Effect of oxymatrine on hepatic gene expression profile in experimental liver fibrosis of rats

Objective:To investigate the effects of oxymatrine on hepatic gene expression profile in a rat model of liver fibrosis.Methods:Forty healthy male SD rats were randomly divided into three groups,a normal group（n=8）,a model group（n=16）,and an oxymatrine treatment group（n=16）.Experimental hepatic fibrosis was induced by subcutaneous injection of carbon tetrachloride（CCI₄）.The rats in the treatment group received oxymatrine via celiac injection at a dosage of 40 mg/kg once a day at the same time.The rats in the model and normal groups received saline at the same dosage via celiac injection.Serum levels of aspartate aminotransferase （AST）,alanine transarninase（ALT）,alkaline phosphatase（AKP）,hyaluronic acid（HA）,and laminin（LN）were assayed.The deposition of collagen was observed with HE and Masson staining.Effect of oxymatrine on hepatic gene expression profile was detected by oligonucleotide microarray analysis with Affymetrix gene chip rat U230A. Quantitative real-time polymerase chain reaction（QRT-PCR）was carried out to confirm the expression changes of six genes.Results:Oxymatrine significantly improved liver function,lowered serum levels of HA and LN,and decreased the degree of liver fibrosis,compared with the model group（P<0.05）.A total of 754 differentially expressed genes were identified by gene chip between the model group and the normal group,among which 438 genes increased and 316 genes decreased over two folds.Compared with the model group,86 genes were downregulated markedly in the oxymatrine group（P<0.05）,including collagen I and other genes related to extracellular material（ECM）,integrin signal transduction genes,early growth response factor genes,and proinflammatory genes;28 genes were upregulated significantly（P<0.05）,including cytochrome P450（CYP450） superfamily genes,glycolipids metabolism and biological transformation related genes.Six genes were confirmed with QRT-PCR,consistent with the result from microarray.Conclusion:Oxymatrine could affect the expression of many functional genes and may be useful in the prevention and treatment of liver fibrosis.     

苦参素对人肝正常细胞L02影响的实验研究

目的探讨不同浓度苦参素(OM)作用不同时间对人肝正常细胞L02的损伤作用或不良反应。方法体外培养人肝正常细胞L02;采用MTT法观察不同浓度的OM作用不同时间后观察肝正常细胞L02细胞形态变化及增殖的情况。结果倒置显微镜下观察:与阴性对照组相比较,OM作用时间在24h、浓度为0～2.0mg/ml时L02细胞的形态及数量无明显变化,当作用时间超过24h后,随着时间延长、浓度增加,OM实验组L02细胞收缩变小、与周围细胞分离、细胞核周围较多空泡样结构均越明显,细胞数量逐渐减少。MTT检测结果显示:①当作用时间在24h时,与阴性对照组相比较,OM浓度为0.5mg/ml、1.0mg/ml、2.0mg/ml时对正常肝细胞L02的增殖无明显抑制作用(P>0.05),浓度为3.0mg/ml、4.0mg/ml、8.0mg/ml时对人肝正常细胞增殖有不同程度的抑制作用(P<0.05),其抑制率分别为8.48%、15.43%、51.72%;②OM 1.0mg/ml、2.0mg/ml、3.0mg/ml、4.0mg/ml、8.0mg/ml各浓度组作用于L02细胞48h和72h的抑制率分别为18.79%、26.06%、27.58%、31.52%、76.36%和33.20%、38.53%、41.82%、55.61%、89.95%。与24h相比较,作用48h、72h对正常肝细胞的增殖有不同程度的抑制作用(P<0.05或P<0.01)。结论 OM在低浓度短时间内对人正常肝细胞L02无明显损伤或不良反应,但随着浓度增加、作用时间延长对人正常肝细胞L02的增殖有不同程度的损伤或不良反应,且呈时间-剂量依赖性。     

