右归丸经IL-6/STAT3信号通路对膝骨关节炎模型大鼠软骨组织退变的调控机制

目的:观察右归丸对膝骨关节炎(KOA)模型鼠软骨组织信号转导和转录激活因子3(STAT3)和白细胞介素-6(IL-6)表达水平的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、硫酸氨基葡萄糖组、右归丸高、中、低剂量组,每组10只。采用改良Hulth法制备大鼠KOA模型,假手术组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,右归丸高、中、低剂量组分别给予右归丸4.8,2.4,1.2 g·kg^-1灌胃,硫酸氨基葡萄糖组给予硫酸氨基葡萄糖0.17 g·kg^-1灌胃,连续给药8周。干预结束24 h后股动脉采血处死各组大鼠,取鼠膝关节软骨,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组软骨的病理改变,并进行Mankin评分;免疫组化法检测各组关节软骨组织中STAT3,超氧化物歧化酶3(SOD3)和Wnt抑制因子1(WIF1)的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测软骨组织中IL-6 mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组关节软骨组中WIF1蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠软骨组织Makin评分明显升高,软骨组织STAT3在蛋白水平上的表达明显增加和IL-6 mRNA水平上的表达显著增加,WIF1在蛋白水平上的表达显著降低(P<0.01);模型组关节软骨边缘严重破坏,软骨细胞排列紊乱。与模型组比较,右归丸高剂量干预组大鼠软骨组织Makin评分,STAT3的在蛋白水平上的表达明显降低,右归丸各干预组IL-6 mRNA水平上的表达显著降低,WIF1在蛋白水平上的表达显著增加(P<0.05,P<0.01),软骨结构趋于正常,软骨细胞分布仅偶见不均,关节软骨表面欠光滑。结论:右归丸能显著改善KOA大鼠的关节软骨退变,抑制KOA中软骨组织的炎症反应,这可能与其抑制STAT3和IL-6的表达有关。     

基于16S rDNA测序的肠道菌群探讨解郁祛痰化浊方对高脂饮食大鼠肠-肝轴的影响

目的 研究解郁祛痰化浊方（JQHP）对高脂饮食大鼠肠道菌群的影响，探讨中药调控肠道微生物群进而恢复肠-肝轴的平衡。方法 将70只雄性SPF级别Wistar大鼠随机分为正常组（10只）与模型组（60只），正常组饲喂正常饲料，模型组饲喂高脂饲料。12周后将模型组随机分为6组，每组10只，即模型组，血脂康组，立普妥组，JQHP低、中、高剂量组。JQHP低、中、高剂量组分别灌胃JQHP颗粒剂0.4，0.8，1.6 g·kg^-1，立普妥组予立普妥2 mg·kg^-1，血脂康组予血脂康0.1 g·kg^-1，正常组和模型组大鼠灌胃同等量蒸馏水，连续灌胃8周后收集粪便，进行16S rRNA基因测序，行腹主动脉取血检测血脂，取肝脏组织及回肠组织苏木素-伊红（HE）染色后进行病理形态学观察。结果 与正常组比较，模型组大鼠血脂四项总胆固醇（TC），甘油三酯（TG），低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）均见明显升高，高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）降低（P<0.01）；与模型组比较，血脂康组、立普妥组TC，TG显著性下降（P<0.01），血脂康组HDL-C升高（P<0.05）。JQHP中剂量组较模型组对肝脏脂肪样变有一定的缓解作用，可以减轻炎性细胞的浸润情况。JQHP可使回肠结构淋巴组织增生情况好转，且中剂量组疗效最显著。Shannon曲线结果表明，与正常组比较，JQHP中剂量组显著提高（P<0.01）；与模型组比较，JQHP中、高剂量组明显升高（P<0.05，P<0.01）；与JQHP中剂量组比较，其他用药组降低（P<0.05，P<0.01）。主成分多样性分析（PCA）示中药中剂量组多样性和丰度高于其他用药组。线性判别分析（LDA）中，与正常组比较，模型组拟杆菌纲，瘤胃球菌科，拟杆菌S24-7，瘤胃球菌UCG-005下调（P<0.01），脱硫弧菌目、丹毒丝菌目、毛螺菌科上调（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，JQHP中剂量组的拟杆菌纲，瘤胃球菌科，拟杆菌S24-7，瘤胃球菌UCG-005上调（P<0.05，P<0.01），丹毒丝菌目下调（P<0.01）。与JQHP中剂量组比较，其他用药组拟杆菌纲，瘤胃球菌科，拟杆菌S24-7，瘤胃球菌UCG-005中降低（P<0.05，P<0.01），在丹毒丝菌目、毛螺菌科中升高（P<0.05，P<0.01）。结论 JQHP调整肠道物种丰度和多样性，改善肝脏组织和回肠黏膜状态，调节血脂水平，恢复正常肠道生态环境，可能与调节与炎症相关的肠道菌群而恢复肠-肝轴平衡有关，以中剂量组效果最佳。     

