牙龈卟啉单胞菌脂多糖对泡沫细胞中NF-κB信号通路的影响

目的:研究牙龈卟咻单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide,P. gingivalis LPS)在氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)刺激巨噬细胞形成泡沫细胞过程中和形成泡沫细胞后对NF-κB信号通路的影响.方法:用oxLDL诱导THP-1人单核细胞源性巨噬细胞形成泡沫细胞,在巨噬细胞和泡沫细胞中加入P. gingivalis LPS和oxLDL,利用免疫细胞化学技术检测NF-κB p65亚单位核转位情况,Western blot检测细胞质内IκB-α变化.结果:P. gingivalis LPS能促进巨噬细胞和泡沫细胞中p65亚单位核转位,在2 h时达到最高水平;也能降低细胞质内IκB-α水平,在2 h时达到最低水平;在2 h时,10 μg/ml比10、100 ng/ml、1μg/ml P. gingivalis LPS更能提高p65核转位率.结论:P. gingivalis LPS可以促进泡沫细胞形成过程中和形成后NF-κB信号通路的激活,促进动脉粥样硬化进展.     

牙龈卟啉单胞菌脂多糖对泡沫细胞凋亡基因的影响

目的 了解牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)在巨噬细胞吞噬氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipopmtein,oxLDL)形成泡沫细胞过程中和形成后对凋亡基因的影响,以期了解Pg影响动脉粥样硬化的可能机制.方法 以oxLDL、oxLDL+Pg-LPS刺激人急性单核细胞白血病单核细胞株THP-1源性巨噬细胞,以及oxLDL诱导巨噬细胞形成的泡沫细胞.采用吖啶橙-溴化乙锭双染色观察细胞凋亡,聚合酶链反应(PCR)芯片检测11种动脉粥样硬化相关凋亡基因的变化,实时PCR检测p53、c-Myc和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3基因的变化.结果 Pg-LPS提高了巨噬细胞吞噬oxLDL形成泡沫细胞过程中和形成后的细胞凋亡率,分别为(5.47±0.93)%、(7.50 4-0.54)%;PCR芯片检测显示泡沫细胞形成过程中Pg-LPS上调了B细胞淋巴瘤-白血病-2相关蛋白Al的转录(>2倍),泡沫细胞形成后上调了B细胞淋巴瘤-白血病-2和B细胞淋巴瘤-白血病-2相关蛋白A1的转录(>2倍);在泡沫细胞形成过程中提高了p53和caspase-3的转录水平[分别为(4.50×10-3±4.02×10-4)和(5.30×10-2±4.58×10-3)],抑制了c-Myc的转录水平(1.53×10-2±5.77×10-4);在泡沫细胞形成后降低了p53转录水平(4.23×10-3±5.85×10-4),促进了caspase-3的转录水平(6.00×10-2±6.08×10-3),P<0.05.结论 Pg-LPS影响了泡沫细胞形成过程中和形成后细胞中多种凋亡基因的转录,促进了凋亡的发生.     

高脂血症抑制载脂蛋白E基因敲除小鼠对牙龈卟啉单胞菌炎症反应的影响

目的:研究高脂血症在ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠对牙龈卟啉单胞菌(P. gingivalis)炎症反应过程中的影响及其机制。方法:利用ApoE-/-小鼠建立长时间高脂血症模型,腹腔注射活P. gingivalis以建立腹膜炎症模型,倍比稀释法分析腹腔内清除细菌能力,ELISA法检测血液中白细胞介素6(IL-6)和单核细胞趋化因子1(MCP-1)的分泌,实时定量PCR检测腹腔细胞IL-6和MCP-1的转录水平,采用SPSS13.0软件包进行统计学分析。结果:高脂血症显著降低了腹腔清除P. gingivalis的能力,ApoE-/-小鼠腹腔细胞中IL-6和MCP-1转录水平下降,释放入血液中的IL-6和MCP-1水平下降。结论:高脂血症导致宿主对P. gingivalis炎症反应不足,清除细菌能力下降,加速了牙周病的发展进程。     

