腰骶段先天性脊柱畸形矫正术后冠状面失平衡的研究现状

正先天性脊柱侧凸畸形(congenital scoliosis,CS)是由椎体发育异常所致。新生儿中发病率为0.5‰～1‰~([1])。然而,部分患儿在生长发育阶段出现临床畸形时才就诊,因此实际发生率可能更高~([2])。CS的进展取决于畸形椎的类型,两端软骨板及椎间盘发育完全的畸形椎所引起的脊柱侧凸     

新生儿肛门生殖器距离与隐睾的相关性分析

目的:分析男性新生儿肛门生殖器距离(AGD)与睾丸下降不全之间的关系,探索其可能存在的内在联系。方法:连续纳入哈尔滨市妇产医院及哈尔滨市双城区急救中心妇产科2013年9月至2014年9月出生的汉族男性新生儿350例,出生后24 h对所有新生儿测量AGD,排除有合并直肠肛门畸形及尿道下裂的患儿,由小儿外科医生进行体格检查,确定其是否存在睾丸下降不全,并根据睾丸位置分为阴囊上方型、腹股沟型及不可触及型。结果:350例新生儿中隐睾39例,隐睾新生儿的AGD长度显著短于非隐睾新生儿[(2.01±0.22)cm vs(2.35±0.19)cm;P0.01];在排除早产儿及低出生体重儿情况下该差异仍具有统计学意义[(2.32±0.14)cm vs(2.06±0.19)cm;(2.37±0.17)cm vs(2.12±0.12)cm,P均0.01];高位隐睾新生儿AGD较低位隐睾儿AGD有降低趋势,但无统计学意义(F=0.434,P0.05);单侧隐睾与双侧隐睾新生儿AGD值差异也无统计学意义[(1.96±0.13)cm vs(2.02±0.17)cm,P0.05)]。结论:在所研究的男性新生儿人群中,AGD值与睾丸下降不全具有相关性。AGD可以作为雄激素作用窗口期存在异常干扰的衡量指标。     

抗CMG2单克隆抗体的制备及其初步应用

目的制备鼠抗人毛细血管形态发生基因2(CMG2)单克隆抗体,并将其初步应用于胃癌组织和细胞系中CMG2表达的检测。方法重组表达CMG2胞外区肽段,免疫Balb/c小鼠,常规制备杂交瘤细胞,通过间接ELISA方法筛选目标克隆,制备小鼠腹水并经蛋白A亲和纯化获得相应抗体。间接ELISA法鉴定抗体的亚类类型及亲和力;抗原竞争性抑制实验鉴定抗体的特异性。用候选抗体建立流式细胞术、免疫荧光、免疫印迹及免疫组织化学方法,初步应用于胃癌组织和细胞系中CMG2表达的检测。结果共获得3株针对CMG2胞外区的杂交瘤细胞株,其中以8F3单克隆抗体的亲和力和特异性最好,亚型为Ig G1。8F3单抗能用于胃癌细胞株CMG2表达的流式细胞术和免疫荧光检测以及胃癌组织的免疫组织化学检测。结论成功制备出高效价高特异性的鼠抗人CMG2单克隆抗体,为CMG2的基础和临床应用研究提供了有用工具。     

神经松动术联合经颅磁刺激治疗脑梗死后偏瘫肩痛的研究

目的 探讨神经松动术联合经颅磁刺激治疗脑梗死后偏瘫肩痛的效果及对神经营养因子、细胞因子水平的影响。方法 选取2019年2月—2021年3月徐州医科大学第二附属医院脑梗死后偏瘫肩痛患者114例,以随机数字表法分为观察组、对照组,各57例。对照组采取神经松动术,观察组采取神经松动术联合经颅磁刺激,均治疗2周。酶联免疫吸附法测定血清脑源性神经营养因子（BDNF）、促生长因子-1（IGF-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、一氧化氮（NO）水平。结果 观察组治疗2周后总有效率为94.74%,高于对照组的75.44%（P＜0.05）;观察组治疗1和2周后视觉模拟评分量表（VAS）评分均较对照组低,Fugl-Meyer运动功能评定量表（FMA）-上肢部分、日常生活活动能力量表（Barthel指数,BI）评分均较对照组高（P＜0.05）;观察组治疗1周、2周后肩关节外旋、内旋、外展、后伸、前屈活动度均较对照组高（P＜0.05）;观察组治疗1周、2周后血清BDNF、IGF-1水平均高于对照组,TNF-α、IL-6、NO水平均低于对照组（P＜0.05）。结论 应用神经松动术联合经颅磁刺激治疗脑梗死后偏瘫肩痛患者可降低疼痛程度,提升肩关节活动度、上肢功能、日常生活能力,调节血清神经营养因子、细胞因子表达,提升疗效。国际神经病学神经外科学杂志, 2022, 49(6): 54-58]     

