骨髓间充质干细胞对成年大鼠视网膜节细胞再生的影响

目的：探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)对受损成年大鼠视网膜节细胞(RGCs)轴突再生的影响。方法：切断大鼠视神经,缝接自体坐骨神经(AG)。动物分对照组、AG MSCs组、AG MSCs tPNS(三七总皂苷)组。各组动物存活3、4周,用粒蓝逆行标记再生的RGCs,荧光镜下观察视网膜平铺片中再生RGCs的数量变化。免疫组化检测MSCs在玻璃体内的分化。结果：动物存活3、4周,再生的RGCs数目实验组与对照组有显著性差异。AG MSC组和AG MSCs tPNS组,存活的细胞表达Vimentin、NF和GFAP,Laminin无表达。结论：玻璃体植入MSCs可促进受损伤的视网膜节细胞轴突再生。     

胎鼠肺成纤维细胞的改良培养法

目的改良胎鼠肺成纤维细胞的培养方法。方法取19d胎龄129孕鼠,开胸取出胎肺,用胰酶稍微消化,再进行组织悬液贴壁培养。传代的肺成纤维细胞用免疫组化检测其vimentin和laminin的表达。结果24h后镜下可见组织块周边有长梭型细胞爬出,48h后生长迅速,3d接近融合。传代后杂细胞基本去除,5代后细胞的增殖能力逐渐下降。结论胰酶轻度消化后组织悬液贴壁法是一种可靠快速的肺成纤维细胞分离纯化培养方法。     

Hoechst 33342与DAPI标记细胞核对胞内活性氧检测效果的比较

目的 探讨Hoechst 33342与DAPI两种荧光染料标记细胞核后对细胞内活性氧水平的影响。方法 静息培养的血管平滑肌细胞加入晚期糖基化终末产物作用10 min，加入标记活性氧的荧光探针H2DCFDA，再分别加入Hoechst 33342和DAPI不同荧光染料进行核标记。荧光显微镜下观察细胞核被标记的数目与细胞内活性氧的荧光水平。结果 Hoechst 33342染料标记5 min后即可见细胞核被标记上，随着时间的延长被标记的核数目并不发生改变；而与之明显不同的是，DAPI染料标记5 min时，只有几个细胞核被标记上，但随着时间的延长被标记的核数目越来越多。Hoechst 33342标记后细胞内活性氧的荧光强度并不随时间的延长发生变化，而DAPI标记后细胞内活性氧绿色荧光的细胞数就越少，DAPI标记的细胞核数与显示活性氧绿色荧光的细胞数呈反比。这些结果提示，DAPI染料在标记细胞核时破坏了活性氧在细胞内的储存，干扰了实验结果。结论 检测细胞内活性氧时，应使用Hoechst 33342核标记染料而不能用DAPI。     

药物牙膏对牙龈炎的治疗作用

目的 探讨几种药物牙膏对患者牙龈炎的治疗作用.方法 140名有牙龈炎的学生随机分成四组,分别使用牙膏A、B、C和高露洁,检查受试者使用牙膏前和治疗后2~4周内4颗指数牙6个指标(QH菌斑指数、出血指数、探诊深度、附着水平、牙松动度和阿米巴感染度)的变化.结果 四种牙膏均可使QH菌斑指数、出血指数和阿米巴感染度下降(P＜...     

龙血竭有效部位对胎鼠皮肤成纤维细胞生长的作用

目的:探讨龙血竭不同有效部位对体外培养的胎鼠皮肤成纤维细胞生长及分泌的影响。方法:孕龄12.5~14.5d昆明小鼠胚胎,无菌条件下将躯干部皮肤制成匀浆,接种于25cm2塑料培养瓶,体积分数10%FBS的高糖DMEM培养基培养传代,P3代细胞以8×106个/L接种于96孔板,细胞饥饿24h后进行实验。采用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇等极性递增溶剂依次萃取龙血竭中的各种有效部位,均选用0.125g/L、0.25g/L、0.5g/L、1g/L、2g/L、4g/L五个浓度梯度作用于96孔板中的细胞(DMSO助溶),24h后MTT法检测不同条件下细胞的生长曲线,免疫组化检测细胞分泌Ln、Ⅰ型胶原的变化。10%FBS的高糖DMEM培养条件为空白对照,1%DMSO的高糖DMEM培养条件为实验对照。结果:龙血竭乙酸乙酯有效部位在低浓度对胎鼠成纤维细胞的生长有轻度抑制作用,随浓度增加促生长作用增强,1g/L龙血竭乙酸乙酯有效部位对胎鼠皮肤成纤维细胞的促生长作用最佳,并促进Ln、Ⅰ型胶原的分泌。龙血竭其它有效部位对胎鼠成纤维细胞均无刺激生长的作用。结论:龙血竭乙酸乙酯有效部位能促进胎鼠皮肤成纤维细胞的生长和分泌。     