牙龈卟啉单胞菌脂多糖对牙周韧带细胞在牙骨质片附着和增殖的影响

目的 研究牙骨质片经不同浓度牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)处理后对牙周韧带细胞(PDLC)附着和增殖的影响.方法 用含不同浓度(0,1,10)μg/mL的Pg-LPS培养液培养PDLC于牙骨质片,24、72 h后用MTT法检测PDLC在牙骨质片上的附着、增殖的细胞数量,同时行扫描电镜观察.结果 高浓度10 μg/...     

氧化低密度脂蛋白诱导泡沫细胞形成过程中细胞因子水平的变化

目的:研究泡沫细胞形成过程中细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-10、IL-12p40和IL-18水平的变化。方法:将人THP-1细胞来源的巨噬细胞以无血清培养基培养24h同步化后,以氧化低密度脂蛋白(oxLDL)刺激,油红O染色和酶法检测泡沫细胞形成的情况,用ELISA法检测泡沫细胞形成过程中培养上清中TNF-α和IL-1β的水平。用实时PCR检测IL-1β、IL-10、IL-12p40和IL-18 mRNA的表达。结果:以无血清培养基培养24h后,流式细胞术(FCM)检测显示G0～G1期的细胞占81.07%。巨噬细胞受oxLDL刺激后48h,巨噬细胞内有脂质沉积,胆固醇酯的含量大于总胆固醇含量的50%。培养上清中TNF-α的水平在50mg/L oxLDL刺激12h时最高,刺激48h时最低;而IL-1β在刺激后的各时间点基本维持在较高水平。加入50mg/L oxLDL刺激后2h时,巨噬细胞中IL-1β、IL-10和IL-12p40 mRNA的表达上升(P0.01),与oxLDL刺激2h相比,刺激50h时IL-1β和IL-18 mRNA的表达上升(P0.01),IL-10 mRNA的表达显著上升(P0.01),IL-12 mRNA的表达显著下降(P0.01)。结论:巨噬细胞吞噬脂质形成泡沫细胞过程中,细胞因子呈现急性炎症到慢性炎症的变化过程。     

Pg-LPS对兔单核/巨噬细胞炎症因子表达的影响

目的比较Pg-LPS对新西兰兔不同部位单核/巨噬细胞炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)表达的影响。方法分离新西兰兔不同部位(血液、肺、腹腔、肝脏)的单核/巨噬细胞(Mo、AM、PM、KC),将每一个部位的细胞分别用E.coli-LPS、Pg-LPS刺激。运用RT-PCR法检测各组Mo、AM、PM、KC中IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达情况。结果各实验组的4个部位(Mo、AM、PM、KC)相比,IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达均存在部位差异(P﹤0.05)。E.coli-LPS组和Pg-LPS组IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达较对照组总体上均明显升高(P﹤0.05),并且E.coli-LPS组的升高作用强于Pg-LPS组(P﹤0.05)。结论不同部位的单核/巨噬细胞对Pg-LPS的刺激存在敏感性差异。Pg-LPS可以增强单核/巨噬细胞炎症因子基因的表达水平。     

自体新鲜脱矿牙齿移植物在不同部位成骨效果的动物实验

目的:研究自体新鲜脱矿牙齿移植物(autogenous fresh demineralized tooth graft,Auto-FDT)应用于位点保存和牙周再生的可行性.方法:拔除2只beagle犬的上下第三切牙,将8个拔牙窝随机分为两组:对照组(4个位点),拔牙后自然愈合,不植入骨粉;实验组(4个位点),拔牙后牙槽窝中植入Auto-FDT及膜.在下颌前磨牙根分叉构建骨缺损模型(10个位点),随机分为两组:对照组(4个位点),只建立骨缺损,不充填骨粉;实验组(6个位点),植入Auto-FDT及膜.12周后安乐处死实验动物,取颌骨标本.通过CBCT检查及病理切片观察成骨效果.结果:CBCT图像显示拔牙位点实验组的平均灰度值显著高于对照组,根分叉病变实验组的平均灰度值显著高于对照组.病理切片可见Auto-FDT能够很好地维持再生空间,并且在颗粒周围观察到活跃的新骨形成.部分的Auto-FDT已经被替代.结论:Auto-FDT有望成为一种安全有效的骨替代材料用于牙周再生治疗.     

