低氧预处理对缺氧-复氧后体外培养大鼠海马神经元Fos、Jun表达和神经元凋亡的影响

目的　观察低氧预处理对体外培养大鼠海马神经元缺氧 复氧后Fos、Jun表达和神经元凋亡的变化。方法　取培养 12d的两组 (对照组和低氧预处理组 )神经元 ,同时置于缺氧环境 (0 90l LN2 、0 10l LCO2 )中培养 4h后取出 ,置含 0 10l LCO2 和空气的培养箱内复氧培养 2 4和 72h。于不同时间取出 ,观察神经元存活数 ,并分别用抗Fos和Jun抗血清进行免疫组织化学染色 ,观察Fos、Jun表达阳性和阴性神经元数目 ,计数Fos和Jun表达神经元所占百分率。并用原位末端标记 (TUNEL)法和流式细胞术分别检测缺氧 复氧对体外培养海马神经元凋亡的影响。　结果　缺氧 复氧后大鼠海马培养神经元中Fos、Jun表达阳性神经元百分率和凋亡神经元百分率均较缺氧前显著增加。经低氧预处理的海马神经元缺氧 复氧后Fos、Jun表达神经元和凋亡神经元百分率均较对照组明显减少。神经元损伤程度减轻 ,神经元存活数明显高于对照组。　结论　低氧预处理可使培养中海马神经元对缺氧产生耐受 ,减少缺氧 复氧后神经元Fos和Jun表达 ,减少缺氧 复氧后神经元凋亡。     

新生大鼠海马、隔和下丘脑培养细胞中AchE阳性神经元的分布

应用乙酰胆碱酯酶(AchE)组化方法,观察了AchE阳性神经元在新生大鼠海马、隔和下丘脑培养细胞中的分布及形态特征.AchE阳性神经元胞体都较大.在海马培养细胞中AchE阳性神经元数较少,为多极神经元,胞体着色浅.但在隔和下丘脑培养细胞中AchE阳性神经元数较多,多为双极神经元,胞体呈中强度染色.这三种培养细胞中的AchE阳性神经元数均随着培养时间的延长而逐渐增多.     

缺氧/复氧对培养的大鼠海马神经元Fos、Jun表达和神经元调亡的影响

研究观察了缺氧 /复氧对体外培养的海马神经元Fos和Jun表达和神经元调亡的影响 ,实验采用培养 1 2d的海马神经元 ,置于 2 0 0 0cm3 的恒温 (36℃ )密闭容器内 ,连续充以无氧气体 (90 %N2 、1 0 %CO2 ) ,在缺氧条件下继续培养 2h、4h后取出 ,置含 1 0 %CO2 和空气的培养箱内复氧培养 2 4h和 72h。于不同时间取出 ,观察神经元存活数 ,分别用抗Fos和抗Jun抗血清进行免疫组织化学染色 ,计数Fos和Jun表达阳性神经元百分率 ,并用原位末端标记(JUNEL)法和流式细胞术分别观察和测定缺氧 /复氧对体外培养海马神经元调亡的影响。结果显示 :缺氧…     

RADIX SALVIAE MILTIORRHIZAE PROTECTS RAT HIPPOCAMPAL NEURON IN CULTURE FROM ANOXIC DAMAGE

Radix Salviae Miltiorrhizae (RSM), a well-known traditional Chinese medicinal herb, has been used to improve blood circulation and resolve blood stasis. We have previously found that RSM has neuroprotective effect on ischemia and/ or ischemia-reperfusion rats. The purpose of this study was to obtain further information on the mechanism of the RSM-in-duced neuroprotection and to examine the neuroprotective effect on neurons exposed to anoxia. The effect of RSM on anoxic damage in cultured hippocampal neurons of neonatal rat was investigated by using morphological changes and heat shock protein 70kD (HSP70) expression as indicators. RSM given 0.5h before 2h-anoxia followed by 48 hours reoxygenation could significantly increase survival rate of hippocampal neurons and number of HSP70 positive cells. The results suggest that RSM has a direct neuroprotective effects on anoxic damage in hippocampal neurons.     

