从BMSCs探讨“肾主骨生髓”理论指导下中医药治疗骨质疏松症的研究

摘要：骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)是在一定条件下能够向成骨细胞分化的多能干细胞，其增殖分化与中医“肾主骨生髓”理论及骨质疏松症(osteoporosis, OP)关系密切，大量研究表明传统补肾中药诱导BMSCs增殖分化治疗OP疗效显著。本文以中医“肾主骨生髓”理论为指导，探讨“肾藏精-主骨生髓-BMSCs-OP”之间的科学内涵，并探讨“补肾生髓”理论指导下传统补肾中药通过诱导BMSCs成骨分化与OP的关系，结合补肾中药及复方诱导BMSCs治疗OP的现代医学研究，为进一步探索有效的中医药治疗方案及发挥中医药独特优势提供依据。     

溶瘤腺病毒修饰间充质干细胞裂解上清对小鼠乳腺癌细胞4T1生物学特性的影响

目的评价溶瘤腺病毒(rAd)修饰间充质干细胞(MSC)裂解上清对小鼠乳腺癌4T1细胞生物学特性的影响。方法采用携带核心蛋白聚糖(DCN)基因的溶瘤腺病毒rAd.DCN和对照病毒rAd.Null感染MSC,命名为MSC.DCN和MSC.Null。感染后48 h,收集MSC.DCN,MSC.Null和MSC的裂解上清,将其与小鼠乳腺癌细胞4T1共培养,同时设4T1细胞对照组,用实时定量PCR法和Western印迹法检测小鼠乳腺癌4T1细胞DCN mRNA和蛋白表达;通过Dye670标记,用流式细胞术检测4T1细胞增殖;用FITCAnnexinⅤ/PI凋亡试剂盒检测4T1细胞凋亡;通过细胞划痕实验检测4T1细胞的迁移能力。结果 MSC.DCN裂解上清处理后,4T1细胞DCN mRNA和蛋白表达均高于其余2组(P<0.01)。共培养3 d后,与细胞对照组相比,MSC组4T1细胞增殖指数下降(P<0.01);共培养3和5 d后,与MSC组相比,MSC.Null组和MSC.DCN组4T1细胞增殖指数下降(P<0.05),凋亡比例上升(P<0.05);MSC.Null与MSC.DCN组间差异无统计学意义。MSC,MSC.Null和MSC.DCN裂解上清与4T1细胞共培养12 h后,与细胞对照组相比,MSC组迁移率升高(P<0.01);与MSC组和MSC.Null组相比,MSC.DCN组迁移率下降(P<0.05)。结论MSC.DCN裂解上清可抑制小鼠乳腺癌细胞4T1细胞增殖和MSC裂解上清所诱导的4T1细胞迁移,同时促进4T1细胞凋亡。     

兔BP-EPCs对自体BMSCs体外扩增和分化能力的影响研究

[目的]通过研究大耳白兔外周血来源的血管内皮祖细胞(BP-EPCs)对骨髓来源间充质干细胞(BMSCs)体外增殖和分化能力的影响,筛选更有潜力两种细胞共培养系统从而为构建组织工程骨的基础研究和临床治疗提供更多的资料支持。[方法]通过密度梯度离心法结合贴壁法分离纯化兔EPCs和BMSCs,实验分两组:PB-EPCs和BMSCs间接共培养组中BMSCs为实验组,单独BMSCs组为对照组。观察两组细胞形态。对两组第三代细胞进行成骨和成脂诱导并评估两组BMSCs分化能力。[结果]两组细胞体外培养形态规则,增殖能力强,生长曲线呈S型。其中兔EPCs和BMSCs间接共培养组较BMSCs单独培养组细胞增长速度更快,两组差异具有统计学意义(P0.05)。经成骨诱导后,间接共培养组BMSCs出现钙结节时间早且茜素红染色较深,碱性磷酸酶和骨钙素分泌量较单独BMSCs组显著增高,两组差异具有统计学意义(P0.05)。经成脂诱导后,间接共培养组油红O染色较深,两组差异具有统计学意义(P0.05)。[结论]兔EPCs和BMSCs间接共培养组细胞在增殖速度和分化能力方面均优于BMSCs单独培养组,提示将BP-EPCs和BMSCs共培养系统作为种子细胞构建组织工程骨有更大的使用潜能。     

