锌和锰联合对二氧化硅致巨噬细胞某些生化指标变化的影响

目的:研究葡萄糖酸锌(ZnG)和氯化锰(MnCl2 )单独及联合对二氧化硅(SiO2 )致巨噬细胞某些生化指标变化的影响。方法:采用肺灌洗法获得肺泡巨噬细胞纯化后(1×10. 9/L)与SiO2 ,同时加入不同浓度的ZnG、MnCl2 以及ZnG MnCl2 共同培养18h后,分别检测巨噬细胞中的丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性。结果:ZnG和Mncl2 ,以及二者联合使用在体外可以降低SiO2 粉尘致巨噬细胞的NDA的含量以及细胞培养液中LDH的活性,提高SOD的活性,二者共同作用效果更明显,ZnG和MnCl2最佳组合剂量是ZnG(1. 5mg/L) MnCl2 (0 . 2 5mg/L)。结论:ZnG和MnCl2 以及二者联合应用在体外可拮抗SiO2 粉尘所致巨噬细胞的细胞毒性,降低MDA含量,提高SOD活性。     

基于THP-1细胞的皮肤致敏体外检测方法

目的建立基于人细胞系的替代皮肤致敏动物实验的体外检测方法(h-CLAT),并对化学品、日用化学产品和化妆品植物原料进行皮肤致敏性检测。方法体外培养人急性单核细胞白血病细胞(THP-1),不同浓度受试物与细胞共孵育24 h,通过流式细胞仪检测细胞表面标志物CD86和CD54活化的差异,并对11种已知皮肤致敏化学物质和9种未知样品进行皮肤致敏性预测。同时对未知样品进行豚鼠局部封闭涂皮法验证。结果使用h-CLAT方法准确区分了11种参考物质的皮肤致敏性,9种受试样品中,7种样品被判断为阴性皮肤致敏物质,2种植物提取物被确认为皮肤致敏疑似物质。9种样品的预测结果与动物实验一致。结论 h-CLAT体外检测方法可以代替部分动物测试,用于可溶性皮肤致敏物质的预测。     

烹调烟雾冷凝物对DNA完整性影响的研究

采用体外作用的方式探讨烹调烟雾致遗传损伤的机制。通过细胞毒性试验得出 :油烟冷凝物与大鼠肺Ⅱ型细胞生长抑制率之间存在剂量 -效应关系 (r=0 943,P <0 0 1) ,剂量在 2 0 μg ml及以上对细胞有明显毒性作用。在不产生细胞毒性作用的剂量范围内 ,单细胞凝胶电泳试验表明 :大鼠肺Ⅱ型细胞经油烟冷凝物染毒 2小时可引起细胞DNA链断裂 ,在 0～ 5 μg ml剂量范围内 ,损伤程度与剂量存在直线相关关系 (r=0 918,P <0 0 5 ) ;在 10 μg ml剂量下 ,DNA损伤已达最大程度。发生DNA损伤的细胞经修复培养 2小时后受损伤的DNA能被修复。油烟冷凝物对 30 μg小牛胸腺DNA交联试验显示 :在 5 0～ 80 0 μg剂量范围 ,DNA交联率与受试物间存在剂量 -效应关系 (r=0 96 3,P <0 0 1)。提示烹调烟雾冷凝物在较低作用剂量下就可导致大鼠肺Ⅱ型细胞DNA损伤 ,在一定剂量下可以导致DNA交联率的增加     

八氯二丙醚对大鼠的致畸性观察

目的：研究八氯二丙醚对胚胎是否具有致畸性。方法：采用传统致畸试验方法。结果：八氯二丙醚在每１ｋｇ体重８０、３２０和１６００ｍｇ的染毒剂量条件下，没有发现明显的致畸作用。但是１６００ｍｇ／ｋｇ的剂量对孕鼠和胎鼠都有一定的毒性作用。该组胎鼠体重最小而胎盘最重最小而胎最重，低剂量组胎鼠的体重和身长均高于阴性对照组。经统计学检验差异均有显著性。结论：八氯二丙醚在本试验条件下没有发现明显的致畸作用。     

人参植物细胞粉对小鼠致突变作用的研究

人参自然生长周期长,栽培技术复杂且价格昂贵,中国药科大学中药学院成功地培养出人参植物细胞,并制成粉,扩大了人参的来源,提供了批量生产的可能。为了解人参植物细胞粉对人体是否有远期毒性作用,我们进行了小鼠骨髓染色体和睾丸染色体畸变试验。     