Early life Adversity,functional connectivity and cognitive performance in Schizophrenia: The mediating role of IL-6

ObjectiveExposure to childhood trauma (CT) is associated with cognitive impairment in schizophrenia, and deficits in social cognition in particular. Here, we sought to test whether IL-6 mediated the association between CT and social cognition both directly, and sequentially via altered default mode network (DMN) connectivity.MethodsThree-hundred-and-eleven participants (104 patients and 207 healthy participants) were included, with MRI data acquired in a subset of n = 147. CT was measured using the childhood trauma questionnaire (CTQ). IL-6 was measured in both plasma and in toll like receptor (TLR) stimulated whole blood. The CANTAB emotion recognition task (ERT) was administered to assess social cognition, and cortical connectivity was assessed based on resting DMN connectivity.ResultsHigher IL-6 levels, measured both in plasma and in toll-like receptor (TLR-2) stimulated blood, were significantly correlated with higher CTQ scores and lower cognitive and social cognitive function. Plasma IL-6 was further observed to partly mediate the association between higher CT scores and lower emotion recognition performance (CTQ total: β_indirect −0.0234, 95% CI: −0.0573 to −0.0074; CTQ physical neglect: β_indirect = −0.0316, 95% CI: −0.0741 to −0.0049). Finally, sequential mediation was observed between plasma IL-6 levels and DMN connectivity in mediating the effects of higher CTQ on lower social cognitive function (β_indirect = −0.0618, 95% CI: −0.1523 to −0.285).ConclusionThis work suggests that previous associations between CT and social cognition may be partly mediated via an increased inflammatory response. IL-6′s association with changes in DMN activity further suggest at least one cortical network via which CT related effects on cognition may be transmitted.     

Comprehensive analysis of gene expression of isolated pancreatic islets during pretransplant culture

Background: The aim of this study was to investigate the effect of pretransplant culture on the survival of pancreatic islet grafts, and to determine the biological characteristics of isolated islets during pretransplant culture. Methods: The survival of islets from Wistar rats, transplanted to diabetic C57BL/B6 mice, was compared between fresh islets and cultured islets. A comprehensive gene expression analysis was employed to investigate biological processes during pretransplant culture, and in vitro validation studies were performed. Results: Survival of cultured xenografts was significantly prolonged as compared to that of fresh islets (fresh: 12.5 ± 1.9 days, 1-day cultured: 16.0 ± 1.3 days (p= 0.017), 3-day cultured: 17.0 ± 2.6 days (p= 0.014)). Comprehensive gene expression analysis identified significant upregulation of annotated functions associated with inflammation in cultured groups. Six proinflammatory genes, including heme oxygenase 1 (HO-1) and IL-6, were significantly upregulated during culture. Validation studies revealed significantly higher levels of IL-6 in the supernatant of cultured islets and HO-1 in the cultured islets when compared with fresh islets. Conclusion: Transplantation of cultured islets induced significant but minimal prolongation of graft survival in xenogeneic combinations. Comprehensive analysis of gene expression in cultured islets showed biological processes associated with proinflammation during culture.     

