以核衣壳为靶点的抗乙型肝炎病毒药物研究进展

乙型肝炎病毒(HBV)感染是导致肝癌和肝硬化的主要原因,HBV的流行严重危害人民健康,对社会经济发展具有不容忽视的制约作用。目前用于治疗HBV感染的药物主要为干扰素和核苷类DNA聚合酶抑制剂,但干扰素的低应答率,核苷类药物的耐药性及停药后反弹的问题一直没有得到很好的解决。因此,寻找具有新作用机制的抗HBV药物一直受到人们的重视。本文对以核衣壳为靶点的新型抗HBV药物的研究进行了综述,这种新作用机制药物的发现对于延缓甚至阻止耐药病毒株的出现具有特殊的意义。     

血液系统肿瘤研究中单细胞测序技术的应用

由于细胞强异质性的存在,血液肿瘤细胞呈现多样性,而这种多样性根源于基因层面的改变。随着精准医学时代的到 来,对于基因层面的研究越来越依赖于层出不穷的二代测序技术。过去十几年的深度测序技术着重于细胞群体层面的整体分析, 不能深入区分异质性的肿瘤细胞差异化的生命活动。近年来新兴的单细胞测序技术大大促进了血液肿瘤异质性研究的发展。本 文着重介绍血液肿瘤发生发展和治疗耐药性中的细胞异质性及其分子机制,以及利用单细胞测序技术开发更精细层次的标志 物、评估临床实验有效性和安全性方面的研究进展,并对其发展前景做了简要展望。     

靶向B细胞成熟抗原的嵌合抗原受体T细胞的构建及其对肿瘤细胞的杀伤

[摘要] 目的：探索通过嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor,CAR）-T 细胞靶向B 细胞成熟抗原（B cell maturation antigen,BCMA）以治疗多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）的方法。方法：构建基于鼠源BCMA scFv 的CAR-BCMA分子,包装为慢病毒载体并感染健康人T 细胞构建CAR-BCMA-T 细胞;构建BCMA阳性细胞系A549-BCMA、A549-BCMAOFP和K562-BCMA作为靶细胞。将CAR-BCMA-T细胞与构建的靶细胞和人骨髓瘤细胞U266 共孵育,CCK-8 法和流式细胞术检测其对BCMA阳性肿瘤细胞的杀伤能力。构建MM患者来源CAR-BCMA-T细胞并检测其杀伤靶细胞A549-BCMA的能力,并采用ELISA和流式细胞术检测CAR-BCMA-T细胞IFN-γ 的释放水平。结果：健康人来源的CAR-BCMA-T经过11 d 培养扩增300 倍,阳性率达到43%;成功构建BCMA阳性靶细胞。在5:1 效靶比下,CAR-BCMA-T对A549-BCMA、K562-BCMA和U266 细胞的杀伤率分别在80%、60%和80%左右,显著高于对BCMA阴性细胞的杀伤率,且杀伤力与靶细胞的BCMA表达强度相关。在效靶比20:1 时,MM患者来源CAR-BCMA-T细胞对靶细胞A549-BCMA的杀伤率达到95%以上,并且大量分泌IFN-γ。结论：本研究成功构建了健康人及MM患者来源的靶向BCMA的CAR-T细胞,其能够有效特异杀伤BCMA阳性的肿瘤细胞。     

患者来源肿瘤异种移植模型研究的新进展

患者来源的肿瘤异种移植（patient-derived tumor xenografts,PDTX）模型,因其较好地保留了原代肿瘤的遗传、分子、形态结构等方面的特征,维持了肿瘤干细胞的特性,能反映患者肿瘤的遗传多样性,并且在对治疗的反应性上也与患者保持较高的一致性,现已越来越多地被应用于临床前期研究。近年来,NSG(NOD/LtSz-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/J)、NOG(NOD.Cg-PrkdcscidIL2rgtm1Sug/JicCrl)和NCG(NOD-Prkdcem26Cd52Il2rgem26Cd22/Nju）等免疫缺陷小鼠的研发成功,推动了新一代PDTX模型研究的快速发展。由于新一代PDTX模型建立所需样本量小,经过冷冻的组织与新鲜组织成瘤率无明显差异,为一些难以获取大量样本的肿瘤组织提供了研究材料。笔者对近年来PDTX模型用于个性化治疗方案的筛选制定、药物的临床前研究、肿瘤耐药机制的研究、肿瘤标志物及敏感指标的筛选、肿瘤微环境的研究以及患者预后的评估等的发展现状作一综述。     

