我国人与犬、猫共患病防控存在的主要问题与对策建议

随着社会经济的发展、城市化进程的加速及人们生活水平的不断提高,越来越多的宠物走进了人们的家庭,在人类社会生活中发挥了积极作用.但同时,宠物也是人兽共患病的重要传染源和传播媒介.与人类关系最为密切的犬、猫在人兽共患病的防控中具有重要的意义.在已报道的200多种主要的人兽共患病中,与宠物犬、猫有直接或间接关系的有70余种.随着宠物犬猫数量的大幅攀升和宠物业的飞速发展,我国人与犬猫共患病可能会出现逐步高发的趋势,疫病防控工作面临着许多问题.为了完善宠物管理制度,建立有效的防疫监督体系,对人与犬猫共患病实行有效的防控,本文就完善法律法规、形成综合管理机制,加强卫生监督、强化无害化处理、培养专业人才以及广泛开展宣传教育等6个方面提出了相关建议.     

我国家禽戊型肝炎病毒感染情况的调查

目的了解我国家禽戊型肝炎病毒(HEV)感染情况。方法自我国15个省份采集鸡和鸭血清共计1647份,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测血清中HEV抗原和抗体;通过Nested PCR对陕西、西藏和海南的全部血清样本及其它抗原阳性样本分别进行HEV及禽HEV核酸检测。结果 1507份鸡血清中有54份为HEV抗体阳性,26份为HEV抗原阳性,抗原和抗体的阳性率分别为3.58%和1.73%;140份鸭血清中10份为HEV抗体阳性,2份为HEV抗原阳性,阳性率分别为7.14%和1.43%;鸡和鸭HEV抗原、抗体阳性率无统计学差异。在鸡、鸭血清标本中没有检测到HEVRNA。结论我国家禽存在HEV感染,但还需要进一步研究以确定感染的病毒是否为禽HEV或1-4型HEV跨种感染。     

牛γ-干扰素在大肠杆菌中的表达及抗原性鉴定

目的 在大肠杆菌中高效表达牛γ-干扰素(bovine interferon-γ,BovIFN-γ),并对其生物活性进行初步鉴定.方法 依据GenBank上基因序列人工合成BovIFN-γ基因,PCR方法扩增该基因,将其插入PET-28a载体构建原核表达质粒,转化大肠杆菌BL21中,在IPTG诱导下表达BovIFN-γ,并进行Western blot鉴定.Ni-NTA亲和层析法和电洗脱方法纯化表达的重组蛋白,用Western blot和商品化的BovIFN-γ检测试剂盒进行重组蛋白的抗原性检测.结果 成功构建了BovIFN-γ原核表达载体PET-28a- BIFN-γ,并在大肠杆菌中高效表达,表达蛋白约占菌体总蛋白的32％,表达产物主要以可溶性形式存在于菌体裂解液上清中;重组蛋白可与BovIFN-γ单克隆抗体反应,Ni-NTA亲和层析法纯化的重组蛋白抗原活性比电洗脱方法纯化的抗原活性高.结论 在大肠杆菌中成功表达了可溶性的BovIFN-γ蛋白,可与BovIFN-γ单抗发生反应,纯化的重组蛋白具有良好的反应原性.     

A/H1N1流感-世界关注的焦点

2009年4月,A/H1N1流感在墨西哥和美国暴发.随后,疫情迅速蔓延到美洲、欧洲、亚洲多个国家.A/H1N1流感病毒是一种以前在人或动物身上从未观测到的新病毒.遗传进化和抗原特性分析表明该病毒和猪流感病毒密切相关,与人类的季节性流感病毒有明显区别.但是流行病学信息表明A/H1N1流感病毒只攻击人类,并在人与人之间传播,尚未发现动物向人类传播的情况.本文从A/H1N1流感病毒的生物学特性、临床特征、公共卫生意义等方面全面阐述了A/H1N1流感的最新研究进展,为正确认识和科学防控A/H1N1流感提供参考.     

