冻存骨髓基质细胞复合材料体内成骨基质的合成能力

摘要 背景: 课题组以往研究显示：体外培养条件下，冻存骨髓基质细胞复苏后仍保持较高的细胞存活率、细胞增殖及成骨分化能力。上述结果仍然需要进一步在体内环境下证实。 目的：观察经超低温冻存后的骨髓基质细胞和支架材料胶原膜BME-10X复合体植入裸鼠体内后Ⅰ型胶原的合成情况。 方法：体外分离培养Beagle犬骨髓基质细胞，冻存12个月后复苏，体外构建骨髓基质细胞和胶原膜材料复合体。分别经矿化诱导培养液、基础培养液培养5 d后，植入裸鼠体内，于术后第4周取出标本，进行大体观察、组织病理学和免疫组化分析，并应用图像分析系统对各组标本中的Ⅰ型胶原进行定量分析。以矿化诱导培养液培养的单纯胶原膜材料为对照组。 结果与结论：对照组在植入胶原膜后，胶原膜边界清晰，膜边缘及内部基本没有细胞生长，Ⅰ型胶原分布很少；在未诱导矿化组，术后第4周可见，胶原膜内有细胞长入，并有细小的条索状新生胶原形成，Ⅰ型胶原分布明显增多；在诱导矿化组，植入后也可见支架材料的分解降解和更多的细胞生长，大量新生的胶原形成类骨质样组织，与前两组对比，Ⅰ型胶原分布增多有显著性意义。结果表明冻存骨髓基质细胞复苏后进行体外培养扩增与诱导分化，并在体内环境下复合胶原支架材料，仍然具有较强成骨能力。 关键词：骨髓基质细胞；胶原膜；免疫组化；裸鼠；成骨能力     

贵州小型香猪皮肤成纤维细胞库的构建

目的：小型猪与人的皮肤组织结构相似，探索一种贵州小型香猪成纤维细胞的分离、培养、传代、冻存、复苏及鉴定方法为组织工程皮肤的构建奠定基础。方法：采用细胞培养技术和组织工程学方法。结果：采用细胞培养技术将贵州小型香猪成纤维细胞传代至23代，此时的细胞数至少是原代培养的细胞数的1&;#215;10^9倍，经冻存、复苏后，猪成纤维细胞仍具有增殖能力，生长状态与原代培养的猪成纤维细胞相类似。结论：通过细胞培养技术和组织工程学的方法可以成功地构建贵州小型香猪成纤维细胞库。     

应用定量组织速度成像技术结合小剂量多巴酚丁胺负荷试验评价心肌存活性

目的　探讨应用定量组织速度成像 (QTVI)技术结合小剂量多巴酚丁胺负荷超声心动图试验 (LDDSE)评价心肌存活性的价值。方法　 2 0例心肌梗死患者均行经皮腔内冠状动脉成形术 (PTCA)或PTCA 支架术。术前 1周内进行LDDSE ,术后 ( >6周 )复查超声心动图。应用QTVI技术获取LDDSE各阶段及术后梗死心肌范围内相邻两取样点的组织速度和位移曲线 ,测量其收缩期最大速度和位移 ,算出其心肌应变 (S)和应变率 (SR)。结果　在术后室壁运动有改善组中 ,LDDSE各阶段以及术后各取样点的收缩期最大速度和最大位移均较术前静息状态时有不同程度提高。LDDSE在 5 μg·kg-1·min-1剂量结束时 ,SR、S均较静息状态时提高 [SR :( 0 .4± 0 .3 )s-1对 ( 0 .2± 0 .2 )s-1,P <0 .0 5 ;S :0 .0 5± 0 .0 4对 0 .0 3±0 .0 1,P <0 .0 5 ] ,而较术后稍低 [SR :( 0 .4± 0 .3 )s-1对 ( 0 .8± 0 .2 )s-1,P <0 .0 5 ;S :0 .0 5± 0 .0 4对 0 .10±0 .0 4,P <0 .0 5 ]。LDDSE在 10 μg·kg-1·min-1剂量结束时 ,SR、R均较静息状态时明显提高 [SR :( 1.0±0 .4)s-1对 ( 0 .2± 0 .2 )s-1,P <0 .0 1;S :0 .10± 0 .0 5对 0 .0 3± 0 .0 1,P <0 .0 1] ,与术后差异无显著性意义[SR :( 1.0± 0 .4)s-1对 ( 0 .8± 0 .2 )s-1,P >0 .0 5 ;S :     

