PCR直接扩增与套式扩增用于HLA－DR基因分型的研究

人类ＨＬＡ抗原分型在人类学、法医学、疾病易感性及器官组织移植等研究中有重要的意义。在骨髓移植中，进行供者、受者ＨＬＡ配型，选择相合的供体，减少ＧＶＨＤ发生，是移植成功的关键。目前国内主要采用血清学方法进行ＨＬＡ配型。由于方法上的缺点，常有约２０％左右的误差率，因此，基因分型技术的研究与应用势在必行。该研究通过设计合成ＨＬＡ基因序列特异性引物，建立了ＨＬＡ－ＤＲ基因分型的套式扩增和直接扩增ＰＣＲ－ＳＳＰ技术，并在骨髓移植配型中进行了应用。对两种分型技术进行了对比，两种方法各有特点，套式扩增在高度同源的ＤＮＡ序列扩增中有高度的特异性，并具有高度的灵敏性，很少量的ＤＮＡ即可满足ＰＣＲ扩增，但需两次扩增，非同源因素影响增大；直接扩增操作简便，一次扩增完成分型，但结构同源因素对特异性影响大。两种方法经周密设计均有高度的准确性，可常规用于临床骨髓移植配型     

套式序列特异引物聚合酶链反应技术的建立及其在HLA配型中的应用

磁式序列特异引物聚合酶链反应方法，用于ＨＬＡ－ＤＲ基因分型。利用一对外引物扩增ＨＬＡ－ＤＲＢ１第２外显子部分片段，作为第２次扩增的模板，ＰＣＲ循环参数；     

急性中毒患者血液毒鼠强的GC/MS检测及临床应用

目的利用气相色谱-质谱（GC/MS）建立一种快速检测中毒患者血液毒鼠强的方法.方法考察5种有机溶剂液-液法提取血液毒鼠强的回收率,研究毒鼠强的线性方程、最低检测限及精密度.结果乙酸乙酯提取毒鼠强的回收率为90.40%,RSD=2.8%,n=5;毒鼠强线性方程为y=156.5x＋236.1,R=0.9988;最低检测限为4ng/ml;日内精密度为RSD为4.3%,日间精密度为RSD为6.7%.解析了毒鼠强质谱图的主要碎片归属.结论所建方法简单快速,灵敏度高,选择性好,可用于临床中毒患者血液毒鼠强的检测.     

重度有机磷农药中毒救治方法的改进

目的：探讨提高急性重度有机磷农药中毒（ＧＡＯＰＰ）抢救成功率的新方法。方法：将我院１９９２年８月～１９９８年６月收治的１０８例ＧＡＯＰＰ随机分为两组。治疗组采用：（１）在抢救程序方面,先注射解毒剂和拮抗剂再清除毒物（洗胃或清洗皮肤）;或边治疗边清除毒物;（２）保留胃管反复洗胃;（３）病人进入ＩＣＵ病房全程监护的新方案给以处理治疗。对照组按常规方法处理及治疗。即先洗胃或清洗皮肤,再使用解毒药,洗胃后拔除胃管,常规病房救治护理。结果：治疗组与对照组疗效出现时间及达到阿托品化时间分别为（１４０±２…     

速效枣仁安神胶囊中毒的实验诊断

速效枣仁安神胶囊是一种镇静催眠的中成药 ,是在双粉双藤处方的基础上研制的一种纯中药制剂。据其说明书描述 ,其镇静、安神作用明显 ,无依赖性 ,无毒副作用。但近几年来 ,常有患者一次性大量服用本药 ,轻者产生嗜睡 ,重者发生昏迷 ,甚至危及生命。这些昏迷患者在被送到医院抢救时 ,由于不能确定昏迷的原因 ,治疗是很盲目的 ,只能对症 ,无法治本。为了使患者得到合理救治 ,我们利用广谱药物分析系统 (ＲＥＭＥＤｉＨＳ)建立了一种快速检测速效枣仁安神胶囊的方法 ,并用于中毒患者的实验诊断。1　材料与方法1.1　广谱药物分析系统 (ＲＥＭＥ…     

精神药物中毒的快速定性检测

在药物中毒的病例中 ,精神药物中毒占较高的比例。当临床医生在遇到这类患者时 ,非常希望能对患者所服的药物进行快速定性、定量检测 ,以指导对患者的救治。传统的检测精神药物的方法多选择液相或气相色谱等 ,但由于仪器性能的局限性 ,不能对众多药物进行快速筛查 ,因而不能满足抢救患者尤其是已导致昏迷患者的需要。广谱药物分析系统 (ＲＥＭＥＤｉＨＳ)是一种广谱药物检测系统 ,可对 50余种精神药物进行快速筛测[1 ,2 ] 。现就ＲＥＭＥＤｉＨＳ的有关资料及我们在临床应用该技术的情况作一简要介绍。一、广谱药物分析系统1 ＲＥＭＥＤｉ…     

采用HPLC-PDA法定量分析人血浆唑吡坦浓度

唑吡坦(zoplpiden)又称"思诺思",是一种咪唑吡啶类药物,具有较强的镇静、催眠和轻微的抗焦虑及肌肉松弛作用,是继巴比妥类、苯二氮革类后的第三代镇静安眠药.目前,该药在欧美许多国家被广泛使用.近年来,随着国际交往的增多,唑吡坦在我国的使用也越来越广泛.由于唑吡坦的广泛使用,加上社会竞争等的日益加剧,服用过量唑吡坦导致中毒的患者在临床有逐渐增加的趋势.但迄今,尚未见到适合于中毒患者血液唑吡坦的定性定量分析方法.本实验利用液相色谱-二极管阵列检测(HPLC-PDA)建立了一种检测唑吡坦的方法,为临床中毒患者的诊断和抢救提供了科学依据.     

活性炭血液灌流对有机磷农药敌敌畏和解毒药阿托品的作用

目的评估活性炭血液灌流对有机磷农药敌敌畏和解毒药阿托品的作用。方法在人血样(由解放军307医院血库提供的正常人血样)中加入敌敌畏和阿托品后,分成空白对照组和血液灌流组,观察灌流前后血中敌敌畏浓度和阿托品浓度以及血清中胆碱酯酶活力的变化。结果活性炭血液灌流中敌敌畏和阿托品的吸附率分别为(0.98±0.05)%和(0.68±0.01)%。在混合吸附试验中,吸附后的阿托品和敌敌畏之比较吸附前浓度之比增加。同时,吸附后假性胆碱酯酶活力比吸附前增长了近3倍。结论虽然在体外人血中活性炭血液灌流对人血中敌敌畏的吸附率较低(与空白组比较,P>0.05),但大大提高了血清中胆碱酯酶活力,同时提高了血中阿托品和敌敌畏的浓度之比,从而更易到达阿托品化。     

混合淋巴细胞培养在骨髓移植供体选择中的作用

混合淋巴细胞培养（ＭＬＣ）是传统的配型骨髓移植（ＢＭＴ）供受体主要组织相容性复合（ＭＨＣ）的重要方法。但近年来，随着分子生物学和ＰＣＲ技术发展，出现了许多新的配型ＨＬＡ的基因学方法。利用这些方法，学者们对ＭＬＣ配型ＨＬＡ及选择ＢＭＴ供体的作用进行了研究。认为ＭＬＣ在有血缘关系的同胞间ＢＭＴ供体选择中尚有一定的作用，耐 在无关供体的选择时，ＭＬＣ可被省略而为ＰＣＲ－ＳＳＣＰ、ＰＣＲ－Ｆ等方法代替。