锌硒锰镁联合拮抗二氧化硅致肺泡巨噬细胞毒性的作用

[目的]观察葡萄糖酸锌（ZnG）、亚硒酸钠（Na2SeO3）、氯化锰（MnCl2）和硫酸镁（MgSO4）联合作用对二氧化硅（SiO2）致肺泡巨噬细胞（AM）中过氧化氢（H2O2）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）水平变化的影响，寻找4者的最佳剂量组合。[方法]采用大鼠肺灌洗法纯化获得AM（1×10^9个／mL），同时加入SiO2及不同浓度的ZnG＋Na2SeO3＋MnCl2＋MgSO4溶液组合，另设不加组合溶液的SiO2对照组和阴性对照组。37℃，5％CO2培养箱培养18h后，检测上述5种指标。[结果]与SiO2对照组比较，ZnG、Na2SeP3、MnCl2与MgSO4联合使用均可明显降低AM中H2O2、MDA含量，升高GSH—Px、SOD和CAT的活性（P〈0．01），且以1．5mg／L的ZnG、1．0μmol／L的Na2SeO3、1．0mg／L的MnCl2、和0．5μmol／L的MgSO4联合作用效果最好。极差分析结果表明，对GSH—Px、SOD的影响，Na2SeO3的作用强于ZnG、MnCl2和MgSO4；对H2O2、MDA的影响，ZnG的作用强干Na2SeO3、MnCl2与MgSO4；对CAT的影响，MnCl2、ZnG的作用则要强于Na2SeO3与MgSO4。[结论]ZnG、Na2SeO3、MnCl2与MgSO4联合应用可明显拮抗SiO2粉尘所致AM的氧化损伤。     

葡萄糖酸锌和氯化锰对二氧化硅致CHL细胞间隙连接通讯功能下调的影响

目的观察葡萄糖酸锌(ZnG)、氯化锰(MnCl2)及其联合作用对二氧化硅(SiO2)致中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)间隙连接通讯(GJIC)功能下调的影响,并寻找两者的最佳剂量组合。方法常规培养CHL细胞,按实验分组:生理盐水对照组(阴性对照组);SiO2组(100 mg/L);ZnG组(2.25 mg/L);MnCl2组(1.00 mg/L);SiO2 ZnG组(培养液除含100 mg/L SiO2外,分别含1.00,1.50,2.25 mg/L ZnG);SiO2 MnCl2组(培养液除含100 mg/L SiO2外,分别含0.25,0.50,1.00 mg/L MnCl2);ZnG和MnCl2联合作用组(每组除含SiO2100 mg/L外,采用两因素三水平正交设计,ZnG MnCl2共设9个浓度组)。培养6 h后通过划痕染料示踪技术(SLDT)观察成纤维细胞通讯连接功能。结果与SiO2组比较,ZnG和MnCl2在一定的浓度下可以减轻SiO2对中国仓鼠肺成纤维细胞通讯连接功能抑制作用(P<0.05);ZnG(1.50 mg/L)与MnCl2(0.50 mg/L)联合作用效果最好。结论ZnG,MnCl2及二者联合在体外可减轻SiO2粉尘对中国仓鼠肺成纤维细胞通讯连接功能的抑制作用。     

锌和硒拮抗二氧化硅致人胚肺成纤维细胞羟脯氨酸合成的实验研究

目的:观察葡萄糖酸锌(ZnG)和亚硒酸钠(Na2SeO3)对人胚肺成纤维细胞羟脯氨酸(Hyp)合成水平的单独以及联合拮抗作用.方法:用RAW264.7细胞和人胚肺成纤维细胞分别于37℃、5%CO2培养箱进行培养,RAW264.7细胞在细胞生长对数期时加入二氧化硅(SiO2),同时加入不同浓度ZnG、Na2SeO3的溶液,24 h后取RAW264.7细胞培养液与人胚肺成纤维细胞共同培养,作用48 h后测人胚肺成纤维细胞培养液中Hyp含量.结果:ZnG、Na2SeO3单独与联合作用均可以显著降低人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平(P＜0.05),其中以ZnG 2.25 mg/L和Na2SeO3 2.0 μmol/L浓度的单独与联合作用效果最明显.结论:一定剂量的ZnG、Na2SeO3对SiO2致人胚肺成纤维细胞Hyp合成水平具有单独以及联合拮抗作用.     

正己烷对小鼠脑组织抗氧化酶的影响

目的探讨正己烷对小鼠脑组织脂质过氧化作用。方法取昆明种健康成年小鼠32只,分为对照组和正己烷500 mg/kg体重、1 000 mg/kg体重、2 000 mg/kg体重3个剂量组,每组雌雄各半,灌胃染毒,每天1次,连续3 d。第3次染毒结束12 h后采用断头法处死小鼠,测定其脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的活性。结果随着正己烷的染毒剂量从500升至2 000 mg/kg体重,SOD和CAT活性先下降,随后升高;GSH-Px活性随正己烷染毒剂量增加而下降。结论正己烷可影响小鼠脑组织抗氧化酶的活性。     

化妆品眼刺激试验替代方法标准化与展望

眼刺激试验是化妆品安全评价的主要测试项目,目前正尝试建立代替传统动物实验的体外方法,这些方法处于研发、验证和认可的不同阶段.尽管还没有单一体外试验能完全替代兔眼实验,但系统分析替代方法建立的原理、科学相关性和标准化程度的不同,有助于合理选择运用体外方法指导化妆品眼刺激的标识分类、质量检验、产品开发和机制研究.