禽流感病毒A型和H5亚型RT-PCR检测试剂盒研究

人类和动物是互相依存的，自从地球上有了生物，经过亿万年沧桑幻变，发生过5次物种大灭绝，然后又滋生繁育、又形成了新的生物群落。按照自然竞争适者生存的法则，能存活下来的、尽管是五花八门、种类多的不胜枚举，但冥冥之中却为地球的生物界编组成了互相依存的食物链，准也离不开谁。人类由于发现发展了种植业和养殖业，生产力人人提高，称霸于地球，演变为今日世界。     

用BALB／c与ICR杂交子一代小鼠及新产仔母鼠生产单克隆抗体的观察

用分泌犬细小病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞，腹腔注射雄性ＢＡＬＢ／ｃ与雌性ＩＣＲ杂交子一代小鼠和ＢＡＬＢ／ｃ小鼠制备单克隆抗体。结果表明，该Ｆ１代杂交鼠腹水产量较ＢＡＬＢ／ｃ鼠高，但抗体效价不及ＢＡＬＢ／ｃ鼠。从每只小鼠生产的腹水总效价看，两种鼠所产抗体的效价相近。实验发现，用新产仔母鼠作为荷瘤鼠，其腹水产量和抗体效价均明显高于普通雌鼠。同时发现小鼠预处理后１７ｄ注射杂交瘤细胞，并控制细胞数在１．５×１０５较为理想，可避免过早形成实体瘤。     

犬传染性肝炎病毒的研究

本项目从北京地区疑似患犬传染性肝炎的病犬肝脏中分离到一株病毒(ICHV BJ-1株)。采用病毒分离培养技术、常规病理技术、免疫组化技术和电镜技术,在国内首次确认北京地区犬群中流行犬传染性肝炎。并证实其血清型为犬腺病毒1型(CAV-1);同时在病毒的增殖方式、病毒在体外细胞和脏器组织中的动态分布情况、包涵体的形态特征、感染犬临床指征等方面也有所创新和发现。     

我国实验用小型猪三个种群微生物感染状况调查

目的 为开展实验用小型猪SPF净化工作，对北京五指山小型猪、广西巴马小型猪和贵州香猪进行微生物、寄生虫检测，以了解3个种群小型猪的微生物感染状况。方法 采集3个种群小型猪的血清和皮肤样本，用血清学和显微镜观察方法对其进行17项微生物和寄生虫学指标的检测。结果 3个种群的小型猪微生物感染状况均不相同。结论 建议从异地引猪时应选择感染率低的小型猪，经剖腹净化、微生物检测合格后在新场进行饲养。     

犬细小病毒VP2基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

目的表达犬细小病毒VP2蛋白(CPV VP2),用于犬细小病毒病的诊断、疫苗研制和VP2蛋白功能研究。方法采用PCR方法对CPV VP2基因进行扩增,将CPV VP2基因克隆到毕赤酵母(Pichia pastoris)分泌表达载体pPICZαA中,构建真核重组表达载体pPICZαA-VP2,将该重组质粒线性化后,转化毕赤酵母菌GS115中,在甲醇诱导下表达CPV VP2,SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达蛋白。结果成功扩增了CPV VP2基因,构建了真核重组表达载体pPICZαA-VP2在毕赤酵母菌中表达出约64.35 kD蛋白。Western blotting鉴定表明,表达VP2蛋白与犬细小病毒阳性血清有反应性。结论在毕赤酵母中成功地表达了CPV VP2蛋白,能被犬细小病毒阳性血清识别。     

抗传染性犬肝炎病毒单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备传染性犬肝炎病毒单克隆抗体。方法将用纯化的犬腺病毒1型（CAV-1）免疫的BALB／c小鼠脾细胞与SP2／0细胞在聚乙二醇作用下融合，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫酶试验（1EA）筛选，以有限稀释法克隆3次，制备单克隆抗体，并对制备完成的单克隆抗体进行生物学鉴定。结果成功得到2株能稳定分泌抗CAV-1的单克隆抗体杂交瘤细胞，命名为1B、2H3，经鉴定其亚型分别为IgG2a和IgG2a，2株均为kappa链。腹水的ELISA效价可达10^7-10^8，IEA效价可达1：2560—1：5120。该单克隆抗体与CPV、CDV、FPV、CCV病毒无交叉反应。结论成功制备了抗CAV-1单克隆抗体，为进一步建立相关诊断方法奠定了基础。