麻杏石甘汤防治甲型H1N1流感分子机制的生物信息学分析

目的: 通过构建分子网络及解析生物学通路,探讨麻杏石甘汤防治甲型H1N1流感的分子机制。 方法: 查找麻杏石甘汤中药成分的有效化合物,在PubChem数据库中检索有效成分的靶蛋白,在Gene数据库中查找甲型H1N1流感的相关基因,运用Ingenuity Pathway Analysis (IPA)软件对二者进行构图和解析。 结果: 查找到麻杏石甘汤的靶蛋白186个,甲型H1N1流感相关基因7个。二者的分子网络复杂,生物功能多样,在共同作用的8条生物通路中,有4条通路为细胞免疫相关通路:病毒模式识别受体信号通路、巨噬细胞白介素12(IL-12)信号和生产通路、蛋白激酶(PKR)在干扰素诱导的抗病毒反应中作用通路、肿瘤坏死因子受体I (TNFR1)信号通路。麻杏石甘汤可以调节细胞免疫相关通路中的Toll样受体9(TLR9)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、核苷酸结合的寡聚结构域2受体(NOD2)等多个位点。 结论: 麻杏石甘汤可以通过干预细胞免疫相关通路中的多个位点起到防治甲型H1N1流感的作用。     

甘草多糖对人外周血γδT细胞的免疫调节作用

目的:研究甘草多糖(Glycyrrhizae Radix et Rhizoma polysaccharide,GP)对人外周血γδT细胞增殖、分泌细胞因子、杀伤肿瘤细胞的免疫调节作用。方法:采集正常人静脉抗凝血,加入淋巴细胞分离液,密度梯度离心法分离人单核细胞层,经IPP扩增后得到γδT细胞,采用不同质量浓度的甘草多糖(终质量浓度分别为25,50,100 mg.L-1)。CCK-8法检测甘草多糖对γδT细胞增殖的影响,ELISA法检测甘草多糖对γδT细胞分泌干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,CCK-8法检测甘草多糖对γδT细胞杀伤功能的影响。结果:甘草多糖能促进γδT细胞增殖,呈剂量依赖关系;甘草多糖作用后,γδT细胞分泌的IFN-γ和TNF-α明显增多(P<0.01),且呈剂量依赖关系;甘草多糖作用后,γδT细胞对肿瘤细胞HepG2的杀伤能力明显增强(P<0.05)。结论:甘草多糖能够促进人外周血γδT细胞增殖、分泌细胞因子及杀伤肿瘤细胞,这为研究甘草多糖的抗肿瘤及免疫调节机制提供了新的依据。     

文本挖掘探索慢性肾小球肾炎"证-症-方-药"相应规律

目的:探索慢性肾小球肾炎证药相应规律。方法:在CBM数据库中收集治疗慢性肾小球肾炎文献数据,采用基于敏感关键词频数统计的数据分层算法,挖掘慢性肾小球肾炎的证候、症状、汤药及中药的规律,通过一维频次的解释及二维的网络图展示。结果:慢性肾小球肾炎本虚标实,虚证多见,标实以湿热、血瘀、风邪,相关脏腑以肾为主,涉及肺、脾;证候方面以气阴两虚、肝肾阴虚、脾肾阳虚为主;核心症状为浮肿、发热、乏力、腰痛等;汤药和中药的使用均以益气养阴、化湿利水为主。结论:文本挖掘技术,结合文献回溯,人工阅读降噪,能够比较客观的总结中医"证-症-方-药"的规律,为中医客观化,以及中医临床提供有益的探索与参考。     

类风湿性关节炎热证"药-证对应"机制的网络药理学研究

以热证类风湿性关节炎(RA)为切入点,通过构建、分析其对应的分子网络及药物靶标网络,初步探讨“药-证对应”的机制.综合运用定向文本挖掘、PubChem小分子化合物数据库检索、临床典型热证RA患者外周血CD4+T细胞基因组学检测以及Ingenuity Pathway Analysis(IPA)网络构建等研究方法.通过定向文本挖掘,筛选出治疗RA热证的常用中药:黄柏、知母、苍术及牛膝4味中药.通过检索PubChem数据库,找到RA热证的对证中药共有靶蛋白123个.通过基因芯片技术,得到RA热证与正常人比较的差异基因21个.通过IPA软件分别构建RA热证和对证中药靶蛋白的分子相互作用网络.两个网络共有4条相同的生物学通路:GM-CSF(粒细胞巨噬细胞刺激因子)信号通路,CTLA4(细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4)信号通路,T细胞受体信号通路及辅助T细胞中的CD28信号通路.这些细胞免疫反应相关的生物学通路,共同干预了细胞存活、细胞免疫及炎症反应等细胞生命活动.结果表明:RA热证的分子网络和对证中药靶点的分子网络所涉及的共同的生物学通路:GM-CSF信号通路,CTLA4信号通路,T细胞受体信号通路及辅助T细胞中的CD28信号通路可能就是对证中药治疗RA热证“药-证对应”的分子生物学机制之一,具体机制需要进一步验证.     