环状RNA CircHIPK3通过miR-379调控IGF1表达促进非小细胞肺癌细胞系NCI-H1299与NCI-H2170的细胞增殖

背景与目的 已有的研究证明:环状RNA是一类在哺乳动物中普遍存在的具有稳定闭合环状结构的内源性RNA分子.环状RNA circHIPK3(circular RNA HIPK3,circHIPK3)在肝细胞癌(hepatocellular carcino-ma,HCC)中表达水平较高,促进肝癌细胞生长.但是其在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的作用及其调控机制尚无文献报道.本研究拟探讨环状RNA circHIPK3对NSCLC细胞系NCI-H1299和NCI-H2170细胞增殖的影响,并进一步研究其调控的分子机制.方法 Real-time PCR法检测circHIPK3在NSCLC各细胞系中的表达水平.CCK-8实验和克隆形成实验检测过量表达和干扰circHIPK3对细胞增殖的影响.双荧光素酶报告基因实验分别检验miR-379与circHIPK3及miR-379与IGF1 mRNA的结合情况.Western blot和ELISA检测细胞内外的IGF1蛋白表达水平.结果 环状RNA circHIPK3在6株NSCLC细胞株中均有表达,其中H1299表达最低,H2170表达最高,通过转染过表达的circHIPK3可显著促进NCI-H1299细胞增殖,干扰circHIPK3可显著抑制NCI-H2170细胞增殖.miR-379可与circHIPK3及IGF1 mRNA直接结合.过表达circHIPK3导致IGF1表达量上调,干扰circHIPK3能够下调IGF1表达水平,转入miR-379 mimics恢复了circHIPK3稳转细胞株IGF1表达水平的上调及细胞增殖表型.结论 环状RNA circHIPK3在NSCLC细胞系NCI-H1299及NCI-H2170中可通过miR-379调控IGF1表达促进细胞增殖,环状RNA circHIPK3可能成为非小细胞肺癌治疗的新靶点.     

棘阿米巴角膜炎发病机制的研究进展

棘阿米巴角膜炎(acanthamoeba keratitis,AK)是一种以环形浸润和角膜神经炎为典型临床表现的严重性眼病。它的发病机制主要包括棘阿米巴对角膜上皮的黏附,滋养体介导的病理效应以及释放多种蛋白酶破坏角膜基质层组织。由于棘阿米巴对神经细胞的强烈趋化效应,可引起相应的角膜神经炎。目前,AK的发病机制尚不明确,但随着研究的深入可以为眼科医师提供更有效的诊断和治疗措施。     

真菌及阿米巴混合感染性角膜炎临床分析

目的 探讨真菌及棘阿米巴混合感染性角膜炎的发病、临床特征、诊断及其治疗.方法 对2007年7月至2008年12月在福建医科大学附属第一医院确诊的19例真菌及棘阿米巴混合感染性角膜炎进行回顾性临床分析,分析其发病诱因、诊断方法及临床特征,采用抗真菌及阿米巴药物或结膜瓣遮盖术或穿透性角膜移植术进行治疗并观察疗效.结果 19例确诊病例中,14例发病与角膜外伤有关,3例与角膜接触镜相关;所有病例通过角膜刮片镜检,或真菌与阿米巴培养确诊;16例表现为角膜局部溃疡型,3例表现为基质环形浸润;5例经药物治愈,11例经结膜瓣遮盖治愈,2例行穿透性角膜移植术(PKP).结论 真菌及棘阿米巴混合感染性角膜炎的发病诱因以角膜外伤为主,角膜刮片镜检是早期诊断的有效方法,综合药物和手术治疗对感染的控制具有重要意义.     

川芎嗪联合氨胍防治大鼠糖尿病视网膜病变的实验研究

目的　研究川芎嗪和氨胍治疗大鼠糖尿病视网膜病变 (糖网病 )的效果　方法　将清洁级SD大鼠 60只用链尿佐菌素腹腔内注射制成糖尿病模型 ,随机分成正常组 (CON)、糖尿病组 (DM)、川芎嗪治疗组、氨胍治疗组、川芎嗪联合氨胍治疗组共 5组 ,每组 12只。每月观测体重、血糖、眼底各一次 ,观察 6个月。　结果　糖尿病组随病程进展体重下降、血糖升高、眼底病变逐渐加重 ,治疗组中以川芎嗪联合氨胍治疗效果最佳 ,而川芎嗪、氨胍单独治疗效果不明显。　结论　川芎嗪联合氨胍早期防治糖网病可获初步改善     

干细胞移植术治疗巨大和复发性翼状胬肉的临床观察

翼状胬肉的术后复发率高达 30 %～ 70 % [1] 。我院采取翼状胬肉切除 +干细胞移植治疗巨大和复发性胬肉 ,取得了良好效果 ,特报告如下。1　对象和方法1.1　对象　自 1997年至 2 0 0 1年共治疗翼状胬肉病人 41例 ( 5 0眼 ) ,其中男 2 2例 2 3眼 ,女 19例 2 7眼 ,年龄 2 1～ 76岁 ,平均 42岁。原发性胬肉 35眼 ,复发性胬肉 15眼 ,胬肉侵入角膜缘内 4～ 8ｍｍ不等。1.2　手术方法　①平仰卧位 ,按眼科常规消毒铺巾 ,暴露术眼 ;② 1%的卡因表麻后上开睑器 ,胬肉颈部结膜下浸润麻醉 ;③沿角膜缘行胬肉颈部结膜剪开 ,分离至体部 ;距胬肉头部 0 .5…     

华蟾素抗肿瘤研究进展

华蟾素(Cinobufacini)作为我国自主研制的抗肿瘤中药制剂,在临床治疗恶性肿瘤中其疗效得到初步认可。实验及临床研究显示华蟾素制剂体内外抗肿瘤活性显著,作用机制复杂且未完全明确。华蟾素在胰腺癌、肺癌、肝癌、淋巴瘤等恶性肿瘤中均表现出抑制肿瘤发生发展,缓解癌性疼痛,改善中晚期肿瘤患者生活质量,控制副反应发生率等功效。应进一步探究华蟾素制剂治疗恶性肿瘤的作用机制以及主要抗肿瘤有效成分,以期能为临床治疗提供更多依据。文章从华蟾素主要有效成分、抗肿瘤作用机理以及临床疗效三个方面综述华蟾素制剂研究进展。