人重组白细胞介素—6可减少缺氧—复氧后大鼠海马培养神经？…

用原位末端标记（ＴＵＮＥＬ）法观察人重组白细胞介素－６（ｒｈＩＬ－６）对缺氧－复氧后大鼠海马培养神经元的ＤＮＡ损伤的影响。结果显示,海马神经元缺氧－复氧后ＤＮＡ损伤神经元百分率明显增高,经ｒｈＩＬ－６预处理的海马神经元缺氧－复氧后ＤＮＡ损伤神经元百分率明显低于对照组。本结果表明,缺氧－复氧能使体外培养海马神经元发生ＤＮＡ损伤,ｒｈＩＬ－６可减少缺氧－复氧后海马神经元的ＤＮＡ损伤。提示ｒｈＩＬ－６对     

持续低氧增强人骨髓间充质干细胞体外增殖

目的探讨不同方式低氧对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)增殖的影响。方法采用血球计数板计数法和流式细胞术分别观察了间歇性低氧(3%O2、10%O2)和持续性低氧(3%O2、10%O2、100μmol/LCoCl2、200μmol/LCoCl2)对hMSCs数量以及增殖指数的影响。结果间歇性低氧对hMSCs数量和增殖指数无明显影响;持续性低氧各组hM SCs数量和增殖指数均增加(P<0.05)。结论持续性低氧可促进体外培养的hMSCs增殖,说明持续性低氧作为体外的一种可控制因素,可调节hMSCs的增殖,对于hMSCs的临床应用具有一定的意义。     

低氧预处理对大鼠海马神经元缺氧耐受性和bcl-2表达的影响

采用免疫组织化学方法观察了低氧预处理对大鼠海马神经元缺氧耐受性和 bcl-2表达的影响。结果显示 ,经低氧预处理的海马神经元缺氧 -复氧后 bcl-2表达较对照组明显增强 ,神经元损伤程度减轻 ,神经元存活数明显高于对照组。本结果表明 ,低氧预处理可使海马培养神经元对缺氧产生耐受 ,增加缺氧 -复氧后神经元 bcl-2的表达。提高神经元存活数     

低氧预处理对大鼠海马神经元缺氧耐受性和热休克蛋白表达的影响

采用免疫组织化学方法 ,观察低氧预处理对大鼠海马培养神经元缺氧耐受性和热休克蛋白(Hsp70 )表达的影响。结果显示 ,低氧预处理能诱导海马神经元对Hsp70的表达。经低氧预处理的海马神经元缺氧 复氧后Hsp70表达较对照组明显增强 ,神经元损伤程度减轻 ,神经元存活数明显高于对照组。本结果表明 ,低氧预处理可诱导海马培养神经元对Hsp70的表达 ,并使海马神经元对缺氧产生耐受 ,减少缺氧 复氧后神经元的死亡     

凉粉草中抗缺氧化学成分

目的研究凉粉草(Mesona chinensisBenth)中的抗缺氧化学成分。方法用硅胶柱色谱、Sephadex LH 20柱色谱、ODS柱色谱及制备HPLC色谱分离纯化化合物;通过化合物的理化常数、1H NMR和13C NMR波谱数据,鉴定化合物结构;通过大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤克隆化细胞株(PC12)实验,对各单体化合物进行活性评价。结果从凉粉草体积分数为65%的乙醇提取物的氯仿层和乙酸乙酯层分离得到8个化合物:咖啡酸(1)、3(4乙氧基3羟基苯基)烯丙酸(2)、咖啡酸乙酯(3)、山奈酚(4)、高山黄芩素(5)、2十六烷基-十八烷酸(6)、熊果酸(7)和豆甾醇(8);应用PC12细胞缺氧模型在DMSO溶液中测得化合物1、4、5、6、7、8在不同质量浓度下具有不同的抗缺氧活性。结论首次从凉粉草属中分离得到化合物2、3、5、6;化合物1、4、5、6、7、8有一定的抗缺氧活性,化合物4、5、7、8有较好的抗缺氧活性。     

谷胱甘肽抗谷氨酸诱导海马神经元损伤钙超载机制研究

目的观察还原型谷胱甘肽(GSH)及氧化型谷胱甘肽(GSSG)对谷氨酸(G lu)诱导海马神经元死亡影响及其作用机制。方法选用新生Wistar大鼠原代培养海马神经元Glu细胞毒性损伤模型,采用台盼蓝活细胞拒染、培养液乳酸脱氢酶(LDH)测定及TUNEL细胞凋亡原位检测等方法比较GSH及GSSG预处理3d对Glu细胞毒性损伤的影响,同时利用激光扫描共聚焦显微镜观测细胞内Ca²⁺浓度的变化,并与MK-801比较。结果GSH及GSSG均可减少Glu诱导神经元死亡,轻度抑制Glu诱导的神经元Ca²⁺内流,但不及MK-801。结论谷胱甘肽对Glu细胞毒性神经损伤有保护作用,除与通常公认抗氧化作用有关外,抑制Glu诱导的神经元Ca²⁺内流亦为其保护机制之一。     