基于机器学习的结直肠癌微卫星不稳定基因挖掘及其应用价值分析

背景与目的 结直肠癌（CRC）是全球第三大最常诊断的恶性肿瘤和第二大癌症死亡原因。最新指南推荐所有的CRC患者需要进行微卫星不稳定（MSI）的检测。MSI患者往往具有错配修复蛋白缺失（dMMR）。MSI/dMMR状态已被用作生物标志物预测对免疫治疗的有利反应和预后。然而MSI特征基因及其与肿瘤浸润的免疫细胞的关系未进行阐述。因此本研究通过使用机器学习的方式发掘CRC中新型的MSI特征基因,并且验证其的诊断价值及其与免疫细胞浸润的关系。方法 按照纳入排除标准,将GEO数据库中GSE39582数据集作为训练集,将TCGA数据库中COAD数据集作为外部验证集。使用机器学习的方法（LASSO回归、SVM-RFE算法）,在GSE39582结直肠癌数据集中筛选MSI特征基因,并在TCGA结直肠癌数据中进行验证。采用受试者工作特征（ROC）曲线和曲线下面积（AUC）评价基因对MSI的诊断效能。CIBERSORT算法评估肿瘤样本浸润的免疫细胞成分,Spearman相关性分析验证MSI特征基因和免疫细胞的关系。结果 训练集共纳入536例CRC患者,其中高频MSI（MSI-H）77例（14.37%）。在验证集中,共计389例CRC患者,其中MSI-H 67例（17.22%）。基线资料分析显示,MSI-H/dMMR CRC的TNM分期存活率优于低频MSI（MSI-L）或微卫星稳定（MSS）/错配蛋白完整（pMMR）CRC（P<0.05）。在GSE39582数据集中,LASSO回归筛选MSI特征基因21个,SVM-RFE算法筛选基因6个,结合两种算法确定MSI特征基因为EIF5A、CXCL13、HNRNPL、HOXC6、RPL22L1、Y16709。在TCGA数据库中进一步验证MSI特征基因的诊断效能,研究发现EIF5A的诊断效能最高。在训练集和验证集中,EIF5A的AUC值分别为0.922和0.805。同时,Spearman相关性分析发现,EIF5A主要与CD8⁺T细胞,活化的树突状细胞,辅助性T细胞,M1型巨噬细胞,γδT细胞,中性粒细胞成正相关;与CD4⁺记忆性T细胞,M2型巨噬细胞,静止树突状细胞,嗜酸性粒细胞,调节性T细胞呈负相关。结论 CRC的新型MSI特征基因分析结果表明,EIF5A对CRC MSI的诊断具有较好的诊断作用和临床价值,同时提示EIF5A与免疫细胞及免疫微环境相关。因此,EIF5A可能成为免疫检查点治疗的新型标志物。     

基于多波长覆盖融合指纹图谱的大川芎片主要成分研究

目的建立10批次大川芎片多波长融合高效液相色谱指纹图谱,在此基础上对大川芎片融合指纹图谱共有峰进行初步指认,构建大川芎片的全析指纹图谱为其全面的质量控制提供依据。方法采用高效液相色谱法对大川芎片进行检测,将不同波长下数据进行多波长融合得到10批大川芎片的融合指纹图谱,采用液质联用技术对融合指纹图谱中的共有峰进行初步结构鉴定。结果 10批大川芎片融合指纹图谱共获得13个共有峰并与共有模式图相似度均>0.92,其中8个共有峰得到指认。结论本文通过多波长融合技术手段及HPLC-MS分析方法建立大川芎片全析指纹图谱,为大川芎片主要成分的质量控制提供依据,为规范中药制剂及其合理使用奠定基础。     