骨髓增生异常综合征患者移植前不同方案治疗对移植后结局影响的Meta分析

目的:系统性评价骨髓增生异常综合征（MDS）患者在异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）前接受不同治疗方案对移植后长期复发及生存的影响。方法:检索Ovid、Cochrane Library、PubMed、Embase、中国期刊全文数据库、中文科技期刊数据库、万方数据库和中国生物医学文献数据库中从建库至2019年12月MDS患者行allo-HSCT前接受不同方案治疗的文献。对符合纳入标准的文献，由2名研究者按Cochrane系统评价方法，独立进行资料提取、质量评价并交叉核对。按治疗方法，将纳入文献中的病例分为去甲基化药物（地西他滨或阿扎胞苷）治疗组（去甲基化治疗组）和传统方案治疗组（包括化疗和支持治疗）（传统治疗组）。采用RevMan 5.3软件对各组总生存（OS）、复发、无复发死亡率（NRM）、无复发生存（RFS）进行分析。结果:共纳入10篇文献。Meta分析结果显示，传统治疗组中，化疗组与支持治疗组间3年OS率[44.6%（146/327）比35.5%（138/389）； OR=0.93，95% CI 0.38~2.27， P=0.87]、复发率[32.4%（106/327）比37.3%（145/389）； OR=1.00，95% CI 0.49~2.05， P=0.99]、NRM[26.3%（86/327）比27.0%（105/389）； OR=1.05，95% CI 0.75~1.49， P=0.77]、RFS率[9.2%（30/327）比12.6%（49/389）； OR=0.74，95% CI 0.26~2.10， P=0.57]差异均无统计学意义。去甲基化治疗组与传统治疗组间3年OS率[40.7%（165/405）比45.9%（290/632）； OR=0.98，95% CI 0.71~1.36， P=0.28]、复发率[32.6%（132/405）比38.3%（242/632）； OR=1.05，95% CI 0.79~2.05， P=0.25]、NRM[27.2%（110/405）比24.8%（157/632）； OR=0.81，95% CI 0.59~1.11， P=0.68]、RFS率[46.7%（189/405）比42.2%（267/632）； OR=0.84，95% CI 0.63~1.12， P=0.85]差异均无统计学意义。无论去甲基化治疗组与化疗组间、还是去甲基化治疗组与支持治疗组间，3年OS率、复发率、NRM、RFS率差异均无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:MDS患者allo-HSCT前接受不同方案治疗对于移植后生存和复发均无明显影响。     

造血干细胞移植相关性血栓并发症的研究进展

造血干细胞移植是目前治疗许多血液系统恶性肿瘤唯一有效的方法,常见的并发症主要有肝静脉闭塞病(VOD)和移植相关性血栓微血管病(TA-TMA)等,本文主要就近几年VOD及TA-TMA的相关研究进行综述。     

人骨肉瘤细胞系HOS肿瘤干细胞样细胞亚群的分离与鉴定

目的探索无血清培养基培养人骨肉瘤细胞系HOS细胞,筛选并鉴定人骨肉瘤细胞系HOS中肿瘤干细胞相关亚群。方法通过无血清悬浮培养初步富集骨肉瘤细HOS肿瘤干细胞,观察其形成肿瘤干细胞球过程中的细胞形态,并在有血清培养基中诱导其分化。各种浓度化疗药物顺铂(CDDP)和阿霉素(DXR)分别处理HOS悬浮细胞球与HOS贴壁细胞,MTT法检测两种细胞对化疗药敏感性。Real-time PCR检测HOS悬浮细胞球与HOS贴壁细胞干细胞相关基因ABCG2、Bmi1、Nanog、Oct3/4、Sox10、STAT3表达情况。将HOS悬浮细胞球与HOS贴壁细胞分别接种于BALB/c裸鼠,观察成瘤情况。结果人骨肉瘤细胞系HOS细胞能够在无血清培养基中存活、增殖并形成肿瘤干细胞球。HOS悬浮细胞球对于化疗药物的敏感性较HOS贴壁细胞高。Real-time PCR结果显示HOS悬浮细胞球较HOS贴壁细胞高表达肿瘤干细胞相关基因ABCG2、Bmi1、Nanog、Oct3/4、Sox10、STAT3。HOS悬浮细胞球体内成瘤能力较HOS贴壁细胞强。结论无血清悬浮培养可以初步富集人骨肉瘤细胞系HOS悬浮细胞球,且这些细胞具有肿瘤干细胞特性。     

从髓论治膝骨关节炎

膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)是一种慢性退行性病变,多见于中老年人群。中医学认为"肾主骨生髓",该理论对KOA的治疗具有重要的指导意义;但是临床上既往多侧重于从肾虚角度治疗该病,而忽视了作为连接肾与骨的髓这一关键环节的作用。本文介绍了髓的内涵与生物学基础,分析了肾、髓、骨之间的联系,从干细胞角度论述了KOA的发病机制,总结了从髓论治KOA的方法,以期为临床治疗KOA提供理论依据。     

补肾中药诱导骨髓间充质干细胞增殖分化防治骨质疏松的研究进展

骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)是干细胞研究领域的热点。BMSCs增殖分化成成骨细胞与中医"肾藏精"理论有一定联系,应用补肾中药干预BMSCs增殖分化防治OP具有良好研究的前景。从中医"肾藏精"理论与BMSCs的关系以及补肾中药(单味中药与单体,中药复方)两个方面,对近年来补肾中药诱导BMSCs增殖分化防治OP的研究进展进行了综述。     

预见性护理干预对骨髓增生异常综合征异基因造血干细胞移植的影响

目的:探讨预见性护理干预对骨髓增生异常综合征(MDS)异基因造血干细胞移植的影响。方法:将2018年1月1日～2020年2月29日就诊的80例MDS患者作为研究对象,根据住院号的奇偶进行分组,住院号奇数为对照组共40例,采用常规护理模式;住院号偶数为观察组共40例,给予预见性护理。比较两组干细胞移植不良反应发生情况、护理前后不良情绪[采用焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)]、生活质量。结果:观察组不良反应发生率低于对照组(P0.01);护理后,观察组SAS、SDS评分均低于对照组(P0.01,P0.05);观察组躯体功能、角色功能、社会功能、认知功能评分均高于对照组(P0.01,P0.05)。结论:针对造血干细胞移植术后出现的并发症可采用预见性护理,有利于降低并发症的发生率,改善患者的心理状态和生活质量,值得临床推广应用。