二十二碳六烯酸对神经细胞生长发育的作用

目的 :　观察二十二碳六烯酸 ( DHA)对神经细胞生长发育的作用。方法 :　将无血清培养的新生大鼠大脑神经细胞分为实验组和对照组 ,实验组加入 0 .33mol/ L( 5mol/ 1 5L)乳化DHA40 μl。对两组细胞进行神经细胞活力、蛋白质含量、神经特异性烯醇化酶 ( NSE)活性测定及神经细胞形态学观察。结果 :　实验组大脑神经细胞突起生长速度、胞体面积和直径、神经细胞存活率、NSE和神经细胞活力及蛋白含量均显著高于对照组。结论 :　DHA对神经细胞的生长有促进作用 ,且这一作用可能与促进神经细胞蛋白质合成有关。     

热环境对纹状体神经元生长的影响

目的:研究热环境对纹状体神经元生长、凋亡的影响,探讨热环境刺激对神经系统损伤的机理,为筛选新的预防和治疗热环境损伤的药物提供参考。方法:原代培养的纹状体神经元用抗神经丝蛋白(NF)、抗神经元特异的烯醇化酶(NSE)和抗酪氨酸羟化酶(TH)的抗体进行免疫细胞化学染色鉴定,计数NF阳性细胞百分比。细胞在(43.0±0.2)℃,10%的CO₂条件下培养1h造成热环境处理模型,立即用PI/H33258双染色、台盼蓝染色、活性caspase-3和原位末端转移酶(TdT)染色等方法分别检测坏死和凋亡细胞,同时采用体视学分析神经元体积大小。结果:正常培养的纹状体神经元在接种7-9d成熟,胞体饱满,呈NF、NSE和TH阳性。PI/H33258双染色结果表明,急性热环境处理时发生的细胞凋亡的百分比较少,而坏死比例明显增加;台盼蓝染色计数结果表明,细胞总数明显减少,同时坏死细胞的比例增加了10倍左右;活性caspase-3和TdT以及细胞体积的分析结果表明,热环境刺激引起神经元细胞数目减少,同时小幅度增加了细胞凋亡的发生。结论:43℃的热环境处理1h,导致纹状体细胞数目减少,引起细胞死亡主要通过坏死途径,凋亡比例较少。     

腺苷对体外培养的海马缺糖缺氧神经元的保护作用

目的:观察缺糖缺氧对大鼠海马培养神经元的影响及腺苷的保护作用。方法:取培养12d的海马神经元, 分为对照组和腺苷组, 同时于缺糖缺氧环境中培养0.5-4h后取出, 立即更换原神经元培养液在常氧下继续培养24h。于不同时间取出, 收集培养液, 测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量, 用图像分析仪测定神经元胞体面积, 并用4%台盼蓝染色, 计算神经元存活百分率。同时用原位末端标记(TUNEL)法检测神经元凋亡。结果:缺糖缺氧后海马神经元胞体肿胀, 体积变大, LDH渗出含量增多, 神经元存活率减少。恢复糖和氧供应后24h, 海马神经元LDH渗出含量进一步增多, 细胞存活率进一步减少, 凋亡神经元百分率明显增多。经腺苷预处理的海马神经元缺糖缺氧后, 神经元LDH渗出明显少于对照组, 神经元胞体面积增大程度轻于对照组, 神经元存活率明显高于对照组。缺糖缺氧0.5-3h再恢复氧和糖供应后24h, 腺苷组凋亡神经元百分率亦明显低于对照组。结论:缺糖缺氧可引起海马神经元严重损伤, 神经元损伤程度与神经元存活率、LDH渗出含量的改变呈对应变化。腺苷能减少缺糖缺氧后神经元的损伤, 减少缺糖缺氧后神经元凋亡, 提示腺苷对缺糖缺氧海马神经元具有一定的保护作用。     

噬菌体肽库中筛选NMDA受体模拟抗原

目的：研究发现脑缺血患者体内存在N甲基－D－门冬氨酸（NMDA）受体自身抗体，了解共滴度与疾病程度的相关性。方法：用NMDAR1单克隆抗体淘筛噬菌体展示随机12肽库，获得NMDR1模拟表位抗原。结果：细胞竞争ELIA结果显示，该模拟抗原可以竞争细胞表达天然抗原与抗体的结合，具有抗原模拟性。结论：噬菌体肽库中筛选NMDAR1受体模拟抗原可以用于临床病人血清检测，本研究为下一步临床检验准备了必要条件。