可用于比较研究的双孔脑片浴槽

近年来,离体脑片生物电实验方法在脑生理、药理和病理研究中应用日益广泛.我们在普遍采用的单孔浴槽基础上,改制成的双孔半浸式浴槽适用于建立脑片缺氧损伤模型及其他某些比较研究等.     

非损伤性阻抗法测定大鼠脑血流的应用

用阻抗法测定了大鼠的脑血流,并观察结扎一侧或双侧颈总动脉以及侧脑室内注射脑血管扩张剂后脑血流的变化,用以建立大鼠非损伤性脑血流测定方法.结果表明:正常大鼠脑血流图(REG)波形特征与人和大动物相似.当结扎一侧或双侧颈总动脉后脑血流减少,侧脑室内注射脑血管扩张剂罂粟硷后脑血流增加,上述改变均能在REG上发生相应的波幅减小和增大的变化,证明本方法可用于大鼠脑血流的研究.     

缺氧对海马培养细胞人重组白细胞介素-6免疫组化反应的影响

本文观察了缺氧对体外培养海马细胞中rhIL-6免疫反应的影响。结果显示，体外培养的海马神经元和神经胶质细胞的rhIL-6呈弱阳性免疫反应，缺氧1～4h后神经元和神经胶质细胞的rhIL-6免疫组化反应明显增强。对免疫染色细胞作图像分析结果显示，缺氧后神经元和神经胶质细胞的平均光密度较缺氧前增加，尤以缺氧2h时最明显，之后随缺氧时间延长，神经元和神经胶质细胞的平均光密度又逐渐减弱。上述结果表明，海马脑区存在rhIL-6免疫反应细胞；缺氧条件下rhIL-6免疫组化反应增强，提示rhIL-6可能参与脑缺氧损伤的调控。     

纤维型和原浆型星形胶质细胞的分离培养及睫状神经营养因子对其增殖的影响

目的和方法：建立纤维型及原浆型星形胶质细胞体外分离培养的方法,并观察在体外睫状神经营养因子（ｃｉｌｉａｒｙｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ,ＣＮＴＦ）对这两种细胞的增殖作用。结果和结论：经免疫组织化学鉴定,本方法分离培养的星形胶质细胞,纤维型纯度达９５％,原浆型纯度达９９％。ＣＮＴＦ可以促进纤维型星形胶质细胞的增殖,而对原浆型星形胶质细胞的促增殖作用不明显。     

人重组白细胞介素—6对大鼠海马神经元Bcl—2表达？…

目的 观察重组人白细胞介素－６（ｒｈＩＬ－６）对体外培养大鼠海马神经元Ｂｃｌ－２表达的影响。方法 取培养３、７、１４、２１和２８天（ｄ）的两组（对照组和ｒｈＩＬ－６组）培养神经元,分别观察其生长发育和神经元活存数,并用抗Ｂｃｌ－２抗血清进行免疫组化染色,观察Ｂｃｌ－２免疫反应（Ｂｃｌ－２－ＩＲ）阳性和阴性神经元数目,计算Ｂｃｌ－２－ＩＲ阳性神经元所占百分率,并在图像分析仪上对Ｂｃｌ－２－ＩＲ神经元     

人重组白细胞介素-6可减少缺氧-复氧后大鼠海马培养神经元的DNA损伤

用原位末端标记（ＴＵＮＥＬ）法观察人重组白细胞介素－６（ｒｈＩＬ－６）对缺氧－复氧后大鼠海马培养神经元的ＤＮＡ损伤的影响。结果显示,海马神经元缺氧－复氧后ＤＮＡ损伤神经元百分率明显增高,经ｒｈＩＬ－６ 预处理的海马神经元缺氧－复氧后ＤＮＡ损伤神经元百分率明显低于对照组。本结果表明,缺氧－复氧能使体外培养海马神经元发生ＤＮＡ损伤,ｒｈＩＬ－６ 可减少缺氧－复氧后海马神经元的ＤＮＡ损伤。提示ｒｈＩＬ－６ 对海马神经元缺氧－复氧损伤可能具有一定保护作用。