UPLC法测定不同产地不同部位牡丹皮中6种活性成分

目的 建立同时测定产自安徽和山西省的牡丹皮皮层和髓部中没食子酸、芍药苷、苯甲酸、苯甲酰氧化芍药苷、苯甲酰芍药苷和丹皮酚的UPLC方法,为确立最佳的牡丹皮加工方法提供依据.方法 牡丹皮甲醇液(超声提取)供HPLC分析采用ACQUITY UPLC,HSS T3色谱柱(2.1 mm ×100 mm,1.8 μm),流动相为乙腈-0.05％磷酸水溶液梯度洗脱,检测波长230 nm.结果 没食子酸、芍药苷、苯甲酸、苯甲酰氧化芍药苷、苯甲酰芍药苷和丹皮酚分别在3.607 ～ 72.14、12.00 ～240.0、1.600 ～32.00、0.998～19.96、6.008～120.2、22.42～448.4 μg/mL范围内呈良好的线性关系.平均回收率分别为98.3％,99.5％,101.2％,98.1％,100.3％,98.79％.不同产地牡丹皮中各成分变化规律基本一致.牡丹皮栓皮中各成分质量分数均较高,而木心中也含有一定的活性成分.结论 牡丹皮加工过程中可以考虑不刮掉栓皮.整体质量连丹皮优于刮丹皮.     

HPLC法同时测定胃痛欣颗粒剂中大黄酸、大黄素、大黄酚的含量

目的建立胃痛欣颗粒剂中大黄酸、大黄素、大黄酚的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法 ,AccusilC1 8(4 6mm× 2 5 0mm ,1 0 μm)柱 ,流动相为 :甲醇 水 冰醋酸 (80∶2 0∶1 ,V∶V∶V) ,检测波长为 2 5 4nm。结果大黄酸、大黄素、大黄酚分别在 0 0 3～ 0 4 8μg ,0 0 2 5～ 0 4 0 μg ,0 0 2 5～0 4 0 μg内与峰面积呈线性关系 ,平均回收率 (n =3 )分别为 98 3 % (RSD =1 4 3 % ) ,97 6% (RSD=1 84 ) ,98 7% (RSD =0 5 7% )。结论可用于大黄药材及其复方制剂的质量控制     

子宫内膜癌PTEN蛋白表达及其临床意义

目的 :探讨抑癌基因第 10染色体同源丢失性磷酸酶 -张力蛋白基因 (PTEN)蛋白表达与子宫内膜癌的发生、发展及复发的关系。方法 :采用免疫组织化学S P法检测PTEN蛋白在 5 0例子宫内膜癌、12例不典型增生子宫内膜及 10例正常子宫内膜组织的表达。结果 :5 0例子宫内膜癌中PTEN蛋白表达率为 5 6 0 0 % ,明显低于正常子宫内膜以及不典型增生子宫内膜中的表达 (10 0 0 0 %、91 0 0 % ) (P <0 0 5 )。PTEN蛋白在无肌层浸润或肌层浸润≤ 1/ 2的子宫内膜癌中阳性表达率为 76 0 0 % ,肌层浸润 >1/ 2或有淋巴结转移者为 36 0 0 % ,与肌层浸润程度显著相关 (P <0 0 5 ) ,且Ia Ib期与Ic期相比也有统计学差异 ;但与子宫内膜癌的组织学分级、有无复发无关 (P >0 0 5 )。结论 :抑癌基因PTEN蛋白表达缺失在子宫内膜癌的发生、发展、浸润及复发过程中有一定作用。     

固肠止泻丸治疗慢性溃疡性结肠炎30例

目的观察口服固肠止泻丸治疗慢性溃疡性结肠炎的临床疗效。方法将慢性溃疡性结肠炎患者随机分为两组，治疗组30例口服固肠止泻丸；对照组30例口服都补脾益肠丸。两组均连续用药2个月。结果治疗组、对照组总有效率分别为：83．33．00％、80．00％，且治疗组与对照组总疗效相当（P〉0．05）。结论固肠止泻丸治疗慢性溃疡性结肠炎安全、且具有较好的疗效。     

宫颈癌患者外周血树突状细胞的体外扩增和鉴定

 目的 探索体外扩增宫颈癌患者外周血来源的成熟树突状细胞(denelritic cell，DC)的方法，并鉴定DC的形态、结构、表型及生物学活性。方法 淋巴细胞分离液分离宫颈癌患者外周血，得到DC前体细胞(PBMC)，以(3M-CSF、IL-4、TNF-α诱导培养。用光镜和透射电镜观察形态结构，流式细胞仪检测细胞表面特异性分子，MTT法测定DC刺激T细胞增殖的活性。结果 联合应用细胞因子可诱导扩增出源自宫颈癌患者外周血的成熟DC，具有典型形态特征，较高表达HLA-DR、CD1a、CD80，能强烈激发同种异体T细胞增殖反应。结论 宫颈癌患者外周血体外培养可成功获得成熟的DC，为开展宫颈癌临床免疫治疗奠定了基础。     

