大黄酸金属配合物的结构及对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用

目的:以大黄酸和相应金属盐为原料,合成3种金属配合物,并对其结构进行表征,比较其抗癌活性大小。方法:采用核磁共振氢谱法、红外光谱法、紫外光谱法、滴定法、原子吸收光谱法进行结构表征;采用MTT法测试三种配合物对于人肝癌Hep G2细胞的抑制作用。结果:通过光谱法证实有配合物生成,并推测出其可能结构。MTT测试显示配合物和配体均具有一定的抗癌活性,其中大黄酸-Fe(Ⅲ)抗癌活性最强,其IC50值达17.44μg.m L-1,优于配体大黄酸(IC50=116.741μg.m L-1),大黄酸-Cu(Ⅱ)(IC50=54.427μg.m L-1),大黄酸-Cr(Ⅲ)(IC50=63.584μg.m L-1)。结论:大黄酸金属配合物抗癌活性相比配体增强。     

大黄酸通过miR-29c-3p调节FSCN1的表达影响胃癌细胞的生物学行为

目的探讨大黄酸(Rhein)对人胃癌细胞(SGC-7901)增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及其机制。方法通过qRT-PCR检测大黄酸处理后细胞中miR-29c-3p的表达以及miR-29c-3p的转染效率;miR-29c-3p mimics组、NC mimics组、Rhein+miR-29c-3p inhibitor组、Rhein+NC mimics组均使用脂质体转染试剂转染至SGC-7901细胞中,再使用50μM的大黄酸处理48h;CCK-8法检测细胞增殖;Annexin V-FITC/PI和流式细胞术联合检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;双荧光素酶报告实验检测细胞荧光活性;Western blot检测FSCN1蛋白表达。结果与NC组相比较,大黄酸处理后可抑制SGC-7901细胞增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡;过表达miR-29c-3p可抑制细胞增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡;抑制miR-29c-3p表达可逆转大黄酸对SGC-7901细胞增殖、迁移、侵袭的抑制和细胞凋亡促进作用。miR-29c-3p可靶向作用于FSCN1。结论大黄酸可抑制人胃癌细胞(SGC-7901)增殖、迁移、侵袭,促进细胞凋亡,其机制可能与miR-29c-3p/FSCN1有关,为大黄酸用于治疗胃癌提供一定的科学依据。     

HPLC法测定八正合剂中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素和大黄酚

目的:建立高效液相色谱法同时测定八正合剂中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素和大黄酚的含量。方法:采用Lu-na-C18(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸(80:20);流速:0.8 ml/min;检测波长:254 nm;柱温:35℃。结果:芦荟大黄素、大黄酸、大黄素和大黄酚的线性范围分别为0.032μg~0.324μg、0.039μg~0.387μg、0.0104μg~0.104μg和0.0103μg~0.103μg,相关系数均为0.9999;平均加样回收率分别为98.3%、98.7%、97.7%和97.2%;RSD分别为0.9%、0.8%、1.0%和1.1%(n=6)。结论:本法专属性好,准确度、重现性好,可作为制剂的定量分析方法。     

Rhein attenuates renal inflammatory injury of uric acid nephropathy via lincRNA-Cox2/miR-150-5p/STAT1 axis

Rhein has protective effect on uric acid nephropathy (UAN). This article aims to demystify the mechanism of function of rhein in UAN. Mouse kidney epithelial cell line (TCMK-1) was incubated with uric acid (UA) to induce inflammatory injury. Then, the TCMK-1 cells were treated with rhein. The relationships among lincRNA-Cox2, miR-150-5p and STAT1 were evaluated by luciferase reporter assay. CCK8 and flow cytometry were performed to detect cell proliferation and apoptosis. The levels of IL-6, IL-1β and TNF-α were investigated by enzyme linked immunosorbent assay. Western blot and quantitative real-time PCR were performed to examine the expression of genes and proteins. We found that UA suppressed proliferation and enhanced apoptosis and the levels of IL-6, IL-1β and TNF-α of TCMK-1 cells, which was effectively improved by rhein treatment. Furthermore, lincRNA-Cox2 overexpression caused an increase of apoptosis and inflammatory factors in the rhein-treated TCMK-1 cells. LincRNA-Cox2 regulated STAT1 expression by sponging miR-150-5p. And lincRNA-Cox2 promoted apoptosis and inflammatory injury of TCMK-1 cells by regulating miR-150-5p/STAT1 axis. In summary, our studies demonstrate that rhein has a protective effect against UAN by inhibiting renal inflammatory injury via lincRNA-Cox2/miR-150-5p/STAT1 axis.     

