金铁锁基于NF-κB信号通路的体外抗炎作用机制研究*

目的 金铁锁具有较好的抗炎镇痛的药理作用，但对金铁锁的抗炎作用及机制尚不明确。本研究旨在通过LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型对金铁锁进行抗炎作用及机制研究。方法 采用LPS诱导RAW264.7细胞炎症模型，在给予金铁锁三萜类化合物干预后，采用ELISE试剂盒检测细胞上清液中NO、PGE2的水平，PCR检测细胞中COX-2，iNOS，IL-6，TNF-αmRNA的表达，用western blot分别检测细胞总蛋白、细胞质及细胞核内NF-κB信号通路相关蛋白（IKKβ、photo-IκBα、NF-κBp65、photo-NF-κBp65）的表达情况，考察金铁锁三萜类化合物的抗炎作用机制。结果 金铁锁能明显降低RAW264.7细胞活化后细胞上清液中NO和PGE2的水平，对细胞上清液中NO和PGE2的水平无明显影响，能明显降低对RAW264.7细胞活化后COX-2、iNOS mRNA的表达水平；金铁锁能明显抑制IKKβ的活化，抑制p-IκBα蛋白的降解，同时也能降低总蛋白中p-NF-κB p65的表达量，从而抑制细胞质内NF-κB p65向核内的转移。结论 金铁锁具有良好的抗炎镇痛作用，能够抑制炎症介质的释放及酶的基因表达，改善炎症部位的病变情况，其抗炎机制与抑制NF-κB信号通路的激活有关。     

Knockout of Sirt2 alleviates traumatic brain injury in mice

Sirtuin 2(SIRT2) inhibition or Sirt2 knocko ut in animal models protects against the development of neurodegenerative diseases and cerebral ischemia.However,the role of SIRT2 in traumatic brain injury(TBI) remains unclear.In this study,we found that knockout of Sirt2 in a mouse model of TBI reduced brain edema,attenuated dis ruption of the blood-brain barrie r,decreased expression of the nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3(NLRP3)inflammasome,reduced the activity of ...     

3D打印可拆卸垂体瘤切除模型的真实性评估

目的探究可拆卸经鼻垂体腺瘤切除操作模型的真实性,并初步探讨了模型的教学性。方法利用患者CT建模、精细优化及3D打印技术构建可拆卸垂体腺瘤切除模型。评估者为19名来自北京协和医院的本院及进修医师,其中年资<10分入"低年资组";年资≥10分入"高年资组"。每位医师分别对3D打印垂体腺瘤切除模型进行操作,并于操作前后分别填写调查问卷、评估量表。结果高年资组的探查经验均高于低年资组。真实度项目的得分均在4附近,各评分项间无明显差异;"切除垂体腺瘤"步骤的真实性评分相对较低;高年资组评分普遍低于低年资组。操作前低年资组信心评分显著低于高年资组,操作后两组评分趋于一致;低年资组的垂体腺瘤切除信心评分变化显著高于高年资组(P<0.05)。结论该模型具有较高的真实性,可用于教学试验进一步评估教学效果。     

