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采用逆转录-PCR的方法从骨髓基质细胞中扩增出人干细胞因子基因,并与载体pKK233-2和pUC18重组。经该基因的限制酶酶解图谱分析及DNA序列分析证实。 相似文献
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本文应用 ̄3H-亮氨酸体外掺入示踪,Percoll梯度离心富集网织红细胞和聚丙稀酰胺凝胶电泳微量分析等技术,分别对10例正常人,14例ANLL及9例ALL患者网织红细胞中α/β珠蛋白链合成速率比进行检测及分析,同时测定了HbF和HbA_2以及血红蛋白电泳。10例正常人α/β合成比为1.04±0.08,14例ANLL为1.55±0.5(P<0.001),9例ALL为0.76±0.13(P<0.001)。本文对不同类型急性白血病珠蛋白基因表达调控异常的规律作了初步的分析,并对可能的机制进行了讨论。 相似文献
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用聚合酶链式反应体外选择性扩增β-珠蛋白基因的两个片段后,经与~(32)P中标记的寡核苷酸探针进行斑点印迹杂交及放射自显影检测,对3例具有β-地中海贫血(地贫)纯合子风险胎儿进行了产前基因诊断,查明1例为β-地贫杂合子β~(17(A—T))/β~A;另2例分别为β~(17(A—T))/β~(-28(A—G))和β_(71-72(+A))/β_(41-42(-4bp))的复合杂合子。 相似文献
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直接以克隆的逆病毒载体为模板,在反应管中加入适当比例的α-32P-dATP及其他三种dNTP,以单引物进行线性聚合酶链反应(PCR)扩增,标记与扩增同时进行,经过一轮PCR(50次循环),可得到高度特异及高效的单链DNA探针。作者已将其成功地应用于人类β-珠蛋白基因表达调控的研究。 相似文献
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在湖南地区发现两种类似的血红蛋白变异物——Hb 双峰(Hb Shuangfeng,简写 HbSF)〔α27(B8)Glu→Lys〕和 HbE〔β26(B8)GlU→Lys〕。前者不稳定,先证者表现感冒服药后溶血发作,后者却尚属稳定,杂合子无可见的临床表现。无疑这是研究结构与功能关系难得的两种天然变异物。本文报道此二种血红蛋白的结构、功能、合成及反应的动力学,从而探讨其不稳定和药物所致溶血的机理。采取正常人、HbSF 及 HbE 杂合子静脉血(草酸盐或肝素抗凝),用微晶纤维素薄层指纹技术证明其结构;用 DEAE-Sephadex A50 柱层分离纯化正常和异常血红蛋白;用自制压力计,按 Benesch 等描述不连续分光光度法作氧平衡曲线、P50、Hill 系数、Bohr 效应和变构 相似文献
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为了研究人类Hb Lepore Boston基因结构及其表达低下的原因,该文用逆转录病毒为载体,克隆含不同珠蛋白基因5’-端启动子区的Leproe基因和β基因,分别导入K_562细胞和Hela细胞中,用竞争性逆转录PCR技术检测其表达水平。结果发现:在K_562细胞中可能存在负调控因子或缺乏某种正调控因子,导致β珠蛋白基因无可检出的表达。在Helafo胞中,所导入的重组载体均有不同程度的表达。证明:δ基因5’端序列是导致Lepore基因表达水平低下的重要原因,外显子1、内含子1对其影响甚微。以上结果为人类β-地中海贫血的基因治疗研究提供了有用的参考资料和理论基础。 相似文献
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Huang Cheng-han 黄承汉 Lu Yi-qing卢义钦 Zhu Ding-er朱定尔and Yuan Tian-ying袁恬莹Department of Biochemistry Hunan Medical. College Changsha 《中华医学杂志(英文版)》1985,98(7):515-519
This paper describes observations on oxygen
equilibrium charateristics of four abnormal hemoglo-
bins. Hb I Bangkok behaves similarly as Hb A,
Oxygen equilibrium of Hb Shuangfeng is characteriz
ed by an oxygen affinity l.5-fold that of HbA at
pH 7.4 and 25 C, a biphasic curve of Hill plot with
n=l.l when Y<25% and a normal Bohr effect, while
its counterpart HbE shows oxygenation properties
nearly identical to HbA. Hb New York exhibits re.
duced oxygen affinity, a slight decrease of Bohr effect,
and an increased oxygenation heat, but its coopera-
tivity and response to inositol hexaphosphate are
normal. Possible stereochemical interpretations are
made on the basis of the hemoglobin model construct-
ed by Perutz and his associates. 相似文献