髓芯减压植骨干细胞移植联合股骨头坏死愈胶囊治疗早期股骨头坏死33例

目的:观察髓芯减压植骨干细胞移植结合股骨头坏死愈胶囊治疗早期股骨头坏死的近期临床疗效。方法:采用髓芯减压植骨干细胞移植治疗早期股骨头坏死患者33例(39髋)。以Harris评分和术后X线、MRI评价为标准,评价评分变化、有无进展及坏死面积变化。结果:术后随访,33例(39髋)获得12~24个月随访,平均(19.6±2.7)个月。术后切口均Ⅰ期愈合,无感染等并发症发生。术前Harris评分为(59.7±5.2)分,术后12个月为(82.0±5.6)分,术后12个月Harris评分较术前显著改善(P0.05),按照Harris评分标准:优良率为87.2%。X线检查2例2髋ⅡC期患者术后2年发展为Ⅲ期塌陷,进展率为5.1%,MRI测得坏死面积百分比,术前为(30.3±2.7)%,术后12个月为(16.4±3.0)%。结论:髓芯减压植骨干细胞移植结合股骨头坏死愈胶囊口服治疗早期股骨头坏死的近期临床疗效安全可靠,适用于ARCO分期Ⅰ期及ⅡA、ⅡB期患者。     

表皮生长因子受体基因突变临床检测方法学比较及其影响因素分析

目的 比较临床常用的两种方法检测晚期非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变状态结果的差异,探讨福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织切片标本的不同保存方式对DNA数量、质量及对检测结果的影响.方法 收集中国医学科学院肿瘤医院2010年11月至2011年8月晚期NSCLC FFPE组织切片标本150份,分别采用楔形探针扩增阻滞突变系统(ScorpionsARMS)和直接测序法检测EGFR第18、19、20、21号外显子突变状态,分析两种方法检测EGFR基因突变结果的差异,对结果不一致病例收集临床治疗情况及生存数据并进行分析.对其中30份FFPE标本提取DNA并保存于-20℃3年,同样的30份FFPE标本按常规方法保存3年后再提取DNA,比较两种保存方式对DNA的数量、质量及对检测结果的影响.结果 Scorpions ARMS法检测EGFR基因突变的成功率(100％)高于直接测序法(87.3％),差异有统计学意义(x2=20.28,P＜0.05).两种方法检测EGFR基因突变的一致率为84.7％,一致性较好(Kappa=0.738,P＜0.001).分析结果不一致病例中5例接受靶向药物治疗后患者的生存情况,与ARMS检测结果一致性相对较好.新鲜FFPE标本提取并贮存于-20℃、3年的DNA与FFPE标本按常规方法保存3年后提取的DNA相比,后者质量相对较差,片段化程度更严重,但两种保存方法获取的DNA的EGFR基因突变检测结果均一致.结论 Scorpions ARMS与直接测序法联合检测结果更为全面、可靠.检测结果不确定的患者应以临床治疗及生存资料支持诊断.FFPE标本提取DNA后低温贮存,更有利于DNA完整性的保存.     

基于细胞水平药物筛选的微流控芯片系统研究进展

进入21世纪以来,药物筛选技术正朝着快速、高效的细胞水平筛选方面发展,微流控芯片技术作为现代生命科学领域的重要研究工具,以其分析微型化、高通量化、可集成化和良好的生物相容性等特点,在细胞水平药物筛选方面引起了广泛关注,并取得了一系列成果。国家“十二五”规划中启动科技重大专项“基于微流控芯片的新药研究开发关键技术”,使得微流控芯片在药物筛选领域的研究达到了一个新的高度。本文主要综述了近年来基于细胞水平药物筛选的微流控芯片系统的研究进展,并对其应用前景进行了展望。