HPV16 E7和Brn-3a在宫颈癌前病变中的表达及其意义

 目的研究HPV16E7和Brn3a在各级宫颈癌前病变(CIN)中的表达情况以及两者之间的关系,从分子生物学水平探讨其作为宫颈癌前病变的特异性标志物的可能性,以期寻找新的宫颈癌前病变筛查方法。方法对71例患者行宫颈薄层细胞学检查(ThinprepCellTest,TCT),并在阴道镜下组织学活检,其TCT残留标本,用RTPCR法检测各标本中HPV16E7和Brn3a的表达。结果HPV16E7和Brn3a表达按细胞学分级和病理学分级其阳性率呈逐级增高趋势,差异均有显著性(P<0.0001)。两者作为宫颈癌前病变和HPV活化状态的诊断标志物,其结果是一致的(P<0.05)。结论TCT残留标本适合进行RTPCR分析研究。HPV16E7可作为宫颈癌前病变和HPV活化状态的生物标志物。Brn3a可作为可靠的CIN3生物标志物和HPV致癌基因转录活化的标志物。HPV16E7和Brn3a相互作用,可能为宫颈高度癌变发展的原因之一。     

RP-HPLC法同时测定野菊花中木犀草素-7-O-葡萄糖苷和蒙花苷

野菊花为菊科植物野菊Chrysanthemum in-dicum L.的头状花序,作为常用中药收载于《中国药典》2005年版中。味苦、辛,性凉,清热解毒、疏风平肝,用于疔疮、痈肿、丹毒,风热感冒,咽喉肿痛,高血压眩晕,头痛等症。野菊花中富含黄酮类化合物,木犀草素-7-O-葡萄糖苷和蒙花苷为其中的代表性成分。据报道,木犀草素-7-O-葡萄糖苷对黄嘌呤氧化酶具有强的抑制活性,对cAMP磷酸二酶酯的IC50为79μmol/L[1]。蒙花苷又名野菊花黄酮苷,其具有抑制磷酸二酯酶作用,醛糖还原酶抑制作用,保肝作用,并对慢性气管炎有一定疗效[1]。两者均为野菊花中的主要成分,量…     

SPR-HPV技术检测宫颈人乳头瘤病毒感染状况的临床分析研究

目的:用SPR-HPV技术了解重庆医科大学附属第一医院就诊女性人乳头瘤病毒(HPV)感染状况。方法:采用SPR-HPV技术检测1 000例女性宫颈脱落细胞24种HPV基因亚型。结果:HPV总感染率为28.2%(282/1 000),22种亚型被检出,单一感染211例(21.1%),其中细胞学检查阳性94例;复合感染71例(7.1%),其中细胞学检查阳性32例,单一感染与复合感染差异无统计学意义(χ2=0.005 5,P>0.05);单一感染211例中高危型HPV感染186例,低危型HPV感染25例;单一感染中低危阳性者细胞学检查阳性4例,单一感染中高危阳性者细胞学检查阳性90例,两者比较差异有统计学意义(χ2=9.37,P<0.005)。单一感染211例中感染HR-HPV基因型前4位者依次为HPV16、58、52、51,其中HPV16感染54例(25.29%)。结论:重庆医科大学附属第一医院就诊女性HPV感染率较文献报道的全国其他地区位于中等偏下水平,以单一、高危型感染为主。     

肝硬化门脉高压致腹腔血管破裂2例

例１：男,４７岁。突发腹痛１小时急诊来院。患者饮酒史近３０年,每日２００～３００ｍｌ。６年前诊断酒精性肝硬化,此后因腹胀、腹水反复发作住院４次。无呕血及黑便史。查体：体温３６℃,脉搏１３２／ｍｉｎ,血压６０／４．０ｋＰａ,呼吸２０／ｍｉｎ。面色灰暗...     

UPLC同时测定不同产地川芎中8种活性成分的含量

目的建立同时测定不同产地川芎中咖啡酸、香草醛、阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、丁基苯酞、藁本内酯和丁烯基苯酞含量的UPLC方法。方法采用ACQUITY UPLC,HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相为甲醇-0.03%磷酸水溶液,梯度洗脱,PDA检测器,针对不同组分,选择其最大吸收波长作为检测波长。结果咖啡酸、香草醛、阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、丁基苯酞、藁本内酯和丁烯基苯酞分别在0.082 8～3.312μg.mL 1,0.047 85～1.914μg.mL 1,4.420～176.8μg.mL 1,2.035～81.4μg.mL 1,0.470 4～18.82μg.mL 1,1.044～41.75μg.mL 1,13.55～542.0μg.mL 1,1.785～71.40μg.mL 1内呈良好的线性关系,平均回收率分别为101.0%,99.1%,98.9%,103.6%,96.3%,102.8%,98.1%,98.0%。结论该方法简便、快捷、重复性好,可用于川芎药材及其制剂的质量控制。