CD20 和CD19 双靶点CAR-T细胞对B淋巴细胞肿瘤的杀伤作用

目的：设计同时靶向B淋巴细胞表面CD20 和CD19 两个抗原蛋白的双特异嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor,CAR）并制备BiCAR-T 细胞，检测其对B淋巴细胞肿瘤细胞的杀伤作用以及对免疫缺陷B-NSG 小鼠白血病模型的治疗效果。方法：构建基于鼠源CD19 和人源化CD20 scFv 的双靶点CAR分子，将CAR基因装载于慢病毒载体中，在293T细胞中包装慢病毒，感染健康人T 细胞制备BiCAR-T 细胞。构建表达CD19 和CD20 的K562-CD19-GFP、K562-CD20-GFP 以及表达Luciferase 的Nalm6-Luc-GFP 细胞作为靶细胞，将BiCAR-T 细胞与靶细胞共同孵育，检测其对靶细胞杀伤能力及释放IFN-γ 水平。使用Nalm6-Luc-GFP 细胞构建白血病小鼠模型，尾静脉注射BiCAR-T细胞，通过小动物成像方法观察BiCAR-T细胞对荷瘤小鼠的治疗作用。结果：健康人来源的BiCAR-T 细胞经7 d 培养后扩增良好，扩增倍数为20~50 倍，阳性率为10%~92%，显示成功制备BiCAR-T细胞。在效靶比为10∶1 时，BiCAR-T细胞对Nalm-6、K562-CD19-GFP 和K562-CD20-GFP 的杀伤率显著高于对照组细胞[ （76.7±7.4）% vs（8.7±2.4）%、（93.3±5.2）% vs（46.7±6.2）、（51.0±0.8）vs（30.7±0.5）%，均P<0.01]；与对照组相比，与Nalm-6细胞共孵育后BiCAR-T 细胞分泌IFN- γ 量显著增加[（872.7±7.7）vs（101.0±5.3）pg/ml ，P<0.01]。动物实验表明，BiCAR-T细胞对B-NSG小鼠白血病模型治疗效果明显，注射BiCAR-T细胞后白血病细胞逐渐减少，第50 天时基本消失，小鼠全部存活至第70 天被安乐死；PBS和对照T细胞组小鼠分别在（19±3）和（20±1）d 全部死亡。结论：成功设计了表达CD19 和CD20 的双靶点CAR分子后成功制备了BiCAR-T 细胞，该细胞能够有效杀伤表达CD19 和/或CD20 的B淋巴细胞肿瘤细胞，与靶细胞共同孵育后能够分泌大量IFN-γ，对B-NSG免疫缺陷小鼠白血病模型具有明显的治疗效果。     

赵红治疗多囊卵巢综合征经验

多囊卵巢综合征(polycysticovariansyndrome,PCOS)是青春期少女和生育期妇女最常见的妇科内分泌疾病之一。赵红教授从事中医妇科临床、教学、科研工作35年,具有丰富的妇科临床经验。赵教授认为PCOS属于疑难杂症,病情复杂多变,需衷中参西,仔细分辨,辨证准确,方可获效。治疗上重视以“肾虚”为主线,或补肾祛湿化痰;或补肾活血化瘀;或补肾健脾;或清肝利湿,佐以补肾。同时参照西医学检查,根据患者具体情况,或先治其标,再治其本;或标本兼治,或攻补兼施。     

消毒湿巾对医院消毒供应中心四个接触位点的消毒效果观察

目的探讨消毒供应中心检查包装及灭菌区域4个高频接触位点的清洁程度在消毒后随时间变化的规律,为制定合理的清洁消毒频率提供依据。方法选择中日友好医院消毒供应中心检查包装及灭菌区域的4个手频繁接触位点灭菌器把手、封口机把手、扫描枪及清洗机推车把手,应用ATP生物荧光检测技术分别于清洁消毒前、消毒湿巾擦拭后即刻、擦拭后4 h、擦拭后8 h对上述位点进行检测采样,记录每个位点的不同采样时间点的ATP相对发光单位(RLU)值,并进行比较。结果医院消毒供应中心检查包装及灭菌区域的灭菌器把手、封口机把手、扫描枪及清洗机推车把手在清洁前的ATP检测合格率分别为27.3%、0%、9.1%和18.2%,不同位点的ATP检测值差异有统计学意义(F=4.248,P=0.110)。环境表面湿巾擦拭后即刻各位点的合格率分别为90.9%、90.9%、81.8%和100%,扫描枪ATP检测合格率显著低于其他位点;环境表面湿巾擦拭后4 h各位点合格率为18.2%～54.5%,8 h后各位点合格率为0%～36.4%,均较清洁消毒后即刻有显著的降低。结论消毒湿巾可有效地对医院消毒供应中心检查包装及灭菌区域手频繁接触位点进行清洁和消毒,环境表面清洁消毒后4 h污染程度即明显增加。     

尿酸对骨质疏松症骨代谢作用机制的研究进展

<正>骨质疏松症是一种以骨量减少和骨组织微结构退化为特征的骨骼疾病,病理表现为骨张力和强度降低,患者脆性骨折的风险增加[1]。在我国,50岁以上人群骨质疏松症患病率女性为20.7%、男性为14.4%[2]。骨质疏松症的主要后果是当骨质结构破坏到达一定程度,骨质由于脆弱而易于骨折,造成患者残疾甚至死亡,给社会带来巨大的医疗负担[3]。尿酸(uric acid,UA)是体内嘌呤代谢的产物,正常状态下的UA在血中为可溶性状态。当UA产生过多、排     

