鸦胆子苦醇对苯致白血病小鼠的治疗作用及其机制

将30只无特定病原体级雄性CBA/CA小鼠,随机分为对照组、苯诱导急性髓系白血病(BZ-AML)模型组、鸦胆子苦醇(Brusatol)治疗组,每组各10只小鼠。BZ-AML、Brusatol组小鼠利用静式染毒柜吸入染毒,每天苯吸入浓度300 ppm,6 h/d,5 d/周,连续8周;对照组小鼠吸入空气。观察各组小鼠外周血血常规、骨髓细胞学涂片,确认BZ-AML建模成功后给药。Brusatol治疗组腹腔注射给药4 mg/(kg·d),连续5 d。流式细胞术测定外周血中CD~+_3、CD■、CD■T细胞的数量以及骨髓单个核细胞ROS、细胞凋亡率的改变。与BZ-AML组小鼠比较,Brusatol组小鼠外周血CD~+_4、CD~+_3 T淋巴细胞数量及CD■/CD■比值增加,骨髓单个核细胞ROS水平降低及细胞凋亡率增高。提示Brusatol通过改善T淋巴细胞免疫功能,降低骨髓细胞ROS生成及诱导凋亡发挥抗白血病的作用。     

矽肺大鼠肺组织let-7d-3p和miRNA-21-5P差异表达及其初步分析

目的探索let-7d-3p和miRNA-21-5p在二氧化硅(SiO_2)诱导的大鼠纤维化肺组织中的差异表达及其意义。方法 SPF级Wistar雄性大鼠随机分为对照组和模型组,每组30只,采用一次性气管内灌注1 ml SiO_2悬浊液建立大鼠矽肺模型,对照组大鼠相同方法灌注1ml灭菌生理盐水。分别于染尘后1、7、14、21、28 d采集各组大鼠肺组织,每组取6只,对3只大鼠肺组织进行病理学观察,另外3只采用miRNA微阵列芯片技术筛选肺组织中差异表达的miRNA,通过miRNA芯片筛选结合反转录定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)验证let-7d-3p和miRNA-21-5p在两组间的表达水平,对let-7d-3p和miRNA-21-5p进行靶基因预测并进行GO(gene ontology)富集分析和KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes)通路分析。结果对照组大鼠1、7、14和21 d Masson染色均可见正常肺组织,未发现胶原纤维,28 d大鼠肺间质和支气管周围仅有少量纤细的胶原分布;模型组大鼠1 d和7 d未发现胶原纤维,14 d染色可见较多以淋巴细胞为主的炎症细胞浸润,未见明显纤维组织,21 d和28 d模型组大鼠肺间质内可见大片状密集的胶原纤维沉积,在肉芽组织、支气管及血管壁周围胶原蛋白增生明显。模型组中let-7d-3p的表达水平均显著下调,miRNA-21-5p表达水平均显著上调,与对照组相比差异均有统计学意义(P0.05)。结论模型组中let-7d-3p和miRNA-21-5p表达变化明显,可能与早期矽肺的发生发展有关。     

中药颗粒对染矽尘大鼠肺组织 TGF-β1 / Smads通路的调节作用

目的研究中药颗粒对染矽尘、Col-Ⅰ的影响,并从TGF-β1/Smads通路探讨其可能的作用机制。方法将SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组和中药高、低剂量组,每组16只。对照组大鼠气管灌注1.0 ml生理盐水,其余组大鼠均给予1.0 ml 5%无菌SiO_2悬浊液;造模后第2天开始给大鼠灌胃给药,1次/d,高剂量组、低剂量组大鼠分别灌胃1 000 mg/kg、500 mg/kg中药,对照组、模型组给予0.9%生理盐水。于灌胃第14、28天处死大鼠,并检测大鼠肺组织Col-Ⅰ、TGF-β1的含量及TGF-β1、Smad2/3蛋白的表达水平。结果造模后第14天和第28天,模型组大鼠肺组织Col-Ⅰ、TGF-β1含量高于对照组,中药干预后Col-Ⅰ、TGF-β1含量有所降低,不同剂量组间差异均具有统计学意义(P0.05);模型组大鼠肺组织TGF-β1、Smad2/3及p-Smad2/3蛋白的表达水平高于对照组,中药干预后TGF-β1、Smad2/3及p-Smad2/3蛋白的表达水平有所降低,不同剂量组间差异也具有统计学意义(P0.05)。结论中药颗粒可以抑制SiO_2诱导的大鼠肺组织Col-Ⅰ含量的升高,且该抑制作用可能与中药颗粒对大鼠肺组织TGF-β1/Smads通路的调节有关。     

