重组人碱性成纤维细胞生长因子复合胶原海绵的制备及其在齿槽外科的应用

目的观察重组人碱性成纤维细胞生长因子复合胶原海绵对牙科创面止血及伤口修复愈合的影响。方法实验于2003-01/2004-03在暨南大学医学院附属广州市红十字会医院创伤研究所和口腔科完成。首先用Ⅰ型胶原蛋白、碱性成纤维细胞生长因子与壳聚糖配制成混合物,冷冻干燥成复合胶原海绵备用。收治60例错牙合畸型患者需行牙齿对称减数进行正畸治疗,共计对称拔除双尖牙212颗、磨牙14颗。左侧为实验组牙槽窝置入复合胶原海绵,右侧为对照组置入医用明胶海绵。记录拔牙创面止血时间,观察术后2,7d拔牙面创愈合情况。结果60例236颗牙拔除后的止血时间,实验组(45.9±12.8)s,对照组(89.0±16.4)s。实验组2d拔牙创面愈合78例(66%)、7d拔牙创面愈合117例(98%);对照组2d拔牙创面愈合25例(21%)、7d拔牙创面愈合95例(79%)。实验组创面愈合均好于对照组。结论重组人碱性成纤维细胞生长因子复合胶原海绵的止血效果和促进创面愈合作用明显优于明胶海绵。     

Ⅱ型胶原海绵修复关节软骨缺损的动物实验

目的 探讨Ⅱ型胶原海绵修复关节软骨缺损的效果。方法 采用成年纯种新西兰兔24只，48侧膝关节，在股骨滑车面钻孔为直径5mm、深3mm的全层关节软骨缺损，左侧为A组，在缺损区内完全填充Ⅱ型胶原海绵，右侧为B组，缺损区空白对照。术后12周内，每双数周对缺损修复情况行大体形态和组织学观察。结果 Ⅱ型胶原对关节软骨缺损的修复有明显的促进作用，修复结果接近正常软骨。结论 自行研制的高纯度Ⅱ型胶原海绵组织相容性好，无明显毒副作用，对关节软骨缺损具有亟好的修复作用。     

应用Ⅱ型胶原为载体的异种异体移植修复关节软骨缺损

背景已有用Ⅱ型胶原作为载体的软骨细胞移植的实验动物模型,Ⅱ型胶原是否引起实验性的关节炎或者发生由Ⅱ型胶原介导的细胞毒的反应尚未明确.目的检测用猪Ⅱ型胶原免疫新西兰大白兔的细胞免疫状态.设计以实验动物为研究对象,观察对比的探索性研究.单位一所市级医院创伤外科研究所.材料实验于1999-08/2000-02在广州红十字会医院创伤外科研究所完成.新西兰大白兔6只,雌雄不限,体质量2.0～3.0kg.方法用Ⅱ型胶原免疫新西兰大白兔60 d,定期抽取血浆检测抗Ⅱ型胶原抗体;第60天取兔的外周血淋巴细胞,取兔脾细胞、淋巴结分离淋巴细胞,进行体外2次Ⅱ型胶原刺激,检测由此引起的反应性的细胞增殖规律.随机分为两组,第1组加入不同浓度植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)作阳性对照,并测定非特异性免疫;第2组加入不同浓度Ⅱ型胶原,检测特异性免疫.主要观察指标①兔抗Ⅱ型胶原抗体含量检测.②正常兔与免疫兔脾淋巴细胞增殖试验比较.③正常兔和免疫兔淋巴结淋巴细胞增殖试验比较.④正常兔和免疫兔外周血淋巴细胞增殖试验比较.结果第21天抗体效价出现第1次高峰,再次注射抗原40 d后出现第2次高峰,维持20 d后逐渐下降,正常兔的淋巴细胞在PHA刺激下发生增殖,但对Ⅱ型胶原的第1次刺激不发生增殖,而免疫兔对PHA和Ⅱ型胶原的刺激均能发生显著的增殖,Ⅱ型胶原浓度为25 mg/L已有发生,在50mg/L出现高峰.结论异种Ⅱ型胶原在一定浓度下,可以引起免疫兔的抗Ⅱ型胶原抗体的升高,并可引起兔脾、外周血淋巴细胞增殖,在体内引起细胞免疫反应,且可引起移植免疫性关节炎.     

