三氧化二砷(As2O3)诱导人肺腺癌GLC-82细胞凋亡及分子机制的研究

目的:探讨As2O3对人肺腺癌GLC-82细胞系抑制生长、诱导凋亡的生物学效应及作用机制.方法:通过MTT还原法检测As2O3对该细胞系生长的影响;用光学显微镜、流式细胞仪、DNA凝胶电泳和细胞凋亡原位检测(TUNEL)研究As2O3诱导细胞凋亡的情况;用RT-PCR、Northern blot或Western blot分析As2O3对c-myc、p53、p16和bcl-X等基因表达的影响.结果:As2O3能抑制GLC-82细胞的生长.As2O3处理GLC-82细胞后,光学显微镜下可见到明显的凋亡细胞,细胞周期的G1期前有低于2倍体的凋亡峰,DNA凝胶电泳显示出典型的凋亡特征:DNA有规律断裂形成的梯状图谱,蛋白水平的检测表明As2O3可使细胞c-myc基因表达下降,p16和p53表达升高.结论:As2O3能显著抑制GLC-82细胞生长、诱导细胞凋亡,并主要通过调节c-myc,p16和p53等基因的表达来实现.     

三氧化二砷诱导人食管癌Ec109细胞凋亡伴随c-myc基因的降调节

目的　探讨三氧化二砷 (As2 O3)对食管癌 Ec10 9细胞系的生物学效应及细胞和分子机制。方法　通过四氮唑 (MTT)还原法检测三氧化二砷 (As2 O3)对食管癌 Ec10 9细胞系存活率的影响 ,从形态观察、流式细胞仪分析、DNA凝胶电泳、细胞凋亡原位检测 (TU NEL)研究三氧化二砷诱导食管癌 Ec10 9细胞凋亡的情况 ,并以 Western blot检测基因表达。结果　 Ec10 9细胞经 As2 O3处理后 ,存活率明显降低。光学显微镜下可见到明显的凋亡细胞 ,在细胞周期 G1期前有低于 2倍体的凋亡峰 ;DNA凝胶电泳显示出典型的凋亡特征 :DNA有规律断裂形成的梯状图谱 ,细胞凋亡原位检测发现 DNA断裂 ,Western blot检测表明 c- myc基因的表达下降。结论　 As2 O3能诱导人食管癌Ec10 9细胞凋亡 ,并伴随 c- m yc基因的降调节。     

腺病毒介导RA538及反义c-myc在不同细胞系中作用及其机制

目的比较重组RA538,反义c-myc及LacZ腺病毒(adenovirus,AV)对不同靶细胞的转染效率、生物学特性并探讨其作用的分子机制.方法以人胃癌细胞(SGC7901)、食管癌细胞(EC109)及人胚肺二倍体细胞(2BS)系为靶细胞,采用LacZ基因转染X-gal染色、形态学观察、MTT,RT-PCR等方法,研究重组RA538,反义c-myc及LacZ AV对上述细胞的转染效率,生物学作用及其分子机制.结果 AV-LacZ进行重组腺病毒转导效率检测显示其对SGC7901,2BS细胞具有很高的转导效率,对EC109细胞转导效率较低.AV-RA538及AV-ASc-myc对SGC7901细胞能产生明显的生长抑制效应并诱导凋亡,其生长抑制率分别为76.3%和44.1%.AV-RA538及AV-ASc-myc对SGC7901细胞内源性c-myc,bcl-2基因的表达具有抑制作用.AV-RA538及AV-ASc-myc对EC109细胞及2BS细胞无明显的生长抑制及凋亡诱导作用,AV-RA538对EC109及2BS细胞中内源性c-myc,bcl-2基因的表达无调节作用.结论 AV载体转导效率很高,能实现目的基因在转导细胞中的高水平表达,但对不同靶细胞的转染效率存在差别.AV-RA538,AV-ASc-myc对SGC7901的生长抑制及凋亡诱导作用可能是通过AV的高效转导及抑制c-myc,bcl-2的表达而实现的.AV-RA538,AV-ASc-myc对食管癌、2BS细胞系无类似作用可能与其对上述细胞的转导的作用及内源性基因表达的作用有关.     

Gene therapy with antisense c-myc adenovirus for human gastric carcino- ma cell line in vitro and for implanted carcinoma in nude mice

Sufficient infonnation has been accumulated to suggest that achvation and alnplilication of oncogenes and inachvation and fUnchonal failme of tUInor suPPressor genesare responsible for the inihation and deVelopment of human malignant disease lhrough a mulhstep PIDCess['].Gastric careinoma, one Of the most common inalig~t tUmors, can be successop ~ with sopry inthe early stage, but adVanced cases are usually refectoryto chemotherapy or ladiotherapy. COnSeopenily, genetherapy becomes an at…     

沙藏和激素处理对北柴胡和三岛柴胡种子萌发的影响研究

通过不同浓度的赤毒素GA₃或细胞分裂素6-BA结合沙藏,对北柴胡和三岛柴胡种子进行处理,得出了促进2种柴胡种子萌发的最佳方法。     

Studies on arsenic trioxide induced human pulmonary adenocarcinoma GLC-82 cell apoptosis and its molecular mechanisms

】 ObjectiveTo study the biological effect of As₂O₃ on human pulmonary adenocarcinoma GLC-82 cells and its mechanisms. MethodsMTT reduction assay,morphology investigation,flowcytometric analysis,DNA gel electrophoresis and TUNEL,RT-PCR,Northern blot, Western blot methods were perfomed. ResultsAs₂O₃ inhibited the growth of GLC-82 cell line. The cells treated with As₂O₃ showed a typical apoptotic morphology and hypodiploid peak before G1 phase. DNA of treated GLC-82 cells appeared a ladder pattern characteristic of apoptosis. In situ cell death detection analysis also revealed the DNA fragmentation. Besides,As₂O₃ inhibited c-myc gene expression and increased p53 and p16 gene expression. ConclusionAs₂O₃ can induce GLC-82 cell apoptosis mainly with regulation of c-myc,p53 and p16 gene expression.     

鬼臼乙叉甙对小鼠免疫功能的影响

目的:观察鬼臼乙叉甙(VP-16)对小鼠免疫功能的影响。方法:VP-16 2.5～5.0mg/kg 腹腔注射连续7天。结果:VP-16能显著抑制 BALB/c 小鼠的细胞和体液免疫功能。血清溶血素 HC_(50)值和凝集素滴度分别降低29.4%～34.7%和60.3%～86.0%,脾抗体分泌细胞降低27.3%～37.4%,小鼠足垫迟发超敏反应双足垫厚差由对照组的0.27±0.06mm 降至0.14±0.01mm 和0.10±0.02mm,小鼠脾和胸腺指数减少30.3%～49.2%和61.9%～75.4%。VP-16对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能及外周血特异性酯酶阳性 T 细胞百分率无明显影响。结论:VP-16对机体免疫功能有明显抑制作用。     

神经酰胺和细胞凋亡

神经酰胺是神经鞘磷脂在神经鞘磷脂酶催化下水解产生的。它是一个介导一系列细胞活动的第二信使。这些细胞活动包括细胞凋亡、细胞分化、细胞周期停滞甚至细胞增殖。本文着重讨论了神经酞胺作用的靶点及其与DAG的关系，对其产生的以细胞凋亡为主的活动作出了一定解释。