大鼠肾小球系膜细胞体外培养及鉴定的实验研究

目的:探索一种重复性好、传代次数多的大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)体外培养和鉴定的方法.方法:麻醉状态、无菌条件下取得大鼠的肾脏,用3种不同目数的不锈钢筛网提取肾小球,搜集到的肾小球分别加入2.5 g/L、0.5异/LⅣ型胶原酶及2 g/L Ⅱ型胶原酶各5 mL,分别在37 ℃水浴箱中振荡消化20 min、30 min、25min,然后接种肾小球,比较不同培养条件下肾小球系膜细胞的生长状况.结果:Ⅱ型、Ⅳ型胶原酶3种不同浓度作用不同的消化时间,细胞的生长速度及生长状况不同,Ⅳ型胶原酶(2.5 g/L)消化20 min的为最佳.结论:培养的细胞为肾小球系膜细胞,用Ⅳ型胶原酶(2.5 g/L)消化20 min的肾小球系膜细胞生长状态最佳.     

高效液相色谱法同时测定体内辛伐他汀和非诺贝特酸的含量

目的:建立双波长高效液相色谱法同时测定体内辛伐他汀和非诺贝特酸浓度的方法。方法:移取血清,加入环己烷-二氯甲烷(3∶1)混合溶液,沉淀蛋白后离心,上清液经氮气吹干,加流动相溶解后上机分析。采用Shimadzu VP-ODS分析柱(150mm×4.6mm),二极管阵列矩阵检测器,测定波长:辛伐他汀为238nm,非诺贝特酸为300nm,流动相:甲醇-水-10%磷酸(85∶14∶1),流速1.0mL.min-1,柱温为25℃。结果:辛伐他汀、非诺贝特酸分别在0.20~25mg.L-1(r=0.999 9)和0.05~25mg.L-1(r=0.999 9)范围内线性关系良好,最低检测分别为0.05mg.L-1和0.01mg.L-1。平均回收率分别为95.34%和91.80%,日内、日间精密度(RSD)均小于6.4%。结论:双波长高效液相色谱法同时测定体内辛伐他汀和非诺贝特酸浓度的定性定量方法简便快速、准确,适用于辛伐他汀和非诺贝特血药浓度的测定,以及合并用药后药动学、药效学和生物等效性方面的研究。     

定压和定容两种通气模式对儿童肺叶切除术中呼吸生理的影响

目的 观察定压和定容通气模式对儿童气管插管麻醉下行肺叶切除术中呼吸力学及动脉血气的影响.方法 选择40例ASAⅠ～Ⅱ级行择期肺叶切除术患儿,在知情同意下随机分为VCV组和PCV组各20例,麻醉诱导后行气管插管,VCV组先采用定容模式通气,潮气量为8～10 ml/kg,30 min后改为定压通气,压力设定根据定容通气时的气道平台压而定.PCV组先采用定压模式通气,压力设定以通气量达到满意为准,30 min后改为定容模式通气,潮气量根据定压时的潮气量而定.观察比较两组气道峰压、气道平台压、气道阻力、分钟通气量、呼气分钟通气量、呼吸末二氧化碳分压等及麻醉前、通气后30 min和60 min动脉血气变化情况.结果 两组气道峰压、气道平台压、气道阻力差异均无统计学意义（均P＞0.05）,与VCV组相比较,PCV组吸气分钟通气量、呼气分钟通气量均增加,且差异均有统计学意义（t=4.135、3.988,均P＜0.05）;血气分析显示,PCV组Pa02（176.1±56.9）mm Hg明显高于VCV组的（126.3±46.8）mm Hg（t=3.183,P＜0.05）,两组PaC02分别为（35.8±6.7）mm Hg、（36.5±6.9）mm Hg,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 儿童肺叶切除术中采用定压通气较定容通气模式更有利于防止通气造成的动脉血氧分压下降.     

