流式细胞术检测100例健康人外周血来源树突状细胞亚群

目的初步了解健康人外周血来源的树突状细胞亚群占白细胞总数的比例。方法采用免疫荧光三色标记流式细胞术检测100例健康人外周血树突状细胞亚群(DC1/D11C+和DC2/CD123+)。结果 DC1/CD11C+[男:(0.303±0.070)%,女:(0.255±0.079)%]和DC2/CD123+[男:(0.138±0.056)%,女:(0.109±0.039)%]亚群及DC1/DC2[男:(2.701±0.861)%,女:(2.508±0.989)%]在男与女之间差异均无统计学意义(P0.05)。结论流式细胞术检测外周血树突状细胞亚群快速准确,可能为健康人外周血树突状细胞占白细胞总数的比例提供大致参考。     

18S rDNA的PCR扩增技术在棘阿米巴角膜炎临床诊断中的应用

目的:探讨利用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增棘阿米巴18S rDNA在角膜炎早期临床诊断应用中的可行性。方法:以18S rDNA为模板,利用特异性引物JDP1-JDP2配合PCR技术来检测临床标本中的棘阿米巴原虫。结果:在临床拟诊为棘阿米巴角膜炎的16例(16眼)中,通过PCR检测法有12眼证实为棘阿米巴原虫感染,同时100g/L KOH角膜刮片后镜检有5例发现了棘阿米巴包囊。两种诊断方法用Fisher确切概率法统计,P<0.05。结论:18S rDNA PCR技术对正确诊断早期棘阿米巴角膜炎有重要的临床应用价值。     

羊膜移植联合结膜瓣遮盖术防止角膜穿孔

目的 探讨羊膜移植联合结膜瓣遮盖术防止角膜穿孔的临床疗效.方法 采用羊膜移植联合结膜瓣遮盖治疗难治性角膜炎致角膜濒临穿孔24例,术后继续局部药物治疗,随访3-10个月,观察角膜愈合情况.结果 术后均未见羊膜植片的急性排斥反应,所有手术病例无一出现角膜穿孔,角膜溃疡逐渐修复,角膜基质有不间程度的增厚,多数患者术后视力均有不同程度的提高.结论 羊膜移植联合结膜瓣遮盖是治疗角膜濒临穿孔的有效方法.     

吉西他滨化疗联合树突状细胞瘤内注射对小鼠巨大淋巴瘤的治疗作用

目的：观察吉西他滨对荷B细胞淋巴瘤小鼠脾脏中髓源抑制性细胞（myeloid derived suppressor cell, MDSC）的影响,以及吉西他滨化疗联合树突状细胞（dendritic cells, DCs）治疗巨大淋巴瘤的疗效。方法：小鼠皮下接种A20淋巴瘤细胞,30 d后形成巨大肿瘤,流式细胞仪分析吉西他滨化疗前后荷瘤小鼠脾脏中Gr1+CD11b+ MDSC的比例,免疫磁珠纯化的脾脏MDSC体外加入吉西他滨共培养后,AnnexinV/PI标记法检测细胞凋亡;观察荷瘤小鼠接受吉西他滨化疗联合DCs瘤内注射后肿瘤生长情况及小鼠存活期。结果：荷A20淋巴瘤小鼠脾脏中MDSC的比例显著上调,是正常小鼠脾脏中的10倍以上。体外吉西他滨时间依赖性诱导MDSC凋亡与坏死;荷瘤小鼠体内注射吉西他滨后,脾脏中绝大部分的MDSC被清除。单独吉西他滨注射或DCs瘤内注射对肿瘤生长产生一定的抑制作用,小鼠平均存活天数分别为（48.8±3.6）d和（47.2±7.4）d,而对照组小鼠平均存活天数为（38.8±2.2）d;吉西他滨化疗联合DCs瘤内注射后瘤体持续显著缩小,60%小鼠存活时间均超过90 d。结论：吉西他滨可有效清除荷瘤小鼠脾脏MDSC,吉西他滨化疗与DCs瘤内注射免疫治疗具有协同效应,可以提高对巨大淋巴瘤的疗效,本实验为应用生物化疗综合治疗模式治疗复发、难治性淋巴瘤提供了实验依据。     

树突状细胞疫苗治疗多发性骨髓瘤的研究进展

近年来多发性骨髓瘤的发病率不断上升,但目前对于多发性骨髓瘤仍然没有很好的治疗方法。树突状细胞是一类抗原呈递细胞,具有启动和调控免疫反应的能力。利用肿瘤抗原冲击树突状细胞的免疫治疗策略已被证明是安全的并且对许多肿瘤具有一定的治疗效果。本文综述了多发性骨髓瘤相关的各种肿瘤抗原类型及树突状细胞免疫治疗多发性骨髓瘤的临床实验,并且分析了树突状细胞免疫治疗在未来实验研究方面的前景。     

大鼠角膜碱烧伤后角膜淋巴管生成及VEGF-C和VEG-FR-3的表达

目的:研究大鼠角膜碱烧伤后角膜淋巴管生成及VEGF-C和VEGFR-3的表达。方法:制作角膜碱烧伤模型,应用免疫组化方法检测正常角膜及烧伤后1,3,5,7,14,21,28d角膜组织中VEGF-C和VEGFR-3的表达,免疫组化LYVE-1(淋巴管内皮特异标记物)染色观察角膜中淋巴管生成情况,电镜观察烧伤后14d角膜新生淋巴管状况。结果:角膜碱烧伤后,VEGF-C和VEGFR-3的表达明显升高,烧伤后3d,角膜中出现淋巴管。结论:角膜碱烧伤后新生淋巴管生成伴VEGF-C和VEGFR-3高表达。     

