乙型重型肝炎患者血清HBV前C/BCP变异检测及临床意义

目的探索乙型重型肝炎患者HBV前C/BCP区变异与临床病情关系。方法用荧光定量PCR法检测血清HBVDNA载量;PCR扩增前C/BCP区基因后进行序列测定。结果30例乙型重型肝炎患者中BCP变异有18例,HB-VDNA平均水平为2.71×107copies/mL,未发生BCP变异者有12例,HBVDNA平均水平为5.35×106copies/mL,两者间有显著差异。测序结果显示HBV前C区nt1896G→A终止变异和BCP变异(nt1762A→T和1764G→A)在乙型重型肝炎患者中发生率分别为43.3%(13/30)和60%(18/30),在慢性乙型肝炎患者则分别为40%(12/30)和30%(9/30),两组BCP变异(nt1762A→T和1764G→A)相比有显著差异(P=0.02)。结论BCP变异可影响病毒复制,BCP变异可能与肝病的严重程度存在着相关性。     

PTEN和磷酸化Smad2在原发性肝癌中的表达

目的探讨肝癌等组织中10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物（PTEN）和磷酸化Smad2（P-Smad2）表达的意义。方法采用免疫组织化学技术检测肝癌组织、癌旁肝组织和非癌性肝组织中P-Smad2和PTEN的表达。结果31份肝癌组织中PTEN表达以细胞质和细胞膜明显,细胞核基本不表达；25份癌旁及13份非癌性肝组织中则以细胞核和细胞质强表达,细胞膜弱表达。PTEN在肝癌组织的表达率（64．5％）低于癌旁肝组织（96．0％）和非癌性肝组织（100．0％）,表达强度（4．19±3．31）低于癌旁肝组织（7．88±0．93）和非癌性肝组织（7．77±0．93）,差异均有统计学意义（P＜0．05）。不同病理分级的肝癌组织中PTEN的表达率差异无统计学意义（P＞0．05）,≥Ⅱ级的肝癌组织细胞质表达强度（3．07±2．87）低于＜Ⅱ级（5．80±3．12）的肝癌组织（P＜0．05）。癌旁有、无肝内血管癌栓的肝癌组织中,PTEN表达率分别为45．5％和85．7％,表达强度分别为3．00±3．46和6．28±2．37,差异均有统计学意义（P＜0．05）。PTEN在肝细胞的表达定位与病理类型呈负相关（r=0．34,P＜0．01）,与肝内血管癌栓呈负相关（r=-0．43,P＜0．05）。非癌性肝组织、癌旁肝组织和病理分级＜Ⅱ级的肝癌组织中,P-Smad2表达以细胞核和细胞质明显,≥Ⅱ级的肝癌组织中则以细胞核为主。P-Smad2在肝细胞的表达定位与病理类型呈正相关（r=0．22,P＜0．05）,P-Smad2在细胞核的表达强度。肝癌组织与癌旁肝组织的差异无统计学意义,也与肝内血管有无癌栓无关。肝癌组织中PTEN和P-Smad2表达呈负相关（r=-0．73,P＜0．01）。结论PTEN的表达、强度以及和P-Smad2的核、质转位可能与肿瘤的发展和恶化有关,二者可能存在相互作用,共同参与肝癌的发生机制。     

便携式多功能活动桌的制作与使用

传统的病员床上就餐桌体积庞大 ,用餐后仍需占用一定的空间放置 ,携带起来也不方便 ,在工作实践中我们研制出一种便携式多功能活动桌 ,由于能上下左右移动 ,所以它不仅能满足病人床上就餐 ,又可满足野战条件下临时的手术台、操作台用。经临床 10 0 0余人次使用效果满意。现介绍如下 :1　材料采用 3m m厚的钢板 30 0× 115、 16× 2不锈钢管 480 mm, 12钢筋 310 mm、 11钢筋 40 0 mm、 8钢筋 30 0 mm,M10紧固螺丝 1枚 ,连接螺丝 2枚。手轮 4个。用市售 40 0×30 0不锈钢作为餐盘。2　制作方法用钢板为原料制作夹板 ,上面 6 0× 115、下面 5 …     

2005年《实用骨科杂志》征订启示

气管切开术后给呼吸道管理带来了方便，但气管切开套管口直接与外界相通，增加了院内感染的机会，和误吸的危险。2002年6月以来，我们自制了一种气管套管外口保护罩应用于171例气管切开患者，效果满意。     

骨科军人伤病员失眠相关因素的调查分析

睡眠是保持良好的生理心理状态、维护身体健康的一项最基本条件,为患者提供舒适的睡眠条件是护理人员的职责。我们曾了解84例骨科住院患者失眠的相关因素,结果显示:51.2％的患者有不同类型、不同程度的失眠,入睡困难是骨科患者失眠的最常见的类型。造成患者失眠的影响因素依次为:疼痛、家庭负担加重、担心伤病预后、生活习惯改变、活动量减少、身体制动不适、环境改变等。军队医院如何有针对性地做好军人伤病员失眠的护理工作,是值得重视的问题。我们带着这些问题,对住我科78例非手术治疗的骨科军人伤病员的睡眠状况及失眠的相关因素进行了调查。     

