p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路在多菌灵致小鼠睾丸支持细胞增殖抑制和凋亡中的作用

目的通过建立多菌灵致小鼠睾丸支持细胞(TM4)损伤模型,探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在多菌灵致小鼠TM4细胞增殖抑制和凋亡中的作用。方法将TM4细胞分别暴露于0(对照)、1、2、5、10、20μmol/L多菌灵溶液和10μmol/L SB203580抑制剂溶液及10μmol/L SB203580+5μmol/L多菌灵溶液染毒48 h,采用CCK-8法检测细胞存活率。将TM4细胞分别暴露于0(对照)、5μmol/L多菌灵溶液和10μmol/L SB203580抑制剂溶液及10μmol/L SB203580+5μmol/L多菌灵溶液染毒48 h,采用碘化丙啶(PI)染色法检测细胞周期,采用Annexin V/PI双标法检测TM4细胞凋亡,采用Western blot法检测细胞P38 MAPK和p-P38 MAPK蛋白的表达水平。结果与对照组比较,5、10、20μmol/L多菌灵组TM4细胞的存活率均下降,差异有统计学意义(P0.01);且随着多菌灵暴露浓度的升高,TM4细胞的存活率呈下降趋势。与5μmol/L多菌灵组比较,10μmol/L SB203580+5μmol/L多菌灵组TM4细胞的存活率升高,差异有统计学意义(P0.01);而10μmol/L SB203580抑制剂组TM4细胞的存活率无明显改变。与对照组相比,5μmol/L多菌灵组TM4细胞的凋亡率增加,差异有统计学意义(P0.01);而10μmol/L SB203580抑制剂组的凋亡率无明显改变。与5μmol/L多菌灵组比较,10μmol/L SB203580+5μmol/L多菌灵组TM4细胞的凋亡率下降,差异有统计学意义(P0.01)。与对照组比较,5μmol/L多菌灵组TM4细胞G_1/G_0期细胞所占比例降低,而G2/M期和S期细胞所占比例升高,差异均有统计学意义(P0.01);而10μmol/L SB203580抑制剂组各期细胞所占比例均无明显改变。与5μmol/L多菌灵组比较,10μmol/L SB203580+5μmol/L多菌灵组TM4细胞仅G_2/M期细胞所占比例下降,差异有统计学意义(P0.01)。与对照组比较,5μmol/L多菌灵组TM4细胞的p-P38 MAPK蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P0.01);而10μmol/L SB203580抑制剂组的p-P38 MAPK蛋白表达水平无明显改变。与5μmol/L多菌灵组比较,10μmol/L SB203580+5μmol/L多菌灵组TM4细胞的p-P38 MAPK蛋白表达水平下降,差异有统计学意义(P0.01)。各组TM4细胞的P38 MAPK蛋白表达水平间比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论多菌灵通过激活p38 MAPK信号通路抑制TM4细胞增殖,并诱导细胞凋亡及周期阻滞,从而造成细胞损伤。     

NLRP3/IL-1β/TGF-β1信号轴在矽肺肺纤维化大鼠模型中的表达及意义

目的探讨NLRP3/IL-1β/TGF-β1信号轴在矽肺肺纤维化大鼠模型中的表达情况及意义。方法选择健康SPF级Wistar雄性大鼠80只,随机分为4组,分别为高(100 mg/ml)、中(50 mg/ml)、低(25 mg/ml)浓度SiO2染尘组和正常对照组,每组20只。各组分别在SiO2染尘后7 d、14 d、28 d、56 d处死5只大鼠,观察肺组织肺泡炎程度及肺纤维化程度,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺组织中IL-1β、IL-18、TGF-β1含量,Western Blot法检测大鼠肺组织中NLRP3、Caspase-1蛋白表达情况。结果与正常对照组比较,各染尘组大鼠7 d、14 d、28 d、56 d的肺泡炎评分、纤维化程度明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);与正常对照组比较,各染尘组大鼠7 d、14 d、28 d、56 d的IL-1β、IL-18、TGF-β1浓度明显升高(P<0.01);与正常对照组比较,各染尘组大鼠肺组织中NLRP3、Caspase-1蛋白表达在7 d、14 d、28 d、56 d均升高(P<0.01);低、中、高浓度SiO2染尘组内NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18和TGF-β1表达量在7 d、14 d和28 d间两两比较,差异均有统计学意义(P<0. 05),均呈随着染尘时间的增加而升高的时间-效应关系。结论NLRP3及其下游因子Caspase-1、IL-1β、IL-18、TGF-β1在矽肺肺纤维化大鼠模型肺组织中高表达,提示NLRP3/IL-1β/TGF-β1信号轴可能与矽肺肺纤维化有密切的关系,在矽肺形成过程中发挥了作用。     