重组鼠IFN-γ腺病毒诱发细胞因子释放综合征小鼠模型的建立和观察

目的：通过向C57Bl/6J小鼠腹腔注射IFN-γ腺病毒（Ad-mIFN-γ）建立细胞因子释放综合征（CRS）的动物模型。方法：构建Ad-mIFN-γ及对照Ad-lacZ腺病毒载体,分别以MOI=100体外转染小鼠腹腔巨噬细胞,流式细胞术检测其对细胞mIFN-γ分泌的影响。将40只雌性C57Bl/6J小鼠按随机数字表法分为对照组、载体对照组、病毒低、中、高剂量组（每组8只）,分别向各组小鼠腹腔注射PBS(200μL)、Ad-lacZ(2×107 PFU/只)、Ad-mIFN-γ(5×106PFU/只)、Ad-mIFN-γ(1.5×107 PFU/只)和Ad-mIFN-γ(2×107 PFU/只)。每日观测小鼠的体质量及生存情况;第3天时采用流式细胞术检测小鼠外周血和脾内单核细胞（CD11b+）、巨噬细胞（CD11b+/CD86+）比例,免疫荧光染色法检测脾内CD11b+的单核细胞比例;第9天时采用流式细胞术检测小鼠血清中细胞因子的分泌水平;第14天,采用颈椎脱臼法处死小鼠,H-E染色法观察小鼠肝、脾、肺和肾的病理和组织学变化。结果：Ad-mIFN-γ体外感染小鼠腹腔巨噬细胞,在第3天检...     

医用几丁糖膝关节内注射联合康复训练对中期膝骨关节炎患者的疗效分析

目的 观察医用几丁糖膝关节内注射联合康复训练对中期膝骨关节炎患者的临床疗效,血清降钙素原(PCT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平,以及西安大略和麦克马斯特大学骨关节调查量表(WOMAC)评分的影响.方法 选择2019年1月至2020年6月该院骨科门诊收治的80例中期膝骨关节炎患者作为研究对象,依据随机数字表法将其分成A组、B组,每组40例.A组采用医用几丁糖膝关节内注射疗法,B组采用医用几丁糖联合康复训练治疗,6周为1疗程.评价2组的疗效,比较2组治疗前、疗程结束时及疗程结束后3个月血清PCT、TNF-α、hs-CRP水平及WOMAC评分.结果 B组治疗总有效率为92.5％,高于A组的72.5％(P<0.05).2组疗程结束时、疗程结束后3个月血清PCT、TNF-α、hs-CRP水平及WOMAC评分均低于治疗前,疗程结束后3个月低于疗程结束时(P<0.05),且疗程结束后3个月B组血清PCT、TNF-α、hs-CRP水平及WOMAC评分均低于A组(P<0.05).结论 医用几丁糖膝关节内注射联合康复训练治疗中期膝骨关节炎具有较好疗效,能降低血清PCT、TNF-α、hs-CRP水平,改善膝关节功能状态,值得临床推广使用.     

北京市朝阳区地铁车站内集中空调通风系统嗜肺军团菌污染状况调查研究

目的了解北京市朝阳区地铁集中空调通风系统嗜肺军团菌污染状况,分析地铁集中空调系统的监管现状,为规范地铁集中空调的管理提供依据。方法从北京市朝阳区运行的地铁线路中随机选择了40个地铁车站,检测车站内集中空调冷却水、冷凝水中的嗜肺军团菌。结果 40个地铁车站的集中空调内,冷却水中嗜肺军团菌阳性比例为15.00%,冷凝水中嗜肺军团菌的阳性比例为12.50%。结论北京市朝阳区地铁集中空调通风系统存在一定程度的安全隐患,但是目前地铁集中空调的监管处于空白的状态,应通过建立健全法律法规、标准、规范和推进行业自律加强对地铁集中空调的管理。     

靶向CD19的CAR修饰的NK细胞对B细胞淋巴瘤的杀伤

目的:利用鼠杂交瘤技术筛选和制备治疗性CD19单克隆抗体,探讨以CD19 scFv序列构建CD19-CAR(pCD19-CAR)修饰的NK细胞对CD19+B细胞淋巴瘤细胞的杀伤作用.方法:用偶联多肽免疫小鼠制备CD19单克隆抗体,然后用基因测序法获得抗体的序列.分析抗体序列,并通过基因合成和分子克隆技术构建pCD19-CAR片段,然后将其克隆到慢病毒载体上,病毒包装制备后,转染NK-92MI细胞.最后,用流式细胞术检测不同的pCD9-CAR-NK-92MI细胞对CD19+细胞的杀伤率.结果:(1)成功筛出特异性强的CD19单克隆抗体-pCD19;(2)抗体检测结果显示CD19+的Ramos细胞的阳性率为84.3％,Raji为85.6％,与商业化抗体结果相似;(3)被pCD19-CAR修饰的CD19-CAR阳性率为28.72％的NK-92MI细胞对CD19+的Ramos和Raji细胞的杀伤效率明显高于未被修饰的NK-92MI细胞株对Ramos和Raji细胞的杀伤率[(47.1±1.7)％vs(24.7±6.2)％和(51.8±7.9)％vs(27.6±9.6)％,均P＜0.05];对CD19-细胞Jurkat,不论是未被pCD19-CAR修饰的NK-92MI或是被修饰的NK-92MI细胞,几乎都不存在特异性杀伤作用[(16.1±0.7)％vs(17.7±2.9)％,P＞0.05].结论:成功构建pCD19-CAR,被pCD19-CAR修饰的NK-92MI细胞能特异性的识别CD19抗原并杀伤CD19+B细胞淋巴瘤细胞.