动的适宜运动强度为70～80%Vo_(2max)。另外,我们还导出由体重和踏阶速度(阶高40cm)推算Vo_2的公式,Vo_2(L/min)=0.02715体重(Kg)+0.01143踏阶速度(次/min)—1.1207。     

间断性递增负荷时的气体交换特点和无氧阈值

一些作者提出了用连续性递增负荷运动气体交换参数的变化特点确定无氧阈值(AT)的无损伤方法。本实验的目的在于,探讨间断性递增负荷运动气体交换参数的变化特点和确定AT的可能性。我们测定了23名男青年在跑步机上进行间断性递增负荷运动时的气体交换参数,例如呼出气体中氧和二氧化碳浓度(F_(EO_2)和F_(ECO_2))、呼吸商(R)、摄入氧通气当量(_E/_(O_2))和排出二氧化碳通气当量(_E/_(CO_2)的变化。结果表明,F_(EO_2),F_(ECO_2),_E/_(O_2),_E/_(CO_2)和R均与功率呈非线性相关,而且气体交换参数的非线性“转折点”具有较好的重复性。因此,我们认为可以用检查间断性递增负荷运动气体交换参数的方法确定个体的AT值。     

新生大鼠海马,隔和下丘脑培养细胞中AchE阳性...

应用乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）组化方法，观察了ＡｃｈＥ阳性神经元在新生大鼠海马、隔和下丘脑培养细胞中的分布及形态特征。ＡｃｈＥ阳性神经元胞体都较大。在海马培养细胞中ＡｃｈＥ阳性神经元数较少，为多极神经元，胞体着色浅。但在隔和下丘脑培养细胞中ＡｃｈＥ阳性神经元数较大，多为双极神经元，胞体呈中强度染色。这三种培养细胞中的ＡｃｈＥ阳性神经元数均随着培养时间的延长而逐渐增多。     

P19细胞向神经元诱导分化的实验研究

目的 探讨P19细胞向神经元定向分化发育的可能性。方法 经维甲酸(RA)诱导4d的．P19细胞按神经细胞培养方法培养12d，分别用NSE、MAP-2和TH进行免疫组织化学染色，用AchE进行组织化学染色，鉴定分化细胞的特征。结果 经RA诱导的P19细胞培养12d，大多数细胞转变为类似于神经元的形态，长出突起并相互联络成网。经NSE免疫组织化学显示，12d培养物中神经元约占89％。P19诱导的神经元培养12d，神经元突起经MAP-2染色呈阳性反应。TH免疫组织化学显示，神经元中TH染色阳性神经元约占0.8％。组织化学显示．神经元中AchE染色阳性神经元约占71．09％。结论 P19细胞在体外经定向诱导分化可以产生较高比例的神经元。     

新生大鼠高纯度少突胶质前体细胞系细胞的培养与鉴定:改良振荡分离纯化法的特点

目的:观察体外培养少突胶质前体细胞的增殖和分化规律,探索其获得纯度较高细胞的实验方法.方法:实验于2004-03-01/08-01在军事医学科学院基础医学所实验室完成.取新生SD大鼠脑皮质体外培养,利用改良的振荡分离纯化法,振荡可将长于星形胶质细胞层表面的少突胶质前体细胞分离出来,差速贴壁以去除其他细胞,传代细胞分别用无血清和有血清的培养液培养,免疫组织化学法测表面抗原进行细胞鉴定.结果:可获得纯度大于95%不同发育阶段的少突胶质细胞系细胞或2型星形胶质细胞.少突胶质前体细胞祖细胞A2B5,O4阳性,不成熟少突胶质细胞O4、O1阳性,成熟少突胶质细胞髓鞘碱性蛋白阳性,2型星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白阳性.结论:改良的振荡分离纯化法是获取高纯度少突胶质细胞系细胞的有效方法.     

纳洛酮对缺氧大鼠皮质神经元的保护作用

背景：纳洛酮对脑缺血再灌注损伤细胞的保护作用机制尚不明确。选择体外培养皮质神经元研究纳洛酮疗效可排除多重因素干扰。目的：观察缺氧对体外培养大鼠皮质神经元的影响及纳洛酮的保护机制。设计：重复测量设计。地点和对象：实验地点：军事医学科学院神经生物学研究室。研究对象：体外培养12d的Wistar大鼠皮质神经元。干预：取体外培养12d的Wistar大鼠皮质神经元，随机分为正常对照组、缺氧组、纳洛酮组(缺氧前24h加纳洛酮预处理)；缺氧6h后在常氧下继续培养24h。主要观察指标：观察各种条件下神经元的存活率和形态学的改变，测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量。结果：缺氧后可见神经元胞体肿胀、细胞死亡，LDH渗出量增多[6h：正常对照组为(78．68&;#177;7．34)％，缺氧组为(194．38&;#177;22．32)％；12h：正常对照组为(77．98&;#177;8．85)％，缺氧组为(331．66&;#177;36．12)％]，细胞存活率减少[6h：正常对照组为(91．82&;#177;2．89)％，缺氧组为(66．96&;#177;4．98)％；12h：正常对照组为(90．84&;#177;2．61)％，缺氧组为(32．02&;#177;6．34)％]，差异有显著性意义(P&;lt;0．01)。经纳洛酮预处理的神经元，缺氧后神经元胞体肿胀、细胞死亡程度轻于缺氧组，LDH渗出[6h：(159．86&;#177;34．03)％；12h：(256．28&;#177;28．29)％]显著低于缺氧组(P&;lt;0．01)，而存活率[6h：(78．08&;#177;4．15)％：12h：(53．68&;#177;4．32)％]明显高于缺氧组，差异有显著性意义(P&;lt;0．01)。结论：对缺氧诱导的皮质神经元的损伤，纳洛酮具有明显的保护作用。     

新生小鼠心肌细胞培养模型的建立及其在毒性评价研究中的应用

目的建立简单实用和重复性好的新生小鼠心肌细胞体外培养方法,构建体外心肌细胞模型用于外源化合物的心肌毒性评价。方法取当天出生的小鼠心脏,用胰蛋白酶、Ⅱ型胶原酶和分散酶消化心室肌组织,用差速贴壁和化学方法纯化心肌细胞,用此细胞模型评价镰刀菌毒素丁烯酸内酯（BUT）的心肌毒性作用。结果新生小鼠心肌细胞培养3d后,大部分细胞开始搏动,随培养时间的延长,心肌细胞胞体逐渐增大。经α-actin抗体免疫组织化学鉴定,心肌细胞的纯度为96%。持续培养90d后,心肌细胞仍保持较好的搏动频率。经BUT染毒后,心肌细胞存活率随BUT浓度的增加而逐渐下降,对心肌细胞的损伤在形态上主要表现为细胞水肿、空泡样变性、肌纤维断裂等。结论该实验建立的新生小鼠心肌细胞体外培养方法,单细胞收获率和心肌细胞纯度高,心肌细胞搏动时间长。BUT对心肌细胞有较强的毒性作用并呈明显的量-效关系。