静脉药物配置中心分拣中的差错分析及改进措施

<正>我院静脉药物配置中心(PIVAS)采用统排、统配的工作模式,为全院40个病区提供静脉药物配置服务,日工作量3200袋左右。由于工作量大,工作人员专业性的不同,管理经验的欠缺,导致差错难以避免~([1])。分拣差错在医院PIVAS工作中普遍存在,极少数医院通过增加智能化分拣设备减少差错数量~([2]),但大部分医院由于成本问题无法引进设备。我院静配中心在2018年12月～2019年1月接到临床科室反馈,分拣差错共计80份。出现差错后中心需要寻找配置成品或重新配置后再次配送。此过程增加了患者     

脑干听觉诱发电位在面肌痉挛显微血管减压术中的应用价值

目的探讨脑干听觉诱发电位（BAEPs）V波潜伏期和（或）波幅的变化与面肌痉挛（HFS）显微血管减压术（MVD）后听力损失的应用价值。 方法选取中日友好医院神经外科自2015年9月至2019年8月行MVD治疗的HFS患者的临床资料，分析MVD始末BAEPs的V波潜伏期和波幅的变化以及手术前后听力状况的改变，听力学评估采用平均纯音听力阈值及言语识别率改变。根据美国耳鼻咽喉头颈外科学会分级方法，将术后患者听力分为听力未明显下降组和听力明显下降组。收集术中全程的BAEPs改变，并将BAEPs的V波术中改变分为：无显著异常，单纯V波潜伏期（LwV）延长>1.5 ms，单纯V波波幅（AwV）下降>50%，LwV延长>1.5 ms且AwV下降>50%，LwV延长>1.5 ms或AwV下降>50%，对5组分类模式下术后听力损伤程度与分组的相关性进行统计分析，并分析4组BAEPs改变对术后听力损伤的预测价值。 结果本研究纳入的1009例行MVD治疗的HFS患者中，943例患者听力未明显下降，66例患者术后听力异常，术中BAEPs监测波形无显著改变，术后出现听力下降5例（0.6%）；术中仅LwV延长>1.5 ms，术后出现听力下降4例（18.2%）；术中仅AwV降低>50%，术后出现听力下降19例（25.0%）；术中"LwV延长>1.5 ms且AwV降低>50%"，术后出现听力下降38例（64.4%）；术中"LwV延长>1.5 ms或AwV降低>50%"，术后出现听力下降61例（38.8%）。各组的阳性预测值比较，结果显示"LwV延长>1.5 ms且AwV降低>50%"最高；"LwV延长>1.5 ms或AwV下降>50%"组的敏感度最高；"LwV延长>1.5 ms且AwV下降>50%"组的特异度最强。 结论术中BAEPs监测可为MVD术者提供听力参考。术末V波潜伏期延长1.5 ms且波幅降低50%以上阳性预测值最高。术中根据BAEPs监测结果及时调整手术策略，可有效改善术后听力障碍的发生率。     

连线专家团

正强大的专家阵容,你想向谁咨询?登录www.baby023.com"杂志征集"板块,找到"连线专家团征集帖",将宝宝的一日饮食安排、生长发育以及日常基本养护情况发给我们,将得到专家"一对一"的贴心指导。宝宝:陈妍希性别:女月龄:11个月身长:78cm体重:10kg AM8:00母乳120mL(有时会喂粥和鸡蛋黄)9:30水果12:00虾仁菠菜粥或紫薯粥PM13:30酸奶/水果/小饼干16:00奶粉120mL20:00母乳120mL24:00母乳120mL每天总饮水量360mL(加钙)     

甲氨蝶呤致肝纤维化1例

<正>患者男性,61岁,主因"发现肝酶升高2年,AFP升高1个月"入院。患者2年前门诊查肝功能示肝酶升高,(数值不详),无恶心、纳差等不适,不规律使用保肝药物(异甘草酸镁注射液、甘草酸二胺肠溶胶囊),治疗后可降至正常,但复查仍反复出现转氨酶升高。1个月前就诊我科,查ALT升高(52 IU/L),AFP升高(74.75ng/ml),予双环醇保肝治疗。1d前复查ALT 38IU/L,AFP 62.98ng/ml;腹部超声示弥漫性肝损伤、脾大;肝脏弹性超声:11.81KPa(F3～F4)。既     

成人重度牙周炎患者正畸治疗的研究进展

<正>目前对于牙周炎患者正畸治疗的研究多集中在轻、中度牙周炎的人群,并已证实在牙周炎症得到控制,口腔卫生良好的情况下,正畸治疗不会导致牙周组织破坏~([1])。而针对成人重度牙周炎,包括侵袭性牙周炎患者的正畸治疗研究较少。在临床工作中,正畸医生也常认为重度牙周炎患者的正畸治疗难度过大,风险过高,开展治疗较少,也缺乏规范化的治疗标准。因此,需要有更多的研究验证重度牙周炎行正畸治疗是否安全、会否加重炎症。本文对目前重度牙周炎患者正畸治疗的现状及正畸治疗后的牙根吸收状况进行文献综述,以期为今后此类治疗的进一步开展及