槲皮素通过抑制氧化应激改善3×Tg-AD小鼠的认知功能障碍＊

目的 探讨槲皮素（Quercetin，QT）对含有3个突变等位基因（PS1、APP、Tau）的纯合子小鼠（3×Tg-AD）的认知功能改善作用及其机制。方法 通过基因鉴定确定小鼠的基因型，将9月龄的3×Tg-AD小鼠和其同窝野生对照小鼠随机分为4组：野生型组（wildtype，WT）、野生型 + QT组（WT + QT）、模型组（3×Tg-AD）和模型小鼠 + QT组（3×Tg-AD + QT），每组8只。WT + QT组和3×Tg-AD + QT组的小鼠灌胃给予QT 15 mg/kg/天，WT组和3×Tg-AD组的小鼠灌胃给予等体积溶剂，共治疗8周。第7周进行水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力。采用ELISA法检测小鼠脑组织中的肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α）、白介素-1β（interleukin-1β）和小鼠血清中谷胱甘肽-过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）的含量；试剂盒检测小鼠血清中丙二醛（malondialdehyde，MDA）和总超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）的含量以及脑组织中一氧化氮（nitric oxide，NO）的含量；Western blot检测脑组织中核转录因子E2相关因子2和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1的表达水平。结果 3×Tg-AD组小鼠存在明显的认知功能障碍；而3×Tg-AD + QT组小鼠的学习记忆能力明显提高（P < 0.05）。另外，3×Tg-AD组血清中MDA水平较WT组升高，SOD与GSH-Px水平较WT组下降；3×Tg-AD + QT组小鼠血清中MDA水平下降，SOD和GSH-Px水平则升高。3×Tg-AD组小鼠脑组织中的NO、TNF-α、IL-1β水平明显升高；3×Tg-AD + QT组小鼠脑组织中的炎症因子水平均明显降低（P < 0.05）。3×Tg-AD组小鼠脑组织中的Nrf2表达降低，Keap1表达升高；3×Tg-AD + QT组中，Nrf2表达上调，Keap1表达下调（P < 0.05）。结论 QT可能通过抑制炎症因子和MDA，Keap1的水平，上调SOD，GSH-Px，Nrf2的表达，发挥改善3×Tg-AD小鼠学习记忆能力的作用。     

TGF-β、PD-L1及PI3K蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义北大核心

目的:检测胃癌组织中TGF-β、PD-L1及PI3K的表达情况,并探讨TGF-β、PD-L1及PI3K表达的临床意义。方法:收集2017年01月至2018年01月我院74例接受过胃癌根治术且组织学证实为胃腺癌患者的病例蜡块标本。采用免疫组织化学法检测其中TGF-β、PD-L1以及PI3K的表达情况,分析其与临床病理参数之间的关系及三者在胃癌组织中表达的相关性,并分析其与胃癌患者预后生存之间的关系。结果:胃癌组织中TGF-β、PD-L1、PI3K阳性率高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.05);胃癌组织中TGF-β的表达与淋巴结转移、临床TNM分期有关(P<0.05),与年龄、性别、分化程度、浸润程度、肿瘤直径无显著相关性(P>0.05);胃癌组织中PD-L1和PI3K的表达与肿瘤浸润程度、淋巴结转移、临床TNM分期有关(P<0.05),与年龄、性别、分化程度、肿瘤直径无显著相关性(P>0.05);在胃癌组织中,TGF-β与PD-L1的表达呈正相关(P<0.05),TGF-β与PI3K的表达呈正相关(P<0.05),PI3K与PD-L1的表达呈正相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析提示,与TGF-β、PD-L1、PI3K阴性相比,TGF-β、PD-L1、PI3K阳性表达的患者总生存期明显缩短(P<0.05)。结论:胃癌组织中存在TGF-β、PD-L1以及PI3K的高表达,并且TGF-β、PD-L1、PI3K的表达与淋巴结转移、临床TNM分期密切相关,三者可能参与胃癌的发生、发展和转移,且高表达患者的预后情况较差。     

Knockdown of DEAD-box 51 inhibits tumor growth of esophageal squamous cell carcinoma via the PI3K/AKT pathway

BACKGROUND Esophageal squamous cell carcinoma(ESCC)is one of the most prevalent malignancies that seriously threaten people’s health worldwide.DEAD-box helicase 51(DDX51)is a member of the DEAD-box(DDX)RNA helicase family,and drives or inhibits tumor progression in multiple cancer types.AIM To determine whether DDX51 affects the biological behavior of ESCC.METHODS The expression of DDX51 in ESCC tumor tissues and adjacent normal tissues was detected by Immunohistochemistry(IHC)analyses and quantitative PCR(qPCR).We knocked down DDX51 in ESCC cell lines by using a small interfering RNA(siRNA)transfection.The proliferation,apoptosis,and mobility of DDX51 siRNAtransfected cells were detected.The effect of DDX51 on the phosphoinositide 3-kinase(PI3K)/AKT pathway was investigated by western blot analysis.A mouse xenograft model was established to investigate the effects of DDX51 knockdown on ESCC tumor growth.RESULTS DDX51 exhibited high expression in ESCC tissues compared with normal tissues and represented a poor prognosis in patients with ESCC.Knockdown of DDX51 induced inhibition of ESCC cell proliferation and promoted apoptosis.Moreover,DDX51 siRNA-expressing cells also exhibited lower migration and invasion rates.Investigations into the underlying mechanisms suggested that DDX51 knock down induced inactivation of the PI3K/AKT pathway,including decreased phosphorylation levels of phosphate and tensin homolog,PI3K,AKT,and mammalian target of rapamycin.Rescue experiments demonstrated that the AKT activator insulin-like growth factor 1 could reverse the inhibitory effects of DDX51 on ESCC malignant development.Finally,we injected DDX51 siRNA-transfected TE-1 cells into an animal model,which resulted in slower tumor growth.CONCLUSION Our study suggests for the first time that DDX51 promotes cancer cell proliferation by regulating the PI3K/AKT pathway;thus,DDX51 might be a therapeutic target for ESCC.     

