靶向PSCA的CAR-NK-92细胞对宫颈癌的抗瘤作用

目的：构建并验证靶向前列腺干细胞抗原（prostate stem cell antigen，PSCA）的嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor，CAR）修饰的NK-92细胞对宫颈癌的抗瘤活性。方法：构建PSCA靶向的CAR慢病毒表达载体，利用慢病毒感染法获得PSCA CAR-NK-92细胞。用流式细胞术及Western blotting实验检测宫颈癌细胞中PSCA的表达水平。通过体外效靶细胞共孵育实验以及体内裸鼠移植瘤模型中的治疗情况，验证PSCA CAR-NK-92细胞对宫颈癌Hela及MS751细胞杀伤能力及其裸鼠移植瘤生长的抑制能力。结果：成功构建 PSCA CAR-NK-92 细胞，PSCA 在宫颈癌细胞中高表达（均 P<0.01）。体外共孵育结果显示，PSCA CAR-NK-92细胞可以以剂量依赖的方式裂解PSCA+的宫颈癌细胞；体内抗肿瘤数据表明，PSCA CAR-NK-92细胞较转染空载体的NK-92细胞显著抑制宫颈癌移植瘤的生长（P<0.01），并且可以有效地浸润肿瘤组织并高水平分泌TNF-α和IFN-（γ 均P<0.01）。结论：靶向PSCA的CAR-NK-92细胞在体内外都显示出了良好的对PSCA+肿瘤细胞的杀伤能力，有潜力成为一种针对宫颈癌的潜在治疗策略。     

造血干细胞移植后胸膜肺弹力纤维增生症1例

回顾性分析广西医科大学第一附属医院1例造血干细胞移植(HSCT)受者出现胸膜肺弹力纤维增生症(PPFE)的临床资料, 从发病机制、临床表现、肺功能、胸部CT、诊断及治疗方面阐述PPFE的特点。PPFE的治疗尚未达成共识, 预后差, 药物治疗效果欠佳, 肺移植是患者疾病进展至终末期的治疗选择。     

利用规律间隔成簇短回文重复序列/相关蛋白9系统敲减α2δ1对人肝癌细胞系Hep-12干性的影响

目的 通过规律间隔成簇短回文重复序列/相关蛋白9(CRISPR/Cas9)系统敲减人肝癌细胞系Hep12中电压依赖性钙离子通道 α2δ1的表达，观察α2δ1敲减后对肝癌细胞干性的影响。方法 设计3对靶向α2δ1的向导 (sgRNA)，长度为20 bp，构建到lenti CRISPRv2-puro载体上，然后在体外检测sgRNA切割活性，利用慢病毒包装系统包装含有sgRNA的重组质粒，将包装好的病毒感染Hep-12细胞，2 d后加入嘌呤霉素筛选。利用Western blotting验证α2δ1的敲减效果和干性相关基因的表达。通过成球实验检测其体外自我更新能力的变化。结果 测序结果显示，sgRNA成功插入载体质粒；体外切割实验显示，3条sgRNA均有切割活性；Western blotting结果显示，α2δ1基因的表达显著降低，干性相关基因B细胞特异性莫洛尼白血病病毒插入位点1(BMI1)和Nanog的表达显著被抑制；无血清培养基成球实验结果表明，敲减α2δ1导致Hep-12细胞的体外自我更新能力减弱。结论 利用CRISPR/Cas9技术成功构建敲除α2δ1基因的Hep-12细胞系；敲除α2δ1基因后能抑制Hep-12细胞肿瘤干细胞样特性。     

脐带间充质干细胞体外调节SLE患者淋巴细胞亚群功能的相关研究

为探讨体外脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cell,UCMSC)对SLE患者淋巴细胞亚群的调节,随机选取2017年8月至2019年2月于十堰市人民医院(湖北医药学院附属人民医院)住院诊治的SLE患者12例,该院同期门诊健康体检者10例则作为对照。从1例脐带供者中分离获得UCMSC,抽取两组受试者静脉血并分离淋巴细胞亚群后分组:A组为淋巴细胞,B组为淋巴细胞+UCMSC (UCMSC∶淋巴细胞数量为1∶20),C组为淋巴细胞+UCMSC(UCMSC∶淋巴细胞数量为1∶5)。MTT法检测淋巴细胞增殖抑制率,FACS检测细胞凋亡率与Treg百分比,ELISA检测淋巴细胞IL-6、TNF-α、M-CSF表达水平。结果显示,细胞共培养48 h后,B组与C组的T细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、M-CSF表达水平显著高于A组(P0.05),B组也显著高于C组(P0.05);B组与C组的T细胞凋亡率低于A组(P0.05),C组显著高于B组(P0.05);B组与C组的Treg百分比降低(P0.05),B组显著低于C组(P0.05)。由此,UCMSC能在体外激活SLE患者T细胞亚群功能,具体表现为促进IL-6、TNF-α、M-CSF表达,抑制T细胞增殖和凋亡,抑制其向Treg分化。     

急性髓系白血病异基因造血干细胞移植前微小残留病检测意义的Meta分析

目的:探讨急性髓系白血病(AML)异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)前微小残留病(MRD)状态与预后之间的关系。方法:计算机检索PubMed数据库、Embase数据库、CNKI数据库、万方数据库，收集符合纳入标准的研究，检索时限均为2016年1月至2018年12月，由两位研究者独立进行文献筛选、资料提取和质量评价后，采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果:Meta分析结果显示:allo-HSCT前MRD阳性与较低的总生存率(HR=2.72，95%CI:2.27~3.25，P<0.000 01)、无白血病生存率(HR=2.64，95%CI:1.93~3.60，P<0.000 01)及较高的累积复发率(HR=4.13，95%CI:3.15~5.40，P<0.000 01)和非复发死亡率(HR=1.64，95%CI:1.09~2.49，P=0.02)相关。结论:allo-HSCT前MRD阳性与移植后较差的预后具有明显的相关性。