丸剂中非法添加环丙沙星的快速检测方法研究

目的 建立一种丸剂中非法添加环丙沙星的快速检测方法。方法 通过¹⁹F-核磁共振定量（¹⁹F-qNMR）法对添加入当归苦参丸中的环丙沙星进行检测,以4,4’-二氟二苯甲酮为内标,以氘代DMSO为溶剂,采集δ-120.3处环丙沙星信号和δ-104.8处内标信号面积,计算环丙沙星的含量。结果 以环丙沙星和内标信号面积比为纵坐标,环丙沙星和内标质量比为横坐标,得到线性回归方程为：Y=3.384 1X+0.114 8,R²=0.992,环丙沙星在5～30 mmol/L具有良好的线性,检出限为7.798×10^-2 mg/mL,定量限为0.260 mg/mL。建立的¹⁹F-qNMR法精密度、重复性、稳定性、加样回收率均符合检测要求。结论 所建立的¹⁹F-qNMR法样品制备简单,检测时间短,灵敏度高,适合对丸剂中非法添加的环丙沙星进行含量测定。     

局部麻醉剂通过丝裂原活化蛋白激酶途径诱导人甲状腺癌细胞凋亡

目的探讨局部麻醉剂对人甲状腺癌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法MTT法检测人甲状腺癌细胞经0 mM、1 mM、2 mM、4 mM、8 mM和16 mM的利多卡因及0 mM、0.2 mM、0.4 mM、0.8 mM、1.6 mM和3.2 mM的布比卡因分别干预24 h和48 h后的细胞活力流式细胞仪检测经4 mM和8 mM的利多卡因和0.8 mM和1.6 mM的布比卡因干预48 h后癌细胞的凋亡及线粒体膜电位;Western Blot检测凋亡相关因子及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径相关蛋白的表达;分别采用SP600125(JNK抑制剂)、PD98059(MEK抑制剂)、SB203580(p38 MAPK抑制剂)联合利多卡因或布比卡因对细胞进行处理,Western Blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果利多卡因和布比卡因干预24 h和48 h均可呈剂量依赖式抑制人甲状腺癌细胞的生长。利多卡因和布比卡因干预48 h可降低癌细胞线粒体膜电位,增加Caspase-3和Bax的表达,降低Bcl-2的表达激活p38和JNK,抑制ERK的活性。MAPK信号通路抑制剂可降低利多卡因和布比卡因诱导Caspase-3和Bax的表达,增加Bcl-2的表达。结论局部麻醉剂利多卡因和布比卡因可诱导人甲状腺癌细胞生存抑制和凋亡,其机制与MAPK通路激活有关。     

囊性脑膜瘤一例

患者女,24岁。以左眼视力下降1年,右眼视力下降1周,发热、头痛10余天为主诉入院。神经外科体检:左眼外展不充分。头颅MRI平扫及增强扫描示鞍区及左侧中颅窝巨大团块状囊实性占位,囊性成分呈混杂T1、长T2信号,部分可见短T1信号,其内见多条线样分隔,病变大小约为54 mm×65 mm×52 mm(左右径×前后径×上下径)(图1、2)。增强扫描病变呈不规则环状强化,分隔亦见强化,囊     

异基因脐带间充质干细胞移植治疗类风湿关节炎疗效及安全性

目的探讨异基因脐带间充质干细胞（uhcMSC）移植治疗难治性类风湿关节炎（RA）的疗效及安全性。方法从足月顺产供者脐带中分离培养MSC,给予3例RA患者行MSCs移植治疗,移植细胞数（1×106/kg体重）。评价患者移植前后的临床表现和实验室检查指标的改变。结果异基因MSC移植后,3例RA患者随访9～11个月,所有患者均无移植相关并发症。移植后1月疾病活动评分（DAS-28）由5.13降低为2.16（n=3）,1例血液系统受累患者血细胞（中性粒细胞、红细胞、血小板）均上升。移植前后比较抗环瓜氨酸（CCP）抗体滴度降低。1例患者移植前后比较Th17细胞明显升高,Treg细胞降低。结论异基因脐带MSC移植治疗难治性RA有效、安全。uhcMSC取材方便,扩增迅速,输注安全经济。     

新生儿咽壁畸胎瘤麻醉处理一例

一．临床资料 患儿为出生2天女婴,体重3．35kg。喂水发现吞咽困难,呛咳,未好转就诊于我院。患儿足月顺产,无家族遗传病及传染病史。患儿一般情况尚可,平卧位呼吸困难明显,