慢病毒介导的Isl1基因在人骨髓间充质干细胞中的表达

研究慢病毒介导的Isl1基因在人骨髓间充质干细胞(hMSC)中的表达情况,并检测其下游基因Nkx2.5和Flk-1的表达。方法 多位点Gateway载体构建技术构建2K7puro/EF 1α-Isl1慢病毒表达载体(由EF1α启动子启动Isl1基因表达)。包装细胞293FT细胞获得慢病毒,再转染至hMSC。利用嘌呤霉素抗性筛选出Isll阳性细胞。应用RT-PCR、Western blotting检测hMSC中Isl1基因在转染后1～6周的mRNA和1～4周的蛋白表达情况。结果　成功构建了慢病毒载体EF1α-Isl1,转染后hMSC中检测出Isl1基因mRNA和蛋白的表达,其mRNA表达随着培养时间延长而上调,第3周表达量(0.65±0.14)较1、2周增多(0.36±0.09,0.37±0.05,均P＜0.05),3周后表达趋于稳定。转染后在无任何诱导剂的情况下,检测到Isl1下游基因Nkx2.5的表达,但尚未见Flk-1的表达。结论通过慢病毒载体将Isl1基因转染hMSC后,可获得长期稳定的表达,并在无任何诱导剂的情况下,能促进下游基因Nkx2.5的表达。     

年龄与性别在冠状动脉钙化程度和冠心病诊断价值中的影响

目的：探讨年龄和性别在电子束CT（EBCT）测定冠状动脉钙化（CAC）程度及其对冠心病诊断价值的影响。方法：2642例患行EBCT检测CAC并计算每例的总积分,分析年龄和性别与CAC检测阳性率及CAC总积分的关系;其中同期经选择性冠状动脉造影检查的患432例,评价CAC对冠心病的诊断价值及年龄和性别的影响。结果：（1）2642例患总的检测阳性率为69．3％,其中男性和女性分别为73．1％和60．4％,阳性率男性显高于女性（P＜0．001）。两性的阳性率都随年龄增大而增高;70岁以下各年龄组男性均明显高于女性,但60岁以后两性差距逐渐缩小,70岁以上各年龄组两性间比较,差异无显性;（2）男女两性钙化积分的自然对数转换值的均数都年龄增大而增高,性别差异与年龄阳性率相似;（3）CAC诊断冠心病的敏感性、CAC诊断冠心病的敏感性在≥60岁男性组最高,＜60岁女性组最低;而诊断特异性则与之相反。结论：冠状动脉钙化程度随年龄增大而加重,男性一般重于同龄女性,但60岁以后女性钙化程度迅速增加并逐渐接近同龄男性;年龄和性别对冠状动脉钙化诊断冠心病的价值有很大影响。     

体外反搏的生物力学效应与血管内皮功能

体外反搏通过反搏过程中产生的双脉动血流,加速动脉系统的血液流动,提高血流切应力,进而调控与血管内膜保护有关的细胞因子,产生对抗动脉粥样硬化的有益作用.本文简要总结近10年来本实验室在体外反搏与血管内皮细胞形态、功能关系方面的研究工作,重点阐述其血流动力学特点和对冠心病患者及实验动物血浆及组织中某些重要的生物活性物质的影响.单独体外反搏,或与其他治疗方法配合,可能成为一项有效的促进血管内皮细胞结构与功能修复的重要手段.与反搏作用相关的细胞分子基础及其信号转导途径尚有待进一步阐明.     

体外反搏对心肌梗死恢复期犬外周血管阻力的影响

体外反搏对心肌梗死恢复期犬外周血管阻力的影响     

冠心病患者血清IGF-I浓度检测的临床意义

目的探讨血清IGF-I浓度检测对估价冠心病患者左室功能及冠脉侧支循环状况的临床意义。方法应用放射免疫分析法检测4l例冠心病患者和15例正常人的血清IGF-I浓度;冠心病患者均行选择性冠状动脉造影,按Ren-trop法对侧支循环分级;左室造影测左室射血分数(LVEF)。结果冠心病患者组血清IGF-I浓度与正常对照组比较无显著性差异[(107.92±44.74)n/mLvs(113.05±33.65)n/mL,P＞0.05]。冠心病组中,IGF-I水平≥120ng/mL的A亚组LVEF及Rentrop侧支循环分级均显著高于IGF-I水平＜ 120ng/mL的B亚组(LVEF0.62±0.13vs0.5l±0.12,P＜0.01;Rentrop1.56±0.96vs0.12±0.33,P＜0.001)。IGF-I水平与LVEF(r=0.45,P＜0.001)及Rentrop侧支循环分级(r=0.74,P＜0.001)均呈显著正相关。结论较高的IGF-I水平可能提示冠心病患者有较好的左室功能和冠脉侧支循环;血清IGF-I浓度检测可作为估价冠心病患者左室功能及冠脉侧支循环状况的指标。     