优质护理服务模式在降低五官科病房红灯率中的应用分析

目的:探讨优质护理模式在降低五官科病房红灯率中的应用效果。方法:选取2016年1月~2016年12月五官科住院患者2205例,根据随机分组的方式,分为实验组与对照组,对照组1102例,实验组1103例。对照组给予常规护理模式,实验组患者给予优质护理模式,护理干预结束后,比较两组患者红灯情况、红灯原因及对护理的满意度。结果:实验组在红灯次数和人均红灯次数两方面均显著低于对照组,尤其在红灯次数方面,实验组为772次,对照组为2534次,差距明显(P0.05);对照组亮红灯原因中输液所占比例最大,其次为饮食,实验组亮红灯原因中健康咨询所占比例最大,其明显高于对照组(P0.05);实验组满意度人数明显高于对照组,同时实验组的不满意明显低于对照组组,实验组与对照组满意率分别为96.73%、78.68%,实验显著高于对照组,具有可比性(P0.05)。结论:优质护理模式在降低五官科病房红灯率中效果明显,值得在临床中推广应用。     

不明原因复发性流产患者绒毛组织中DNA低甲基化及机制

目的探究不明原因复发性流产(URSA)患者绒毛组织全基因组甲基化水平和甲基化相关酶基因表达情况。方法选取URSA患者31例(URSA组)及同期正常早孕放弃妊娠行人工流产的妇女30例(对照组)。取绒毛组织,采用ELISA测定绒毛组织中总DNA的甲基化水平,实时定量PCR检测DNA甲基化转移酶1(DNMT1)、 DNMT3a、 DNMT3b、去甲基化酶10-11转位酶1(TET1)、 TET2、 TET3的mRNA水平, Western blot法检测DNMT1、 DNMT2、 DNMT3、 TET1、 TET2、 TET3蛋白水平。免疫化学染色检测绒毛组织中DNMT1、 DNMT3a、 DNMT3b、 TET1、 TET2、 TET3的表达和分布。结果与对照组相比, URSA组的全基因组甲基化水平显著降低, URSA组绒毛组织中DNMT1、 DNMT3b的mRNA和蛋白水平显著降低, TET1、 TET2的mRNA和蛋白水平显著增加。结论 URSA妇女的流产绒毛组织呈现出低甲基化水平的状态,可能与DNMT1、 DNMT3b上调,TET1、 TET2下调有关。     

阴道微生态失衡与高危型HPV感染及宫颈上皮内瘤变的研究

目的:探讨阴道微生态失衡与高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papilloma virus,HR-HPV)感染及宫颈上皮内瘤变(Cervical intraepithelial neoplasia,CIN)的关系,为宫颈癌的防治提供新的视角。方法:选取2016年06月-2017年06月在南京鼓楼医院妇科门诊就诊的有阴道微生态检测、HPV-HC2及随访结果的460例患者,其中162例为CIN合并有HR-HPV感染的患者(CIN合并HR-HPV感染组),107例为单HR-HPV感染而无宫颈病变的患者(单HR-HPV感染组),191例同期正常门诊体检的宫颈正常、HPV及宫颈细胞学均阴性的正常妇女(对照组),269例HR-HPV感染患者中,依据HPV-HC2病毒载量进一步分为HPV-HC2≥1组和HPV-HC21组,回顾性比较阴道微生态失衡与HR-HPV感染及CIN的关系。结果:(1)CIN合并HR-HPV感染组、单HR-HPV感染组及对照组患者的阴道微生态失衡率分别为54.9%、35.5%、和29.8%,CIN合并HR-HPV感染组的微生态失衡率明显高于单HR-HPV感染组及对照组(P0.05),单HR-HPV感染组的微生态失衡率与对照组相比,差异无统计学意义(P0.05)。进一步分析,CIN合并HR-HPV感染组患者的阴道微生态指标H_2O_2及PH数值均明显高于单HR-HPV感染组及对照组(P0.05),而单HR-HPV感染组的H_2O_2及PH值与对照组相比,无明显统计学意义(P0.05);(2)根据HPV-HC2检测的HPV病毒载量,进一步分为HPV-HC2≥1组(205例)和HPV-HC21组(64例),其阴道微生态失衡率为53.2%和29.8%,两组相比,差异有明显统计学意义(P0.05);对照组患者的阴道微生态失调率与HPV-HC2≥1组的患者相比,差异有明显统计学意义(P0.05),而与HPV-HC21组的患者相比,无统计学意义(P0.05)。进一步研究,HPV-HC2≥1组患者的H_2O_2及PH值均明显高于HPV-HC21组及对照组(P0.05);HPV-HC21组患者的H_2O_2及PH值与对照组相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论:当HR-HPV感染机体后,可能HR-HPV病毒高载量与阴道微生态失衡协同参与了CIN的发生,同时,HR-HPV病毒高载量可能与阴道微生态失衡有关,尤其与阴道乳杆菌异常及PH值改变密切相关。     