RP-HPLC法测定三黄散瘀巴布剂中5种蒽醌类成分的含量

目的:建立三黄散瘀巴布剂中芦荟大黄素,大黄酸,大黄素,大黄酚,大黄素甲醚的RP-HPLC含量测定方法。方法:反相高效液相色谱法。色谱柱:Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm);柱温25℃;流动相:甲醇-0.1%磷酸;流速:1.0 mL·min-1;检测波长:254 nm;进样量:10μL。结果:芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚分别在21.45²14.5 ng、15.68214.5 ng、15.68¹56.8 ng、18.77156.8 ng、18.77¹87.7 ng、37.40187.7 ng、37.40³74.0ng、11.05374.0ng、11.05⁸8.42 ng范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.82%(RSD 2.6%)、100.5%(RSD1.1%)、101.3%(RSD 1.5%)、101.5%(RSD 2.4%)、97.07%(RSD 0.80%)结论:本法稳定、可靠、操作简便、快速、重现性好,可用于三黄散瘀巴布剂的质量控制。     

小承气汤中大黄酸在大鼠体内的药动学研究

目的 研究小承气汤中大黄与厚朴、枳实配伍对大黄酸在大鼠体内药动学过程的影响.方法 大鼠分别给予大黄及小承气汤,高效液相色谱法测定大黄酸在大鼠体内血药浓度变化.色谱柱为Diomansil C18(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(77∶22∶1);检测波长为428 nm;流速为1.0 mL/min.血药浓度数据采用3P97药动学软件进行分析.结果大黄酸血药浓度在1.0～15 μg/mL范围内线性关系良好.大鼠给予大黄及小承气汤后,大黄酸血药浓度-时间曲线均符合二房室模型,其主要药动学参数AUC、Cmax和CL均存在显著性差异(P＜0.05).结论 大黄与厚朴、枳实配伍后,使大黄酸在大鼠体内的血药浓度降低.     

不同炮制方法对大黄中5种蒽醌类化合物含量的影响

目的：观察不同炮制方法对大黄中5种蒽醌类成分的影响,建立大黄炮制品的质量控制方法.方法：采用色谱柱为Shimadzu C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱进行测定.结果：大黄酸,大黄素、大黄粉,芦荟大黄素,大黄素甲醚加样回收率分别为98.9%（RSD=1.61%）,97.5%（RSD=1.12%）,100.6%（RSD=1.08%）,102.3%（RSD=1.78%）,101.2%（RSD=2.11%）.结论：本方法操作简单、准确,重现性好,适用于大黄饮片内在质量的评价和控制.     

大黄酸及其酯化衍生物在大鼠体内的药代动力学研究

目的：研究大黄酸羧基酯化对其在大鼠体内药动行为的影响。方法：采用大黄酸甲酯和大黄酸乙酯作为模型药, 大黄酸作为阳性对照, 对大鼠单次灌胃70 mg·kg-1或者单次静注 0.7 mg·kg-1, HPLC 荧光同时监测大鼠血浆中三种分析物的血浓经时变化。结果：大黄酸甲酯和大黄酸乙酯灌胃和静注给予大鼠后, 血浆中均测不到酯类原型, 但能测到一定量的大黄酸。将甲酯和乙酯衍生物灌胃后在大鼠血浆中所测得的大黄酸成分的经时变化与直接灌胃大黄酸后大鼠血浆中大黄酸成分的经时过程相比较, 其主要的药动参数分别为：cmax （0.058 ± 0.035）、（0.95 ± 0.090）、（42.66 ± 14.41） mg·L-1 Tmax （6.7 ± 2.3）、（10.7 ± 2.3）、（0.9 ± 0.1） h t1/2β （6.0 ± 1.7）、（6.4 ± 1.0）、（3.2 ± 0.6） h AUC0-∞ （1.03 ± 0.76）、（12.79 ± 0.96）、（80.28 ± 13.59） h·mg·L-1。结论：羧基酯化降低了大黄酸在大鼠体内的有效暴露剂量, 提示此类衍生物不适于作为大黄酸的前体药物进行开发。     

高效液相色谱法测定新肾炎胶囊中蒽醌类化合物的含量*

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定新肾炎胶囊中蒽醌类化合物大黄酸、大黄素、大黄酚的含量。方法采用Phenomenex C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以甲醇-1%醋酸(70:30)为流动相,检测波长254 nm,柱温25 ℃;流速 1 mL·min-1。结果大黄酸、大黄素、大黄酚检测浓度分别在4.96～24.80 μg·mL-1 (r＝0.999 6)、6.58～32.91 μg·mL-1(r＝0.999 9)、15.11～75.55 μg·mL-1(r＝0.999 9)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为100.78%,98.13%,99.29%。结论制剂制备工艺稳定,建立的含量测定方法简便、可靠,可用于制定主要治疗成分大黄素、大黄酚的含量下限以及非主要治疗成分大黄酸的含量上限,进一步保障制剂安全。     

中药大黄的生化学研究.ⅩⅩⅥ.大黄蒽醌衍生物对小鼠肝微粒体细胞色素P-450的影响

小鼠连续7d分别ip大黄素、大黄酸和芦荟大黄素42,47,44mg/kg后,使肝微粒体细胞色素F-450含量分别比对照组下降41.7,51.9,66.3%,使戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间分别比对照组延长18.7,81.8,64.3%。大黄素、大黄酸、芦荟大黄素、大黄酚和大黄素甲醚结合于氧化态细胞色素P-450的差示光谱均为Ⅱ型光谱。上述结果表明:大黄蒽醌衍生物是一类细胞色素P-450抑制剂,可能减缓NADPH对细胞色素P-450的还原作用,影响肝脏药物氧化代谢功能。