化浊清解愈溃煎对溃疡性结肠炎大鼠p38MAPK、TNF-α、IL-4的影响

目的观察化浊清解愈溃煎对溃疡性结肠炎(UC)大鼠血清及结肠组织p38MAPK、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)含量的影响。方法清洁级Wistar雄性大鼠50只按随机数字表法分为两组,空白组8只,其余大鼠均为造模组。采用TNBS/乙醇联合造模法构建UC大鼠模型。造模成功后按照随机数字表法将模型大鼠分为模型组、西药组(予美沙拉嗪肠溶片混悬液0.42 g/kg)及中药高、中、低剂量组。中药高、中、低剂量组予化浊清解愈溃煎中药混悬液,剂量分别为22、11、5.5 g/(kg·d),每日灌胃1次,疗程14 d。采用免疫组化法检测各组大鼠结肠组织内p38MAPK的蛋白表达量。ELISA法检测各组大鼠血清内TNF-α、IL-4含量。结果与空白组比较,模型组一般情况较差,血清中TNF-α含量显著升高(P<0.05),IL-4含量则明显降低(P<0.05),结肠组织中p38MAPK水平明显升高(P<0.05)。与模型组比较,西药组、中药各剂量组大鼠一般生存状况改善明显,血清中TNF-α含量下降,IL-4含量明显升高,尤以中药高剂量组和西药组疗效显著(P<0.05)。结论化浊清解愈溃煎高、中剂量可改善UC大鼠一般生存状况,并通过调节血清中IL-4含量,下调TNF-α表达水平和结肠组织中p38MAPK蛋白表达水平而达到保护结肠黏膜和治疗UC的作用。     

早期宫颈癌组织中ATG-12表达与HPV16-E6/E7-DNA病毒载量及预后的关系

目的探讨早期宫颈癌组织中自噬相关蛋白-12(ATG-12)与人乳头瘤病毒(HPV)16-E6/E7-DNA病毒载量及预后的关系。方法选取2015年1月至2017年12月期间在安徽皖北煤电集团总医院保存的宫颈活检或手术切除宫颈组织203例,包括30例慢性宫颈炎、18例宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ、23例CINⅡ、26例CINⅢ和106例早期(ⅠA2~ⅡB期)宫颈鳞状上皮癌(CSCC)。采用巢式多重聚合酶链式反应(NM-PCR)和免疫组化染色SP法检测组织中HPV 16-E6/E7-DNA病毒载量和ATG-12蛋白表达。分析ATG-12蛋白表达与早期CSCC临床病理特征的关系。随访CSCC患者无瘤生存时间(DFS)。采用Cox风险比例回归模型分析影响CSCC预后的因素。结果CSCC组织ATG-12蛋白阳性表达率为26.42%(28/106),低于慢性宫颈炎和CIN组织(P<0.05)。ATG-12蛋白表达与HPV16-E6/E7-DNA病毒载量呈负相关(r=-0.306,P=0.001;r=-0.436,P=0.001)。ATG-12蛋白表达与FIGO分期、间质浸润、淋巴脉管间隙浸润、淋巴结转移有关(P<0.05)。随访11~64个月,ATG-12蛋白阳性表达患者5年无瘤生存率为78.57%(22/28),ATG-12蛋白表达阴性患者5年无瘤生存率为60.26%(47/78)。多因素Cox风险回归模型结果显示,HPV16-E6/E7-DNA病毒载量和ATG-12蛋白表达是影响患者DFS的独立预后因素(P<0.05)。结论早期宫颈鳞状上皮癌组织中ATG-12阳性表达率低,与HPV16-E6/E7-DNA病毒载量呈负相关,有望成为评估HPV阳性早期宫颈癌患者预后的重要指标。     