内窥镜辅助下微创牙周基础治疗的临床疗效评价

目的探讨牙周内窥镜辅助下超声龈下刮治及根面平整(subgingival scaling and root planning,SRP)对重度牙周炎治疗的临床疗效。方法选取2017年6月至2019年1月于南京大学医学院附属口腔医院就诊的Ⅲ?Ⅳ期牙周炎患者19例,随机分为内窥镜组及对照组。内窥镜组在龈上洁治术1周后,牙周内窥镜下行一次SRP;对照组在龈上洁治术1周后,行常规微创下SRP,隔周复查,对探诊出血位点行再次SRP,每个位点SRP最多3次。SRP前、治疗后3个月和6个月,采用Florida探针检查记录牙周状况:探诊深度(probing depth,PD)、探诊出血(bleeding on probing,BOP)阳性率及附着丧失(attachment loss,AL)。结果40.05)。BOP阳性率、AL两组在3个月和6个月时均未见明显差别(P>0.05)。PD>6 mm位点:在基线时,内窥镜组的PD、BOP阳性率及AL均比对照组更严重,差异有统计学意义。两组PD、BOP阳性率、AL在治疗后3个月和6个月时较基线均显著下降。但治疗后3个月和6个月后,内窥镜组PD较对照组变的更浅(P<0.05),BOP阳性率、AL在治疗后3个月和6个月时两组间没有明显统计学差异(P>0.05)。结论与常规微创下SRP相比,内窥镜下SRP有利于改善PD水平和减少更深位点的BOP及AL。     

Dyract-AP复合体充填楔状缺损的临床疗效

楔状缺损是临床上常见的非龋性疾病.常用的充填材料有玻璃离子水门汀、光固化复合树脂等,近年来我们采用Dyract-AP复合体充填修复楔状缺损,收到满意效果,现报告如下.     

不同饮料对SD大鼠牙釉质脱矿影响的激光共聚焦扫描电镜观察

目的通过激光共聚焦扫描电镜了解饮料对釉质脱矿的影响。方法80d龄SD大鼠42只,每只单笼饲养,喂饲致龋饲料15天后检测无牙釉质脱矿。余鼠随机分为去离子水组(阴性对照,A组)、雪碧组(碳酸类,B组)、伊力纯牛奶组(牛奶类,C组)、农夫山泉矿泉水组(矿泉水类,D组)、统一鲜橙多组(果汁类,E组)和康师傅鲜c组(果汁类,F组),每组6只,喂饲饮料3个月,用激光共聚焦扫描显微镜观察磨牙釉质的脱矿情况。结果雪碧、统一鲜橙多和康师傅鲜c组的荧光面积、总荧光面积及平均荧光量分别是12.75×10-3μm2、19.83×10-3及1.56;8.90×10-3μm2、14.52×10-3及1.63;15.05×10-3μm2、24.04×10-3及1.60,明显高于对照组(P<0.05),其值为6.03×10-3μm2、9.73×10-3及1.55,其中又以康师傅鲜c组为最高。矿泉水和牛奶类的荧光面积和总荧光量都较低,分别为3.45×10-3μm2、5.41×10-3和3.87×10-3μm2、6.14×10-3,与对照组相比没有显著性差异(P>0.05),与酸性饮料(包括碳酸类和果汁类)比较有显著差异(P<0.01)。结论酸性饮料具有较强的酸蚀性,牛奶和矿泉水对釉质脱矿没有明显的影响。