幽门螺杆菌耐甲硝唑基因分型与序列分析

目的 探讨幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp)rdxA基因型及其与甲硝唑耐药性的关系及耐药的分子机制。方法 对54例包括胃炎、消化性溃疡、胃癌患者的Hp分离株进行甲硝唑敏感实验，得到敏感株和耐药株；提取Hp基因组DNA，PCR扩增rdxA基因，并进行限制性片段长度多态性（RFLP）分型；统计学分析基因型和耐药性关系；对1株敏感株和2株耐药株rdxA基因测序分析突变情况。结果 rdxA基因可分为两型：Ⅰ型和Ⅱ型。Ⅰ型中的敏感株和耐药株所占比例为56%和44%，Ⅱ型中的敏感株占16％，耐药株占84％。经统计学分析，rdxA基因Ⅱ型与耐药性有相关性。rdxA基因测序分析显示耐药株存在编码区碱基置换及插入造成的移码突变；非编码区亦存在单个碱基缺失及置换突变。结论 rdxA基因Ⅱ型与Hp的甲硝唑耐药性密切相关，耐甲硝唑株主要表现为Ⅱ型。rdxA基因突变是耐甲硝唑的主要原因。     

14株抗乙型肝炎表面抗原单克隆抗体与变异表面抗原的反应模式及应用

目的制备抗乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)的单克隆抗体,检测单克隆抗体与15种变异HBsAg的反应模式。用筛选出的单抗建立快速检测变异HBsAg的ELISA实验方法,并做初步评价。方法用中国乙型肝炎病毒感染者血清中分离的HBsAg免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞融合技术制备抗-HBs单克隆抗体。检测不同单克隆抗体与野生及变异HBsAg的反应性。筛选出两种可以较好识别变异HBsAg的单克隆抗体McAb2和McAb3,建立两种抗体ELISA检测HBsAg的方法。结果制备了14株抗-HBs单抗。经过初筛,有4种可以较好识别包括G145R在内的大多数变异HBsAg。优化了McAb2和McAb3检测HBsAg的条件,检测HBsAg的灵敏度较好,检测变异HBsAg的能力优于2种现行国产HBsAg检测试剂盒。结论用本实验制备的单抗可以很好地识别包括G145R在内的大多数变异HBsAg。     

中国旱獭去唾液酸糖蛋白受体H1和H2亚基糖基识别域的原核表达及复性

目的对中国旱獭去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)H1和H2亚基糖基识别域(CRD)的克隆、表达、纯化及复性。方法用RTPCR从中国旱獭肝组织中扩增ASGPRCRDH1和CRDH2cDNA,分别将其克隆到原核表达载体pRSETB上,在埃希菌BL21(DE3)pLysS内诱导表达含6个组氨酸标签的融合蛋白。融合蛋白经Ni2 螯合柱亲和纯化后,在体外行透析复性。结果ASGPRCRDH1和CRDH2经原核表达后得到分子量约为22ku和15ku的目的蛋白,以包涵体形式存在。经Ni2 螯合柱亲和纯化后获得纯度大于95%的融合蛋白。利用仅识别天然构像的单克隆抗体对复性后产物进行检测,证明复性成功。结论成功地表达了具有活性的ASGPRCRDH1和CRDH2的融合蛋白,在肝脏疾病的靶向治疗研究中具有潜在的应用价值。     

食管癌与螺杆菌感染及炎性信号通路关系

目的 研究食管癌中是否存在螺杆菌感染及其与炎性信号通路的关系,探讨螺杆菌感染以及所产生的慢性炎症在人食管癌发生发展中的作用.方法 随机收集食管癌标本37例和正常食管标本10例,采用聚合酶链反应(PCR)扩增螺杆菌16S rDNA,并进行基因测序及与幽门螺杆菌(Hp)同源性比较.阳性者再扩增Hp特异性毒力基因(cagA,babA2,vacA).随后将Hp标准株NCTC11639和NCTC11637分别与食管鳞癌细胞株EC109共培养不同的时间,蛋白印迹(Western blot)检测炎性信号通路中P-IκB-α蛋白表达的变化.结果 食管癌组织中螺杆菌16SrRNA基因的检出率为31.6%(12/37),正常人食管组织均无阳性表达.对阳性标本16S rRNA基因测序及同源性比较,食管癌组织中螺杆菌序列与Hp的16S rDNA序列同源性达99%～100%.12例阳性标本中分别有cagA阳性4例,babA2阳性8例,vacA阳性3例,阳性率分别为33%,67%,25%.EC109与Hp标准株共培养不同时间后,P-IкB-α显著升高.结论 食管癌组织中存在螺杆菌感染,该螺杆菌可能为Hp或者其他亚种.螺杆菌感染导致食管粘膜慢性炎症在食管癌的发生发展中可能发挥重要的作用,其中P-IκB-α炎性信号通路的持续作用可能为分子机制之一.