口腔鳞状细胞癌耐药相关信号通路的研究进展

口腔鳞状细胞癌是临床常见的恶性肿瘤之一，化疗是治疗口腔鳞癌的主要手段，然而，肿瘤耐药的产生极大限制了化疗效果。研究发现某些信号通路异常激活介导口腔鳞癌耐药，因此，为了更好的理解肿瘤耐药机制以及为临床治疗口腔癌提供新的策略，本文对口腔鳞癌耐药相关的信号通路展开综述。     

健脾消癌方通过PI3K/Akt信号通路抑制结肠癌血管生成的研究＊

目的 观察结肠癌HCT116细胞健脾消癌方的条件培养液对HUVEC细胞管腔形成的影响，从PI3K/Akt生物轴调控角度探讨其作用机制。方法 培养HCT116细胞，细胞设3组：对照组，健脾消癌方组（加入15%健脾消癌方含药血清）及人参皂苷Rg3组；制备HCT116细胞健脾消癌方条件培养液（分组及制备方法见实验方法），用条件培养液干预HUVEC（脐静脉内皮细胞，Human Umbilical Vein Endothelial Cells），Matrigel基质胶法检测HCT116细胞健脾消癌方条件培养液对HUVEC小管形成的影响。随后采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组HCT116细胞磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（Akt）、p-Akt、VEGF（血管内皮生长因子，Vascular endothelial growth factor）蛋白表达。最后在结肠癌HCT116荷瘤小鼠中验证健脾消癌方对肿瘤生长速度的影响，并经瘤组织VEGF蛋白表达、CD31免疫组化染色检测肿瘤内血管生成情况。结果 模型组HUVEC细胞管腔形成较空白血清组显著增加（P<0.05）；健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组较模型组HUVEC细胞管腔形成显著减少（P<0.01）。p-Akt和VEGF蛋白表达水平模型组高于空白血清组（P<0.05），健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组显著低于模型组（P<0.01）；PI3K、Akt蛋白表达量组间差异无统计学意义。与对照组比较，模型组荷瘤小鼠肿瘤体积显著性增大，瘤组织内VEGF表达、CD31阳性面积显著性增加，差异有统计学意义（P<0.05）；与模型组比较，健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组荷瘤小鼠肿瘤体积显著减小，瘤组织内VEGF表达、CD31阳性面积降低，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 健脾消癌方可抑制肿瘤的血管生成和生长，其作用机制可能与PI3K/Akt生物轴调控VEGF表达有关。     

千金藤素通过PI3K-AKT信号通路抑制前列腺癌细胞DU145增殖、侵袭和迁移北大核心CSCD

目的:探讨千金藤素(CEP)对前列腺癌细胞株DU145增殖、侵袭和迁移的影响及作用机制。方法:CCK-8测定药物浓度对细胞增殖的影响,细胞免疫荧光测定上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白荧光强度,迁移实验及划痕实验测定细胞转移能力,Western blot检测EMT相关蛋白及PI3K-AKT信号通路蛋白表达。结果:CEP≥10μmol/L时,可抑制DU145细胞增殖(P<0.05),Vimentin和Snail表达下降,E-cadherin表达增加(P<0.05),Vimentin荧光强度减弱,E-cadherin荧光强度增强(P<0.05),细胞侵袭迁移能力均被抑制(P<0.05),p-PI3K及p-AKT蛋白表达降低(P<0.05)。结论:CEP可能通过PI3K-AKT信号通路抑制前列腺癌细胞DU145增殖、侵袭和迁移。