p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路在多菌灵致小鼠睾丸支持细胞增殖抑制和凋亡中的作用

目的通过建立多菌灵致小鼠睾丸支持细胞(TM4)损伤模型,探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在多菌灵致小鼠TM4细胞增殖抑制和凋亡中的作用。方法将TM4细胞分别暴露于0(对照)、1、2、5、10、20μmol/L多菌灵溶液和10μmol/L SB203580抑制剂溶液及10μmol/L SB203580+5μmol/L多菌灵溶液染毒48 h,采用CCK-8法检测细胞存活率。将TM4细胞分别暴露于0(对照)、5μmol/L多菌灵溶液和10μmol/L SB203580抑制剂溶液及10μmol/L SB203580+5μmol/L多菌灵溶液染毒48 h,采用碘化丙啶(PI)染色法检测细胞周期,采用Annexin V/PI双标法检测TM4细胞凋亡,采用Western blot法检测细胞P38 MAPK和p-P38 MAPK蛋白的表达水平。结果与对照组比较,5、10、20μmol/L多菌灵组TM4细胞的存活率均下降,差异有统计学意义(P0.01);且随着多菌灵暴露浓度的升高,TM4细胞的存活率呈下降趋势。与5μmol/L多菌灵组比较,10μmol/L SB203580+5μmol/L多菌灵组TM4细胞的存活率升高,差异有统计学意义(P0.01);而10μmol/L SB203580抑制剂组TM4细胞的存活率无明显改变。与对照组相比,5μmol/L多菌灵组TM4细胞的凋亡率增加,差异有统计学意义(P0.01);而10μmol/L SB203580抑制剂组的凋亡率无明显改变。与5μmol/L多菌灵组比较,10μmol/L SB203580+5μmol/L多菌灵组TM4细胞的凋亡率下降,差异有统计学意义(P0.01)。与对照组比较,5μmol/L多菌灵组TM4细胞G_1/G_0期细胞所占比例降低,而G2/M期和S期细胞所占比例升高,差异均有统计学意义(P0.01);而10μmol/L SB203580抑制剂组各期细胞所占比例均无明显改变。与5μmol/L多菌灵组比较,10μmol/L SB203580+5μmol/L多菌灵组TM4细胞仅G_2/M期细胞所占比例下降,差异有统计学意义(P0.01)。与对照组比较,5μmol/L多菌灵组TM4细胞的p-P38 MAPK蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P0.01);而10μmol/L SB203580抑制剂组的p-P38 MAPK蛋白表达水平无明显改变。与5μmol/L多菌灵组比较,10μmol/L SB203580+5μmol/L多菌灵组TM4细胞的p-P38 MAPK蛋白表达水平下降,差异有统计学意义(P0.01)。各组TM4细胞的P38 MAPK蛋白表达水平间比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论多菌灵通过激活p38 MAPK信号通路抑制TM4细胞增殖,并诱导细胞凋亡及周期阻滞,从而造成细胞损伤。     