LIPCAR在慢性心力衰竭及合并肾功能不全患者循环中的表达

目的观察长链非编码RNA预测心脏重构(LIPCAR)在慢性心力衰竭及合并肾功能不全患者循环中的表达。方法收集80例健康对照者、188例慢性心力衰竭患者,其中合并肾功能不全患者80例,用实时荧光定量PCR检测患者循环中的LIPCAR。结果 LIPCAR的表达水平在健康对照组与慢性心力衰竭组之间有显著差异(1.08±0.28比0.79±0.31,P0.01)。对慢性心力衰竭组进行亚组分析发现,LIPCAR在慢性心力衰竭合并肾功能不全患者中表达有进一步降低趋势。此外,LIPCAR与NT-proBNP呈负相关,与射血分数(EF)呈正相关(P0.01)。LIPCAR在判断心力衰竭时,AUC为0.777(95%CI为0.720~0.835)。结论 LIPCAR在慢性心力衰竭及合并肾功能不全患者循环中表达均降低,可作为诊断慢性心力衰竭的潜在生物学标志物。     

雷公藤内酯醇对阿尔茨海默病模型大鼠海马补体C1q表达的影响

目的 探讨雷公藤内酯醇(TP)对阿尔茨海默病模型大鼠海马组织补体C1q表达的影响.方法 30只健康雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组及用药组,每组10只.模型组大鼠双侧海马一次性注射凝聚态Aβ1-40,Morris水迷宫检测判断模型成功与否;对照组大鼠海马注射等量生理盐水;用药组大鼠在模型制作成功后每日腹腔注射雷公藤内酯醇0.4mg/kg,共15d.采用免疫组织化学染色和RT-PCR分别检测C1q蛋白和C1q mRNA在大鼠海马组织的表达.结果 免疫组织化学染色显示,模型组大鼠海马C1q阳性细胞数(67.89±9.22)较对照组(36.27±5.09)明显增多(P＜0.01),平均吸光度(0.2918±0.0347)较对照组(0.1980±0.0183)明显增加(P＜0.01);用药组大鼠海马C1q阳性细胞平均吸光度(0.2514±0.0170)较模型组明显减少(P<0.05).RT-PCR结果显示,模型组大鼠海马C1q mRNA水平(0.722±0.048)明显高于对照组(0.583±0.072)(P＜0.01);用药组大鼠海马C1q mRNA水平(0.656±0.053)较模型组明显下降(P＜0.01).结论 雷公藤内酯醇可抑制阿尔茨海默病模型大鼠海马组织C1q的表达.     

雷公藤内酯醇对阿尔茨海默病模型大鼠海马IL-1α表达的影响

目的:探讨雷公藤内酯醇对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马白细胞介素-1α(IL-1α)表达的影响。方法:30只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组及用药组,模型组及用药组大鼠双侧海马各一次注射Aβ1-40,对照组大鼠双侧海马注射等量生理盐水,模型制作成功后,用药组大鼠每日腹腔注射雷公藤内酯醇0.4mg/kg,共15d。采用免疫组织化学和RT-PCR方法检测IL-1α蛋白和mRNA在大鼠海马的表达。结果:免疫组织化学染色显示,模型组大鼠海马IL-1α阳性细胞数和平均光密度明显高于对照组(P0.01),用药组大鼠海马IL-1α阳性细胞数和平均光密度较模型组明显减少(P0.05或0.01)。RT-PCR结果显示,模型组大鼠海马IL-1αmRNA水平明显高于对照组(P0.01),用药组大鼠海马IL-1αmRNA水平较模型组明显下降(P0.01)。结论:雷公藤内酯醇可抑制AD模型大鼠海马IL-1α的表达。     

突触后致密物与阿尔茨海默病

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)是一种病因未明,以记忆、认知受损为主要表现的中枢神经系统进行性退化性疾病.AD发病机制的各种假说中β淀粉蛋白(β-amyloid protein, Aβ)学说和tau蛋白学说得到较多的认可,但均不能完整地解释AD的发病过程.近来研究表明突触功能改变与认知的关系较为密切.     

雷公藤内酯醇对阿尔茨海默病模型大鼠海马突触素表达及突触超微结构的影响

目的:探讨雷公藤内酯醇对阿尔茨海默病模型大鼠海马突触素表达及突触超微结构的影响.方法:大鼠随机分成对照组、模型组、治疗组.模型组给予双侧海马各一次性注射凝聚态Aβ1-4010μg,治疗组在海马注射凝聚态Aβ1-40后,每日腹腔注射雷公藤内酯醇0 4mg/kg, 15d后用免疫组织化学方法和蛋白免疫印迹技术检测海马突触素表达情况,透射电镜观察突触结构的变化.结果:与模型组相比,治疗组海马区突触素免疫反应阳性产物数量(152 80±15 76)及平均光密度(0 3180±0 0278)均增加;突触素表达总量(1917 71±41 02)及密度比值(0 87±0 03)亦增加;突触结构较清晰,界面增长,突触后电子致密物增厚.结论:雷公藤内酯醇可以增加阿尔茨海默病模型大鼠海马突触素的表达,减轻阿尔茨海默病模型大鼠海马突触损伤程度.     

人参多糖和猪苓多糖对CIA大鼠肠道黏膜免疫细胞功能的影响

目的：观察人参多糖和猪苓多糖对Ⅱ型胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠肠道黏膜淋巴细胞功能的影响。方法：采用皮内注射Ⅱ型胶原（COL-Ⅱ）建立CIA大鼠模型，分离模型大鼠PP结淋巴细胞（PPL）、肠道上皮内淋巴细胞（IEL）和固有层淋巴细胞（LPL），分别与不同浓度的人参多糖和猪苓多糖共培养48h后，检测培养上清中TNF-α和IFN-γ含量的变化。结果：与加入RPMI1640培养液的空白对照组比较，不同浓度的人参多糖和猪苓多糖，均可使PPL分泌TNF-α减少，但使IFN-γ的分泌增加；而IEL和LPL分泌TNF-α和IFN-γ的水平均有不同程度的降低。结论：人参多糖和猪苓多糖对CIA大鼠PPL具有不同的免疫调节作用；而对于IEL和LPL，则可导致其免疫活性降低。