血浆降钙素基因相关肽与冠心病患者冠状动脉病变严重程度及左心室功能的关系

为探讨血浆降钙素基因相关肽浓度与冠心病患者冠状动脉病变严重程度及左心室功能的关系 ,应用放射免疫法检测 42例选择性冠状动脉造影主要分支狭窄≥ 70 %的患者和 15例正常人的血浆降钙素基因相关肽浓度 ,并作Leaman冠状动脉记分 ,左心室造影测左心室射血分数 ,研究血浆降钙素基因相关肽浓度与Leaman冠状动脉记分及左心室射血分数之间的关系。结果发现 ,冠心病患者血浆降钙素基因相关肽浓度明显低于正常对照者(2 76 .12± 16 4.75ng/L比 411.44± 110 .32ng/L ,P <0 .0 1) ;血浆降钙素基因相关肽浓度与Leaman记分呈显著负相关 (r=- 0 .6 1,P <0 .0 0 1) ,而与左心室射血分数呈显著正相关 (r=0 .5 7,P <0 .0 0 1) ;患者全组Leaman记分与左心室射血分数无明显相关 ,但在血浆降钙素基因相关肽浓度 <2 5 0ng/L的亚组 ,Leaman记分与左心室射血分数呈显著负相关 (r=- 0 .49,P <0 .0 5 )。结果提示 ,血浆降钙素基因相关肽水平与冠心病患者的冠状动脉病变严重程度和左心室功能均有一定关系 ;血浆降钙素基因相关肽水平降低的冠心病患者左心室功能随冠状动脉病变的加重而减退。血浆降钙素基因相关肽浓度变化可能在冠状动脉粥样硬化的发生发展及冠心病患者左心室功能降低的发病机制中有一定意义。     

稳定型与不稳定型心绞痛患者电子束CT 冠状动脉钙化检测的比较

【目的】比较稳定型心绞痛（SAP）与不稳定型心绞痛（UAP）患者冠状动脉(冠脉)钙化（CAC）的不同模式。【方法】67例SAP与94例UAP患者,行选择性冠脉造影和电子束CT（EBCT）检查,分析两组CAC积分（CS）的差异及其与冠脉狭窄程度之间的关系。【结果】①SAP组CAC检测阳性率（100%）显著高于UAP组（87.23%）（P<0.05）。②SAP组CAC积分显著高于UAP组,其自然对数转换值［ln（CS+1）］的均数按心脏整体计算为（5.24±1.72）对（3.13±1.96）（P<0.001）,按冠脉分支计算为（3.28±2.08）对（1.68±1.62）（P<0.001）。③在每一相同的年龄段内比较,SAP组的CAC程度均明显高于UAP组。④ln(CS+1)与冠脉狭窄程度在两组均呈正相关,但SAP组相关程度相对较好;SAP组重度狭窄的冠脉多发生重度或中度钙化,而UAP组重度狭窄的冠脉则多数无钙化或仅有轻度钙化。【结论】稳定型与不稳定型心绞痛患者冠脉钙化存在不同的模式,前者冠脉钙化大多较为严重,钙化积分与冠脉狭窄程度的相关性较好,而后者钙化程度多数较轻,钙化积分与冠脉狭窄程度的相关性很差。     