针刺对烧伤早期创面组织一氧化氮的影响

背景:一氧化氮在烧伤创面愈合过程起重要作用,针灸有消炎和免疫调节作用,但其作用机制是否对创面组织一氧化氮的影响有关还不清楚。目的:探讨针刺减轻烧伤创面早期进行性损害的机制。设计:双盲随机对照研究。地点和对象:实验在广州市红十字会医院烧伤整形科完成,对象为22只新西兰大白兔,体质量2.0～2.5kg,雌雄不限,由广东省实验动物中心提供。干预:建立兔深Ⅱ度烧伤模型,针刺双侧足三里穴。采用一氧化碳试剂盒(酶法)测定组织一氧化碳。主要观察指标:创面组织一氧化氮的含量。结果:兔深Ⅱ度烧伤早期组织中一氧化氮含量显著低于正常组织。正常组织,烫伤后1,3,5d创面组织一氧化氮分别为(4.76±1.31),(2.68±0.92),(2.07±0.81),(2.85±1.12)μmol/g。以伤后第3天最低(t=2.382,P<0.05);针刺治疗3d,创面组织一氧化氮为(3.05±1.16)μmol/g,明显提高(t=2.216,P<0.05)。但仍低于正常组(4.76±1.31)μmol/g(t=2.156,P<0.05)。结论:针刺能提高创面组织一氧化氮含量,可能是其减轻组织水肿和烧伤创面早期进行性损害重要因素。     

海藻酸钠复合载体长期培养软骨细胞的生物学稳定性

背景：近年研究发现在海藻酸钠三维培养体系中软骨细胞存活时间延长,细胞外基质分泌旺盛。目的：观察海藻酸钠复合载体对体外长期培养软骨细胞生物学稳定性的影响。方法：将兔软骨细胞接种至以海藻酸钠、透明质酸、壳聚糖、纤维连接蛋白、碱性成纤维细胞生长因子为主要成分的复合载体三维培养体系中,以平面培养作为对照。定期观察在两种不同培养体系中软骨细胞形态学改变,细胞生长曲线差异,细胞上清液糖胺多糖含量差异。结果与结论：软骨细胞在海藻酸钠复合载体中生长良好,生长旺盛,并形成球状细胞团,细胞分裂增殖活跃;培养2d时复合载体培养软骨细胞增殖稍高于平面培养软骨细胞;培养4d时可见复合载体培养软骨细胞增殖明显加快;培养6~14d时复合载体培养的仍保持较稳定增殖,而平面培养的软骨细胞增殖逐渐降低;复合载体细胞外液糖胺多糖含量明显高于平面培养软骨细胞。说明海藻酸钠复合载体可以长期培养软骨细胞并保持其生物学稳定性。     

海藻酸钠复合载体长期培养软骨细胞的生物学稳定性

背景:近年研究发现在海藻酸钠三维培养体系中软骨细胞存活时间延长,胞外基质分泌旺盛.目的:观察海藻酸钠复合载体对体外长期培养软骨细胞生物学稳定性的影响.方法:将兔软骨细胞接种至以海藻酸钠、透明质酸、壳聚糖、纤维连接蛋白、碱性成纤维细胞生长因子为主要成分的复合载体三维培养体系中,平面培养作为对照.定期观察在两种不同培养体系中软骨细胞形态学改变,胞生长曲线差异,胞上清液糖胺多糖含量差异.结果与结论:软骨细胞在海藻酸钠复合载体中生长良好,长旺盛,形成球状细胞团,胞分裂增殖活跃;培养2 d时复合载体培养软骨细胞增殖稍高于平面培养软骨细胞;培养4 d时可见复合载体培养软骨细胞增殖明显加快;培养6～14 d时复合载体培养的仍保持较稳定增殖,平面培养的软骨细胞增殖逐渐降低;复合载体细胞外液糖胺多糖含量明显高于平面培养软骨细胞.说明海藻酸钠复合载体可以长期培养软骨细胞并保持其生物学稳定性.     