注射用丹参多酚酸盐联合苯溴马隆治疗痛风性关节炎的临床研究

目的探讨注射用丹参多酚酸盐联合苯溴马隆胶囊治疗痛风性关节炎的临床疗效。方法选取2019年7月—2020年9月在河南省洛阳正骨医院就诊的92例痛风性关节炎患者,按照随机数字表法分为对照组和治疗组,每组各有46例。对照组口服苯溴马隆胶囊,50mg/次,1次/d。治疗组在对照组基础上静脉滴注注射用丹参多酚酸盐,200mg/次,1次/d。两组患者连续治疗4周。观察两组的临床疗效,比较两组的疼痛消失时间、红肿消失时间,检测两组血清中白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-1β(IL-1β)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、血尿酸、血沉水平。结果治疗后,治疗组的总有效率为93.48%,对照组的总有效率为78.26%,两组对比有明显差异(P<0.05)。治疗后,两组患者的视觉模拟评分法(VAS)评分显著降低(P<0.05);治疗组VAS评分降低更明显(P<0.05)。治疗后,治疗组的疼痛消失时间、红肿消失时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组的IL-8、IL-1β、血尿酸、血沉显著降低,TGF-β1显著升高(P<0.05);治疗后,治疗组的IL-8、IL-1β、血尿酸、血沉低于对照组,TGF-β1高于对照组(P<0.05)。结论注射用丹参多酚酸盐联合苯溴马隆胶囊可提高痛风性关节炎的临床疗效,减轻疼痛程度,降低炎症因子水平。     

氧化苦参碱的肾脏保护作用及其机制的研究进展

氧化苦参碱具有抗肾缺血再灌注损伤、抗内毒素性肾损伤、抗四氯化碳致慢性肾损伤、抗阿霉素肾病、抗输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化和抗高糖、高脂诱导的肾脏纤维化的作用。氧化苦参碱肾脏保护作用的作用机制是抗氧化、抗炎、降血糖、调血脂作用,抑制活性氧(ROS)/TLR4、PERK/ATF4/CHOP、JAK2/STATs、TGF-β1/Smads和NF-κB/TNF-α信号通路,减轻肾损伤炎症反应和细胞外基质沉积,阻滞肾损伤和纤维化。     

HPLC 同时检测山豆根中苦参碱和氧化苦参碱含量简

目的建立离子交换树脂纯化．HPLC分析方法用于同时测定山豆根中苦参碱和氧化苦参碱含量。方法山豆根药材提取液经阳离子交换树脂柱纯化后,以C-18化学键合硅胶为固定相,流动相为乙腈-0．2％磷酸-三乙胺（8：92：0．01;V／V／V）,检测波长208nm。结果在本文建立的分析条件下。苦参碱和氧化苦参碱的色谱保留时间分别约为5．5min和8．1min,10min内可完成1次分离分析过程。苦参碱进样浓度在1．0～300．0μg·ml-1范围与峰面积线性关系良好（r2=0．9996）。氧化苦参碱进样量在2．0～600．0μg·ml-1范围与峰面积线性良好（r2=0．9998）。苦参碱、氧化苦参碱平均测定回收率分别为90．5％和91．6％,方法已应用于同时测定不同产地山豆根药材中苦参碱和氧化苦参碱含量。结论山豆根样品经纯化分离后,苦参碱、氧化苦参碱与药材中其余内源性物质分离完全,定量准确．方法适用于山豆根药材质量控制及其药品含量检测。     

氧化苦参碱对脑外伤大鼠脑组织IL-1β、 TNF-α 和IL-6水平的影响

目的:观察氧化苦参碱对脑外伤大鼠脑组织白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)水平的影响。方法:选用健康雄性Wistar大鼠140只,随机分成假手术组、脑外伤组、氧化苦参碱大剂量组及小剂量组,每组35只,利用改进的Feeney自由落体损伤装置制作脑外伤动物模型,分别于脑外伤模型形成后给予0.9%氯化钠注射液1mL及不同剂量氧化苦参碱(60和120mg/kg)腹腔注射,1天1次,共5天,在脑外伤后2h、6h、12h、1d、2d、3d和5d断头获取脑组织,利用酶联免疫吸附试验测定脑组织IL-1β、TNF-α和IL-6水平。结果:脑外伤后2h、6h、12h、1d、2d、3d和5d,氧化苦参碱小剂量组大鼠脑组织IL-1β、TNF-α和IL-6水平与脑外伤组比较,差异无统计学意义(P>0.05);脑外伤后12h、1d、2d、3d和5d,氧化苦参碱大剂量组大鼠脑组织IL-1β、TNF-α和IL-6水平较脑外伤组显著减少(P<0.05),脑外伤后2h和6h,氧化苦参碱大剂量组大鼠脑组织IL-1β、TNF-α和IL-6水平与脑外伤组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:氧化苦参碱可抑制脑外伤大鼠脑组织的炎症反应。     