P2Y12基因多态性与冠心病患者氯吡格雷抵抗的相关性研究

目的探讨冠心病患者血小板二磷酸腺苷(ADP)受体亚基12(P2Y12)基因多态性位点rs6798347的分布特征及其与氯吡格雷抵抗的相关性。方法入选91例经冠状动脉造影或CT冠状动脉造影确诊的冠心病患者。给予充分的氯吡格雷治疗后,运用富血小板血浆光学法来测定患者服药后最大血小板聚集率。根据最大血小板聚集率将患者分成氯吡格雷抵抗组(CR)30例和非氯吡格雷抵抗组(NCR)61例。应用Mass ARRAY时间飞行质谱技术对患者P2Y12基因单核苷酸多态性位点rs6798347进行基因分型,比较两组患者基因型的分布情况以及不同基因型之间血小板聚集率的差异。结果 91例患者rs6798347成功分型90例,其中CR组(29例)的GG、AA、AG基因型分别有14例(48.28%)、5例(17.24%)、10例(34.48%);NCR组(61例)的GG、AA、AG基因型分别有33例(54.10%)、5例(8.20%)、23例(37.70%)。两组基因型分布差异无统计学意义(均为P>0.05),携带突变型等位基因A的患者服氯吡格雷后最大血小板聚集率有升高趋势(45.21%±16.67%比51.63%±16.18%,P=0.068);部分CR的患者服用氯吡格雷后最大血小板聚集率高于其未服药时的基线值(68.70%±13.59%比58.90%±4.93%,P=0.046);各基因型之间冠状动脉病变支数的差异无统计学意义(均为P>0.05)。CR组与NCR组之间总胆固醇[(4.11±1.12)mmol/L比(4.81±1.34)mmol/L,P=0.015]和低密度脂蛋白胆固醇[(2.18±0.81)mmol/L比(2.57±0.89)mmol/L,P=0.049]水平差异均有统计学意义;但两组患者其余临床资料差异无统计学意义(均为P>0.05)。结论 (1)血小板膜P2Y12受体基因多态性位点rs6798347与冠心病患者CR的发生无明显关系;(2)血小板膜P2Y12受体基因多态性位点rs6798347的突变型等位基因可能影响氯吡格雷抗血小板聚集的能力。     

腹部手术患者麻醉诱导期间液体治疗对皮肤微循环灌注的影响

目的 观察腹部手术患者麻醉诱导期间静脉输注羟乙基淀粉和乳酸钠林格氏液后皮肤微循环灌注的变化,比较晶体液和胶体液治疗方案对微循环灌注的影响.方法 择期拟行腹部手术患者36例,ASAⅠ或Ⅱ级,年龄18～64岁,随机分为2组(n=18):羟乙基淀粉组(HES组)和乳酸钠林格氏液组(RL组).HES组和RL组分别静脉输注6%羟乙基淀粉130/0.4或乳酸钠林格氏液各7 ml/kg补充麻醉致血管扩容量.同时均静脉输注乳酸钠林格氏液8 ml·kg~(-1)·h~(-1)补充生理需要量和禁食禁饮丢失量.液体治疗后40 min静脉注射异丙酚.罗库溴铵-芬太尼麻醉诱导,气管插管,20 min后开始手术.于液体治疗前(T_0,基础状态)、气管插管后即刻(T_1)、手术开始前即刻(T_2)行动脉血气分析,同时记录患者前额皮肤的微循环灌注量(SMP)和CVP,计算各时点SMP较基础值的变化率(△SMP).结果 与RL组比较,HES组T_1时CVP和△sMP升高(P<0.05或0.01),血气分析各指标差异无统计学意义(P>0.05).与T_0时比较,HES组T_1时△SMP升高(P<0.01),RL组差异无统计学意义(P>0.05),两组T2时△SMP均降低(P<0.01),两组T_(1,2)时CVP和PaO_2/FiO_2升高,Hb降低(P<0.05).与T_1时比较,两组T_2时△SMP均降低(P<0.01).结论 腹部手术患者麻醉诱导期间静脉输注6%羟乙基淀粉130/0.4较乳酸钠林格氏液可更好地改善机体微循环灌注.     

非ST段抬高急性冠状动脉综合征患者妊娠相关血浆蛋白A水平与冠状动脉介入治疗预后的关系

目的探讨非ST段抬高急性冠状动脉(冠脉)综合征患者循环妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)水平与经皮冠脉介入治疗(PCI)术预后的关系。方法检测86例单支冠脉病变的非ST段抬高急性冠脉综合征患者(不稳定型心绞痛58例,非ST段抬高急性心肌梗死28例)PCI术前PAPP-A和高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平,考察其冠脉病变形态和术前术后罪犯血管供血区域的TIMI心肌灌注分级(TMPG),分析它们与术后随访1年内的主要心血管事件联合终点之间的关系。结果与无心血管事件患者比较,有心血管事件的患者术前hs-CRP水平较高(P=0.016),PAPP-A水平也明显升高[(28.55±20.21)mIU/L比(19.37±15.24)mIU/L,P=0.007],男性患者、高脂血症患者和有复杂病变的患者也较多。随访(9.7±3.0)个月期间,19例(22%)患者发生心血管事件;低PAPP-A的患者无心血管终点事件生存率较高(log rank=7.881,P=0.049),而PAPP-A≥15.41 mIU/L是强的联合终点事件预测因子(OR=2.23,95%CI:1.27～5.33,P=0.021)。结论 PAPP-A水平对单支血管病变的非ST段抬高急性冠脉综合征患者PCI术后的中期预后有预测作用。