十溴联苯醚对宫颈癌细胞体外增殖的影响

目的探讨十溴联苯醚(PBDE-209)对宫颈癌HeLa细胞体外增殖的影响。方法观察HeLa细胞经不同浓度PBDE-209暴露后发生的形态学变化,并用MTT方法检测细胞存活率改变,采用免疫荧光化学方法检测细胞增殖核抗原Ki67表达变化,流式细胞术观察HeLa细胞细胞周期的分布变化。结果随着浓度升高,细胞增殖明显,细胞间隙变小。MTT方法检测发现PBDE-209促进HeLa细胞增殖,细胞增殖率的升高呈时间和浓度依赖效应,200nmol/LPBDE-209作用24、48和72h后细胞增殖率分别是阴性对照组的1.2、1.5和1.8倍(P<0.05)。Ki67表达强度随着PBDE-209浓度升高而增强。流式细胞术检测发现200nmol/LPBDE-209作用72h后,G0/G1期细胞比例下降了8%,而S期细胞比例升高了7%,与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论低浓度PBDE-209暴露使HeLa细胞G0/G1期细胞减少,S期细胞增加,从而促进细胞增殖。     

ES细胞源性表皮干细胞与类真皮构成皮肤类似物的分化

【目的】以ES细胞源性表皮干细胞为种子细胞构建皮肤类似物，探讨其在皮下的分化潜能。【方法】Hoechst33342标记E14-ES细胞，经羊膜诱导4d后，形成表皮干细胞克隆，并以其作为种子细胞，取129胎鼠成纤维细胞与复合凝胶-明胶海绵复合，形成皮肤类似物，埋植于129小鼠皮下组织。术后2周、4周、6周、8周取材，做HE染色观察，B1整合素、CK15、CK19、CEA、CK18免疫组化荧光双标和免疫组化观察。【结果】术后2周和4周，植块内可见单层立方或柱状上皮构成的管状和泡状结构，6周和8周后，可见角化复层上皮、毛囊样、汗腺样、皮脂腺样等结构，免疫双标结果显示，植入2周和4周，带有蓝色核标记的细胞形成的管状或泡状结构呈B1整合素、CK15、CK19、CEA和CK18阳性，6周和8周后，HE染色中汗腺样结构呈CEA、CK18阳性。[结论]ES细胞源性表皮干细胞与类真皮构建的皮肤类似物。在同种小鼠皮下有分为角化复层上皮、汗腺样、毛囊样、皮脂腺样等结构的潜能。     

三七总皂甙对血管平滑肌细胞增殖及JNK磷酸化的影响

目的以往的研究发现，三七总皂甙（TPN）具有抑制和促进血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的双重作用，但至今对其作用机制十分不明。本研究旨在观察TPN对大鼠VSMC增殖的影响及经由何种信号通路介导。方法体外培养的大鼠VSMC给予TPN不同浓度作用一定时间或某一特定浓度不同作用时间，采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）和蛋白印迹（Western blot）法观察了VSMC增殖的变化及c-Jun氨基末端激酶（JNK）磷酸化的变化。结果TPN能快速的激活JNK1／2，并呈时间和浓度依赖性。     

霍乱毒素对视神经损伤后视网膜节细胞存活的影响

目的：研究霍乱毒素(CTx)对视神经近端损伤后视网膜节细胞存活的影响。方法：视神经近端微挤压断(MC)后,玻璃体内注射CTx,动物存活3、5、7d后采用荧光逆行示踪技术显示存活的视网膜节细胞。结果：在3、5、7d时,移植霍乱毒素组(MC CTx)存活的视网膜节细胞数分别为(2053±169)、(1881±230)、(1752±137)个/mm~2,明显多于实验对照组(MC)的(1831±158)、(1508±147)和(1240±114)个/mm~2。结论：玻璃体内注入霍乱毒素对视神经微挤压断后视网膜节细胞的存活有明显的促进作用。     

钙离子通道部分介导机械牵张力引起的小鼠主动脉血管平滑肌细胞丝裂原活化蛋白激酶的激活

目的为了证实血管紧张素Ⅱ受体是否参与了主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)对机械牵张力信号的直接介导。方法(1)体外分离培养静息状态的小鼠主动脉VSMC给予血管紧张素Ⅱ刺激或血管紧张素Ⅱ受体特异性阻断剂坎地沙坦(candesar-tan)预处理后给予血管紧张素Ⅱ刺激,用Western blot法检测细胞内丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的活性,以证实VSMC血管紧张素Ⅱ受体的存在。(2)静息状态的VSMC给予机械牵张力刺激一定时间和强度,观察细胞内MAPK的活....