乙肝胶囊治疗慢性乙型肝炎肝纤维化临床研究

目的:评价乙肝胶囊治疗乙型肝炎肝纤维化的疗效。方法:将60例慢性乙型肝炎肝纤维化患者随机分为两组:乙肝胶囊治疗组30例(A组)、苦参素胶囊治疗组30例(B组),治疗前后分别进行肝功能、肝纤维化血清学指标检测。结果:肝功能治疗前后比较,A组P<0.01,B组P<0.05;A组与B组比较P<0.05。肝纤维化血清学指标治疗前后比较,A组P<0.05,P<0.01,B组P>0.05;A组与B组比较,P>0.05。结论:乙肝胶囊有一定的抗慢性乙型肝炎肝纤维化作用。     

生物碱类化合物抗病毒活性及其机制研究进展

生物碱是普遍存在于植物体内的含氮次生代谢产物,具有广泛的生物活性。研究表明,生物碱类化合物对多种病毒表现出良好的抑制作用和广谱的抗病毒活性,成为近年来抗病毒小分子化合物研究的新焦点。研究证实,生物碱对甲型流感病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、单纯疱疹病毒、艾滋病毒、寨卡病毒、柯萨奇病毒和烟草花叶病毒等表现出显著的抑制作用,其抗病毒机制主要包括抑制病毒吸附和进入、减少病毒RNA和蛋白质合成、促进细胞凋亡和自噬、调节各种病毒相关蛋白以及通路等。根据生物碱的抗病毒种类进行分类,以氧化苦参碱、麻黄碱、石斛碱等为例,综述了常见生物碱抗病毒作用特点和机制,为生物碱类抗病毒小分子化合物的研究提供参考。     

苦参素结肠定位片的制备及其体外释放评价

目的:制备pH依赖、酶触和时间三重控制的苦参素结肠定位片释药系统,并考察其体外释放度。方法:从内到外分别以羟丙甲纤维素和聚乙二醇作为隔离层,以渗透型丙烯酸树脂Eudaragit RS 30D和Eudaragit RL 30D混合溶液作为时滞层,以渗透型丙烯酸树脂Eudaragit RS 30D,Eudaragit RL 30D和壳聚糖的混合溶液作为酶触层,以pH依赖型丙烯酸树脂Eudaragit L100-55的水分散体雅克宜作为外层肠溶层。考察了包衣片在体外模拟人体胃肠道环境中的释药情况。结果:制备的苦参素结肠定位片在pH 1.2模拟胃液中2 h不释药,在pH 6.8模拟小肠液中6 h释药量小于10%,在模拟结肠液中8 h部分释放或大部分释放。结论:所制备的苦参素结肠定位片具有良好的结肠定位效果。     

氧化苦参碱对肺纤维化大鼠肺微血管的影响

目的观察氧化苦参碱(OMT)对肺纤维化大鼠肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达及肺微血管变化的影响,并探讨OMT治疗肺纤维化的可能机制。方法气管注射博来霉素制作大鼠肺纤维化模型。将72只雄性SD大鼠分为正常组、模型组、氧化苦参碱治疗组(简称治疗组),每组24只。正常组不做任何处理,正常饲养;治疗组造模后第2天起腹腔注射氧化苦参碱注射液,直至处死;模型组造模后每天腹腔注射同等量的生理盐水。每组在造模后第3,7,14,28天随机处死6只,观察肺组织病理变化,检测肺组织羟脯氨酸(HYP)含量,计算机图形自动分析系统(CIAS)评估肺纤维化程度。通过双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定肺组织匀浆TNF-α含量。肺组织切片行CD-31免疫组化标记,通过CIAS评估肺微血管动态改变。结果模型组第14,28天肺HYP含量均高于同期正常组(P均<0.05),治疗组第28天肺HYP含量明显低于同期模型组(P<0.05);病理学半定量分析显示治疗组肺纤维化程度较模型组减轻;模型组及治疗组肺微血管密度(MVD)呈动态改变,在第3,7,14天2组肺组织MVD均高于正常组,在第28天时则明显低于正常组,其中模型组肺MVD第3,7天较治疗组均更高(P均<0.05);ELISA检测示模型组和治疗组各时间点肺组织匀浆TNF-α均高于正常组(P均<0.05),治疗组第7,14天TNF-α较同期模型组均明显下调(P均<0.05)。结论在肺纤维化发展过程中存在肺组织微血管密度动态改变,早期大量新生血管形成,晚期微血管减少甚至消失,氧化苦参碱能一定程度阻止肺纤维化早期新生血管形成。氧化苦参碱治疗肺纤维化可能部分与抑制TNF-α升高有关。