深低温冻存自体造血干细胞回输副反应的观察及护理

目的探讨深低温冻存自体造血干细胞解冻回输过程中如何确保干细胞回输顺利实现。方法回顾性总结了76例次自体造血干细胞移植患者在干细胞解冻回输过程中出现的副反应的观察及护理措施。结果76例次中64.4%发生不同程度的恶心、呕吐、呼吸困难等副反应,此外3l例次(40.7%)出现了心率减慢,38例次(50%)有血压升高等心血管变化。通过有效护理,76例次干细胞回输均顺利完成。结论有效的心理护理、严格的无菌操作、完善的物品准备、操作中严密的观察与护理,是确保深低温冻存自体造血干细胞顺利回输的关键。     

多胎妊娠早期选择性减胎术的护理

随着促排卵药的普遍应用和辅助生育技术的开展，使妊娠率提高，但多胎妊娠成为重要并发症。多胎孕妇在妊娠期和分娩时往往出现多种并发症，严重威胁母婴安全，随着胎数的增加，围产儿病死率及发病率也明显增加，即使多个早产儿存活，其体格与智能素质也可能下降。为避免多胎妊娠及提高妊娠成功率，在妊娠早期行选择性减胎术，有效而安全地控制胚胎及分娩数目，使多胎妊娠转变为双胎或单胎妊娠，既可达到生育目的，又可消除多胎妊娠的不良后果，提高存活儿的成熟与质量，减少多胎妊娠对母婴的损害。因此，实施多胎妊娠选择性减胎术非常必要。我院于2001年8月～2003年3月对8例多胎妊娠患者进行经阴道早期选择性减胎术，现将临床观察及护理报道如下。     

同悦与左氧氟沙星注射液存在配伍禁忌

同悦注射液是丹参与川穹提取制成的无菌水溶液（围药准字z14020747），为棕红色的澄清液体，具有活血化淤、通脉养心的作用。常用于冠心病、心绞痛的治疗。盐酸左氧氟沙星（国家准字H20040629）为广谱抗生素，适用于敏感细菌引起的中重度感染。二者在临床中应用广泛，笔者在临床输液中发现同悦注射液与左氧氟沙星连续静脉滴注时，输液管及茂菲氏滴管中出现乳自色絮状沉淀。为证实两者是否存在配伍反应特进行了以下实验，现报道如下。[第一段]     

大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养纯化及冻存

目的:建立大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外分离培养及冻存的方法。方法:用密度梯度离心法及贴壁培养法分离纯化大鼠骨髓MSCs,并对其形态学特征进行观察,比较两种分离培养法的细胞生长增殖情况。大鼠MSCs在12.5%二甲亚砜(DMSO)保护下放入液氮冻存,6个月后复苏,测其成活率及观察生长增殖情况。结果:用密度梯度离心法及贴壁培养法均能有效地分离大鼠骨髓MSCs,细胞活力好,增殖能力强。大鼠MSCs可用液氮保存,且复苏后细胞生长增殖旺盛,形态无明显的变化。结论:采用密度梯度离心法及贴壁培养法成功地建立了大鼠骨髓MSCs体外分离和培养体系;采用液氮冻存大鼠MSCs的方法十分有效可行。     

多种超声检查方法在评价心肌活性中的应用

再血管化治疗是治疗冠心病的重要举措．但再血管化治疗仅能提高具有存活心肌病人的生存率，无活性的心肌功能不能恢复，因此准确判断存活心肌是有十分重要意义的。理想的评价心肌存活性的方法应提供准确无创地测量灌注、代谢、细胞膜的完整性、收缩及舒张功能，以及能精确地对左室收缩与舒张进行三维重建。     

骨骺软骨细胞的培养和保存方法

目的建立大量生产骨骺软骨细胞的培养方法和保存方法,为组织工程骺软骨的培养提供种子细胞。方法2周龄兔胫骨上端骨骺软骨经机械剪切和化学消化后,接种、培养及液氮冻存。通过显微镜观察其生物学表现,并通过蕃红花“O”染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色对其生物学特征进行鉴定。结果在体外观察到了骨骺软骨细胞从静止、增殖到肥大这个近似体内的生长过程,经多次传代后增殖能力降低,经过冻存的细胞生物学特征不变。蕃红花“O”和Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性。结论我们成功地建立了骨骺软骨细胞的培养和冻存方法,并证明培养出的细胞是骨骺软骨细胞。     

MRI增强延迟扫描在心肌梗塞后存活性评价中的价值探讨

目的探索评价MRI增强延迟扫描技术对判断心肌存活性的价值。方法 20例患者行MRI增强延迟扫描检查,分析心肌延迟扫描图像并探索评价心肌存活性。结果 17例左室心肌未见梗塞灶,增强延迟扫描MR表现为均匀一致低信号,心肌内无对比剂存留。3例陈旧性心肌梗死表现为左心室病变区局限性信号不均匀增高,对比剂存留。结论 MRI增强延迟扫描技术可对心肌存活性作出一定评价,为患者制订治疗方案和预后评价提供信息。