解脲型、人型支原体与高危型HPV相关性研究

目的:研究高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染与解脲型支原体(Uu)、人型支原体(Mh)及混合性支原体感染之间相关性。方法:回顾性分析2015年8月至2017年7月就诊于南京大学附属鼓楼医院共301名患者,利用杂交捕获二代测序方法对301例患者进行HPV-DNA检测,同时通过荧光定量PCR法对301例患者进行支原体检测。结果:301例患者中,高危型HPV感染者33例,HPV阴性者268例,支原体阳性者163例,总感染率为44.19%,解脲支原体阳性者135例,感染率为44.85%,人型支原体阳性者57例,感染率18.94%,解脲支原体及人型支原体同时感染者29例,感染率为9.63%。解脲支原体感染与高危型HPV感染差异有统计学意义(X2值为4.664,P0.05),人型支原体感染与高危型HPV感染差异无统计学意义(X2值为2.567,P0.05),支原体感染与高危型HPV感染差异有统计学意义(X2值为6.149,P0.05)。解脲型支原体DNA负荷量与高危型HPV感染差异有统计学意义(X2值为4.335,P0.05)。结论:解脲型支原体感染,混合型支原体感染与高危型HPV感染具有相关性,解脲型支原体是高危型HPV感染的高危因素。     

镇肝熄风汤对帕金森病大鼠易激惹程度和结膜充血及NQO-1,TH的影响

目的:观察镇肝熄风汤对帕金森病肝大鼠易激惹程度和结膜充血的影响及可能机制。方法:将105只Wistar大鼠随机分为正常组,假手术组,模型组,司来吉兰组(0.9 mg·kg~(-1)·d~(-1)),镇肝熄风汤低、中、高剂量组(8,16,32 g·kg~(-1)·d~(-1)),每组15只。采用附子汤ig联合6-羟基多巴胺单侧损毁黑质法复制帕金森病肝阳上亢型病证结合大鼠模型,灌胃4周。蛋白质免疫印迹(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测酪氨酸羟化酶(TH)和醌氧化还原酶-1(NQO-1)蛋白和mRNA表达。结果:与假手术组比较,帕金森病肝阳上亢证模型大鼠易激惹程度和结膜充血显著升高,中脑组织NQO-1蛋白和mRNA表达增加,而TH蛋白表达明显降低(P0.05)。与帕金森病肝阳上亢证模型组比较,镇肝熄风汤组大鼠易激惹程度和结膜充血显著降低,TH蛋白表达显著增加,NQO-1蛋白和mRNA表达均明显增加(P0.05),而司来吉兰组大鼠易激惹程度、结膜充血和中脑组织NQO-1蛋白表达无显著性差异。结论:镇肝熄风汤能显著改善帕金森病肝阳上亢证模型大鼠易激惹程度和结膜充血,其机制可能与上调大鼠中脑组织TH和NQO-1分子表达有关。     

散发性先天缺牙的临床特征分析

目的：探讨散发性先天缺牙的临床特征,分析其危害。方法：临床检查散发性先天缺牙病例,影像学观察,统计分析。结果：收集到11例散发性先天缺牙患者,男5例,女6例,患者缺牙1～25颗,伴有食物嵌塞（90.9%）、邻面龋及继发病变（81.8%）、创伤（72.7%）、牙周病（45.5%）、咬合异常（72.7%）。结论：散发性先天缺牙多为少数牙先天缺失,与性别无明显关系,伴有恒牙埋伏和乳牙滞留,缺牙部位具有随机性,先天缺牙影响口腔健康及咬合关系。