健脾益气法对结直肠炎病变后诱发结直肠癌小鼠的影响研究

目的:观察健脾益气中药对结直肠炎病变后诱发结直肠癌小鼠白细胞介素(Interleukin,IL)-6和表皮细胞生长因子(Epidermal Growth Factor,EGF)蛋白的影响。方法:将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。采用偶氮氧化甲烷/葡聚糖硫酸钠方法建立结直肠炎相关结直肠癌小鼠模型,治疗组以加减四君子汤颗粒加蒸馏水配成溶液,药物质量浓度19.92%,3.32 g/kg灌胃,模型组以蒸馏水灌胃。4周后处死各组小鼠并留取血液和结直肠组织组织标本,酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent method,ELISA)法检测血清IL-6浓度,苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin Staining,简称HE染色法)染色镜下观察小鼠结肠组织病理变化,Western-blot法检测EGF蛋白表达。结果:健脾益气治疗组小鼠的体质量较模型组明显增加,差异有统计学意义(P<0.01);治疗组小鼠血清IL-6表达量比模型组显著下降,差异有统计学意义(P<0.01);治疗组小鼠的EGF蛋白表达显著降低,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:健脾益气中药能增加结直肠炎病变后诱发结直肠癌小鼠的体质量,减少炎症因子IL-6的表达和降低EGF蛋白表达,可为健脾益气中药抗结肠癌临床应用提供科学依据。     

溃疡性结肠炎薄白苔和黄腻苔患者的肠道菌群特征分析

  目的：通过分析溃疡性结肠炎(UC)薄白苔、黄腻苔患者的肠道菌群特征,探讨UC患者舌苔与肠道菌群之间的关系。  方法：选取UC薄白苔患者、UC黄腻苔患者、健康对照者各35例,分别设为UC薄白苔组、UC黄腻苔组、健康对照组。收集粪便标本,采用16S rDNA基因测序分析技术和生物信息学方法分析比较各组肠道菌群的多样性和丰度。  结果：①与健康对照组比较,UC薄白苔、黄腻苔组患者肠道菌群物种的丰富度和多样性降低(P＜0.001),肠道菌群物种数量减少；与UC薄白苔组比较,UC黄腻苔组患者肠道菌群丰富度差异无统计学意义(P＞0.05),但肠道菌群物种数量减少。②门水平差异分析:与健康对照组比较,UC薄白苔、黄腻苔组患者肠道菌群中厚壁菌门(Firmicutes)减少(P＜0.05)；与UC薄白苔组比较,UC黄腻苔组患者肠道菌群中蓝细菌门(Cyanobacteria)增多(P＜0.05)。③属水平差异分析:与健康对照组比较,UC薄白苔组患者肠道菌群中埃希氏-志贺氏菌属(Escherichia-Shigella)、链球菌属(Streptococcus)等增多(P＜0.05),罕见小球菌属(Subdoligranulum)、多尔氏菌属(Dorea)、瘤胃球菌属(Ruminococcus)、罗氏菌属(Roseburia)等减少(P＜0.05)；UC黄腻苔组患者肠道菌群中埃希氏-志贺氏菌属(Escherichia-Shigella)、乳杆菌属(Lactobacillus)等增多(P＜0.05),多尔氏菌属(Dorea)、罕见小球菌属(Subdoligranulum)、瘤胃球菌属(Ruminococcus)、考拉杆菌属(Phascolarctobacterium)、罗氏菌属(Roseburia)等减少(P＜0.05)。与UC薄白苔组比较,UC黄腻苔组患者肠道菌群链球菌(Streptococcus)增多(P＜0.05),巨球型菌属(Megasphaera)、拟普氏菌属(Alloprevotella)、普氏菌属(Prevotella)、奈瑟氏菌属(Neisseria)等减少(P＜0.05)。④LDA判定(纲、目、科水平):UC薄白苔组患者肠道菌群中普氏菌科(f_Prevotellaceae)、奈瑟氏球菌目(o_Neisseriales)、奈瑟氏球菌科(f_Neisseriaceae)丰度显著多于UC黄腻苔组(LDA＞2.0),UC黄腻苔组患者肠道菌群中杆菌纲(c_Bacilli)、乳杆菌目(o_Lactobacillales)、链球菌科(f_Streptococcaceae)、消化链球菌科(f_Peptostreptococcaceae)丰度显著高于UC薄白苔组(LDA＞2.0)。  结论：UC薄白苔、黄腻苔患者肠道菌群丰富度和多样性均较健康者明显下降；UC薄白苔患者和UC黄腻苔患者在肠道菌群组成和细菌丰度上均存在差异,黄腻苔患者肠道致病性细菌增多而具有潜在保护作用的细菌减少；肠道菌群检测可以为舌诊现代化提供一定的信息。