农达对小鼠睾丸组织损伤和氧化应激的影响

目的探讨农达(roundup,有效活性成分为草甘膦酸)对小鼠睾丸组织的损伤作用及对氧化应激的影响。方法选择体重为(18~22g)的成熟雄性SPF级Balb/c小鼠24只,随机分至1个阴性对照(蒸馏水)组和20、200、2 000 mg/kg3个农达染毒剂量组,每组6只。采用经口灌胃的方式染毒,30 d后制取小鼠睾丸匀浆,测定乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)3种睾丸酶的活力以及氧化应激指标丙二醛(MDA)含量和总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力。在光学显微镜下观察小鼠睾丸组织结构的病理变化,采用缺口末端标记技术(TUNEL法)检测小鼠睾丸组织细胞凋亡情况。结果农达染毒30 d后,200、2 000 mg/kg染毒组小鼠体重、睾丸、附睾重量明显降低,差异有统计学意义(P0.01)。农达染毒可引起小鼠睾丸组织不同程度的病理损伤,主要表现为生精上皮脱落及排列紊乱,曲细精管管腔内精子数量减少。TUNEL法检测表明200、2 000 mg/kg染毒组小鼠睾丸组织细胞凋亡率明显高于阴性对照组,差异有统计学意义(P0.01)。2 000 mg/kg染毒组小鼠睾丸中MDA含量明显升高,而200、2 000 mg/kg染毒组小鼠睾丸中GSH-Px活性明显降低,与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P0.01)。结论在本实验染毒时间和剂量范围内,农达可对小鼠睾丸组织产生不同程度的病理损伤,破坏小鼠睾丸内氧化平衡状态,诱导睾丸组织细胞凋亡,具有一定的生殖毒性。     

我国放射工作人员外周血淋巴细胞微核检查结果分析

目的 通过收集2011年到2015年我国放射工作人员查体资料,了解当前我国放射工作人员外周血淋巴细胞微核检查情况,探讨长期小剂量电离辐射对放射工作人员健康的影响。方法 全面检索国内相关研究文献,收集到2011-2015年我国符合研究要求的关于职业接触放射线工作人员外周血淋巴细胞微核分析直接相关的公开发表文章共82篇,对相关研究进行数据合并与分析,统计放射工作人员外周血淋巴细胞微核率、微核异常率和微核检出率,并对各文献微核率的数据结果进行比较分析。结果 医用放射组外周血淋巴细胞微核率为1.46‰,微核异常率为4.36%,微核检出率为53.48%,均明显高于对照组(P < 0.01);工业放射组外周血淋巴细胞微核率为1.42‰,微核检出率为51.86%,均明显高于对照组(P<0.01),但微核异常率与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。不同文献间外周血淋巴细胞微核率数据结果差异较大。结论 长期低剂量电离辐射对我国放射工作人员的健康有着一定的影响,须加强放射工作人员的放射卫生防护工作,同时还需加强微核试验操作培训和质量控制,确保结果准确可靠。     

百草枯致大鼠肺组织Th17细胞相关细胞因子变化及IL-17抗体的拮抗作用

目的探讨急性百草枯染毒大鼠肺组织内Th17细胞相关细胞因子的表达变化及IL-17抗体的中和作用。方法将72只健康SPF级Wistar大鼠随机分为对照(生理盐水)组、百草枯中毒组和抗体中和组,每组24只,雌雄各半。百草枯中毒组和抗体中和组一次性灌胃染毒百草枯(50mg/kg);抗体中和组2 h后腹腔注射3μg/ml的IL-17抗体。分别于染毒后第1、3、7、21天,检测外周血IL-17、IL-6、TGF-β浓度和肺组织中维甲酸孤独核受体γt(RORγt)mRNA的表达水平。观察肺组织的病理学改变。结果与对照组相比,百草枯中毒组和抗体中和组雌、雄大鼠各时间点血清IL-17、IL-6、TGF-β浓度及肺组织RORγtmRNA的表达均升高,差异有统计学意义(P0.05);与百草枯中毒组相比,抗体中和组雌、雄大鼠第1、3天血清IL-17、IL-6含量及第3、7天血清TGF-β含量以及第1、3、7天肺组织RORγt mRNA表达水平均降低,差异有统计学意义(P0.05)。而雄性大鼠第7天血清IL-17含量及雌性大鼠第21天肺组织RORγt mRNA表达水平明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 Th17细胞参与了百草枯中毒大鼠急性炎症反应过程,IL-17抗体对急性百草枯致肺损伤具有拮抗作用。     