海藻酸钠复合载体长期培养软骨细胞的生物学稳定性

摘要 背景：近年研究发现在海藻酸钠三维培养体系中软骨细胞存活时间延长,细胞外基质分泌旺盛。　 目的：观察海藻酸钠复合载体对体外长期培养软骨细胞生物学稳定性的影响。 方法：将兔软骨细胞接种至以海藻酸钠、透明质酸、壳聚糖、纤维连接蛋白、碱性成纤维细胞生长因子为主要成分的复合载体三维培养体系中,以平面培养作为对照。定期观察在两种不同培养体系中软骨细胞形态学改变,细胞生长曲线差异,细胞上清液糖胺多糖含量差异。 结果与结论：软骨细胞在海藻酸钠复合载体中生长良好,生长旺盛,并形成球状细胞团,细胞分裂增殖活跃;培养2 d时复合载体培养软骨细胞增殖稍高于平面培养软骨细胞;培养4 d时可见复合载体培养软骨细胞增殖明显加快;培养6~14 d时复合载体培养的仍保持较稳定增殖,而平面培养的软骨细胞增殖逐渐降低;复合载体细胞外液糖胺多糖含量明显高于平面培养软骨细胞。说明海藻酸钠复合载体可以长期培养软骨细胞并保持其生物学稳定性。 关键词：海藻酸钠;软骨细胞;培养;载体;生物学稳定性 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.16.005     

Ⅱ型胶原海绵修复兔膝关节软骨缺损的MRI与组织学对比分析

目的 建立兔膝关节软骨损伤动物模型,评估白行研制的Ⅱ型胶原海绵修复关节软骨缺损的效果。 方法 根据既往方法研制成Ⅱ型胶原,利用胶原的自发荧光特性测试其孔径大小;将材料移植到软骨缺损动物模型上,以随机分组对照的方式进行动物实验。通过MRI联合组织病理学HE、番红O、天狼猩红偏振光染色及新生软骨面积测定、Ⅱ型胶原免疫组化染色观察软骨缺损修复状况。 结果 Ⅱ型胶原海绵自发荧光分层扫描显示其孔径为(93.26±38.40) μm,较接近最通软骨生长的孔径。通过横向比较动物实验同一时相点各组MRI对照组织学结果可以看出,Ⅱ型胶原海绵组在6周时首先出现零星、孤立的软骨信号,而番红O染色和免疫组化的结果证实新生的软骨同时具有一定的分泌糖胺多糖和Ⅱ型胶原基质的功能。天狼猩红偏振光测定结果显示,Ⅱ型胶原海绵组新生软骨面积远高于对照组(P＜0.01)。 结论 通过改进方法提取纯化的Ⅱ型胶原,无论组织病理还是MRI的结果均显示对兔膝关节软骨缺损的修复有显著效果。     

骨-腱结点动物模型的建立及MRI动态观察

目的 建立骨-肌腱结点愈合过程的动物模型并进行MRI观察.方法 用12只新西兰大白兔分别行兔髌骨部分切除后,再行髌腱结合术,于术后2周、4周、8周、12周进行大体和MRI检查.结果 大体和MRI检查动态显示术后2、4、8、12周骨-肌腱结合部组织愈合过程,该过程以松质骨再生和骨-肌腱愈合接点纤维软骨带的再生为特征,随着时间的增长逐渐恢复.结论 经改良的动物模型不影响骨-肌腱结点愈合,有利于MRI的正确观察.     

四君子汤协同辅舒良治疗脾虚型变应性鼻炎的临床观察

目的:研究四君子汤协同辅舒良对脾虚型变应性鼻炎的治疗作用。方法:将我院确诊为脾虚型变应性鼻炎的60例患者随机分为治疗组和对照组各30例,治疗组采用四君子汤协同辅舒良进行治疗,对照组采用辅舒良进行治疗,观察并比较两组疗效及血清白细胞介素(IL-4,IL-2)值变化。结果:治疗组有1例患者,对照组有2例患者在治疗过程中脱落,余患者均顺利完成治疗,治疗组临床疗效优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗前后血清IL-4、IL-2水平的差异均有统计学意义(P<0.01),治疗组治疗后血清IL-2高于对照组,而IL-4水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:四君子汤能降低IL-4同时升高IL-2水平,从而改善机体的免疫功能,四君子汤协同辅舒良治疗脾虚型变应性鼻炎能取得良好的临床疗效。