毒死蜱对雄性大鼠生精功能及相关激素水平影响

目的 探讨毒死蜱对雄性大鼠生精功能和血清激素水平的影响.方法 选择21 d龄无特定病原体级雄性Wister大鼠随机分成3个实验组和1个对照组,每组10只.实验组灌胃给予毒死蜱,剂量为2.7、5.4、12.8 mg·kg-1·d-1;对照组给予等量蒸馏水稀释的吐温80溶液.染毒90d后,测定各组大鼠睾丸、附睾和前列腺-精囊腺等脏器系数、检测附睾尾精子数量、精子活动率和精子崎形率以及血清中性激素水平.结果 高、中剂量组精子数量减少、精子畸形率升高、精子活力显著降低(P<0.05).高、中剂量组血清睾49 (T)水平降低,促卵泡刺激素(FSH)升高(P<0.05).不同组别血清中黄体生成素(LH)及雌二醇(E2)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论　毒死蜱对雄性大鼠有明显的生殖毒性,可影响雄性大鼠生精功能和血清中性激素水平.     

橙皮素对染矽尘大鼠肺组织氧化损伤的保护作用研究

  目的  探讨橙皮素对染矽尘大鼠肺组织氧化损伤的保护作用。
  方法  将54只Wistar雄性大鼠随机分为阴性对照组,二氧化硅（SiO₂）模型组,橙皮素低、中、高剂量治疗组及吡非尼酮阳性对照组,每组9只。阴性对照组经气管灌注1 mL生理盐水,其他各组均经气管灌注1 mL 50 mg/mL SiO₂,24 h后对各组动物进行药物干预,每天灌胃给药1次。染尘28 d后处死大鼠,观察各组大鼠肺组织病理学改变,检测每组大鼠肺组织丙二醛（MDA）含量、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活力及总抗氧化能力（T-AOC）。
  结果  组织病理学结果显示,吡非尼酮阳性对照组及橙皮素治疗组大鼠肺组织的损伤程度减轻。与阴性对照组相比,SiO₂模型组大鼠肺系数、MDA含量和SOD活力明显升高（P < 0.05）,CAT、GSH-Px、T-AOC活力未出现明显变化（P > 0.05）;给予药物治疗后,吡非尼酮阳性对照组和橙皮素治疗组的大鼠肺系数、肺泡炎和纤维化评分及MDA含量均出现不同程度的降低（P < 0.05）,CAT、SOD、GSH-Px和T-AOC活力均出现不同程度的升高（P < 0.05）。
  结论  橙皮素可能通过改变各氧化指标水平,增强抗氧化能力,减轻SiO₂对大鼠肺组织的损伤作用。
     

清燥救肺汤对二氧化硅致大鼠肺损伤的抗炎作用研究

  目的  探讨清燥救肺汤干预对二氧化硅(SiO₂)粉尘致大鼠肺组织损伤的抗炎作用。
  方法  将60只Wistar雄性大鼠随机分为阴性对照组,清燥救肺汤对照组,SiO₂模型组和清燥救肺汤低、中、高剂量干预组,每组10只。经大鼠气管内灌注1 mL 50 mg/mL SiO₂混悬液复制肺损伤动物模型,造模24 h后开始给予清燥救肺汤干预,清燥救肺汤低、中、高剂量及其对照组每日给药剂量分别为3.75、7.5、15、15 g/kg生药,阴性对照组与SiO₂模型组以等体积生理盐水灌胃,1次/d,连续给药28 d。28 d后处死大鼠,取肺组织,行HE染色和Masson染色,碱水解法测定羟脯氨酸(HYP)含量,ELISA法测定大鼠肺组织TGF-β1、TNF-α、IL-1β、IL-10和IFN-γ细胞因子的水平。
  结果  组织病理学检查结果显示,3个清燥救肺汤干预组大鼠肺组织损伤程度均明显减轻。与SiO₂模型组比较,清燥救肺汤各剂量组大鼠肺质量(湿重)和肺系数、肺组织中HYP含量、TGF-β1、TNF-α和IL-1β水平均出现不同程度的降低(P < 0.05),IL-10和IFN-γ水平均出现不同程度的升高(P < 0.05),且随着清燥救肺汤给药剂量的增加,其变化越明显。
  结论  清燥救肺汤可能通过抑制促炎因子TGF-β1、TNF-α、IL-1β,促进抗炎因子IL-10和IFN-γ的释放,减轻SiO₂对大鼠肺组织的损伤作用。