神经生长因子修饰的间充质干细胞促进兔下颌骨牵张成骨时下牙槽神经损伤修复的实验研究

目的探讨慢病毒介导的人神经生长因子β(h NGFβ)在兔下颌骨牵张成骨模型中促进下牙槽神经损伤修复的作用。方法分离兔下颌骨中的骨髓间充质干细胞(MSC)并通过重组的慢病毒将h NGFβ基因插入到其基因序列中。对20只新西兰白兔进行下颌骨牵张成骨,并在手术时向骨牵张缝隙下牙槽神经周围植入经h NGFβ基因重组质粒转染的MSC或对照MSC(每组10只)。经过牵张,在固定期第14天处死动物并获取下牙槽神经样本进行神经组织学分析和神经组织形态定量分析。结果下牙槽神经组织分析显示,移植h NGFβ基因修饰MSC组与对照组相比较,有更多的再生神经纤维和更少的神经变性。神经组织形态定量分析显示,与对照组相比,移植h NGFβ基因修饰MSC组的有髓纤维密度显著增多,提示移植h NGFβ基因修饰MSC能够显著地加快兔下颌骨牵张成骨过程中的下牙槽神经的修复。结论慢病毒介导h NGFβ基因修饰MSC将有希望为临床减少牵张成骨造成的下牙槽神经损伤提供一种有效的基因治疗方法。     

肠黏膜屏障功能检测研究进展

肠黏膜屏障包括机械屏障、免疫屏障、生物屏障、化学屏障等多层含义。在饥饿和营养不良、创伤、危重疾病、严重感染或炎症等情况下,肠黏膜的结构和功能可能受到损伤,导致肠黏膜屏障功能障碍、肠道细菌移位、内毒素入血,诱发或加重肠道局部或全身性炎症、免疫反应,严重者可导致多器官功能不全的发生。在某些疾病尤其是多器官功能不全治疗的早期,采取措施保护肠黏膜屏障功能,有助于控制病情,提高疗效。早期有效治疗的前提是对肠黏膜屏障有充分的认识,能早期对肠黏膜屏障功能进行检测并正确诊断。因此本文主要从肠黏膜屏障的四个组成部分分别讨论肠黏膜屏障功能的检测。     

巴柳氮对葡聚糖硫酸钠结肠炎小鼠肠黏膜通透性的影响

目的探讨巴柳氮对结肠炎小鼠肠黏膜通透性的影响及其作用机制。方法将45只C57BL／6J小鼠分成正常对照组、葡聚糖硫酸钠（DSS）模型组、巴柳氮不同剂量组（42、141、423mg／kg）,正常对照组自由饮水,其余各组自由饮用5％DSS溶液,巴柳氮灌胃给药。每日予以疾病活动指数（DAI）评分,实验结束后取结肠组织进行苏木精-伊红染色评分,匀浆检测髓过氧化物酶（MPO）、超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽活性（GSH-Px）、丙二醛（MDA）含量。小肠黏膜透射电镜检查。Evans蓝检测小肠黏膜通透性。结果与正常对照组小鼠相比,DSS组小鼠均出现明显的体质量减轻、便血和腹泻,DAI评分和病理（HI）评分增高（P〈0．01）。同时,结肠黏膜MPO活性和MDA含量明显增高（P〈0．05）,SOD和GSH-Px活性明显降低。透射电镜检查小鼠回肠黏膜绒毛变短、萎缩、稀疏和排列极不规则,细胞间连接复合体缩短、变宽及细胞间隙扩大;小肠组织中Evans蓝含量增高。巴柳氮给药组小鼠一般情况明显改善,DAI评分与HI评分降低（P〈0．05）,MPO活性减低,MDA含量降低,SOD和GSH-Px活性增高。随着巴柳氮剂量的增高,回肠黏膜微绒毛形态接近正常,小肠组织中Evans蓝含量明显减少。结论DSS模型小鼠肠黏膜通透陛增高,巴柳氮可改善结肠炎模型小鼠肠黏膜通透性。     

非甾体抗炎药对肠黏膜通透性的影响及替普瑞酮的保护作用

目的 探讨非甾体抗炎药(NSAIDs)对类风湿关节炎(RA)及骨关节炎(OA)患者小肠通透性的影响及替普瑞酮对NSAIDs所致小肠损伤的防治作用.方法 收集服用NSAIDs的RA患者30例、OA患者16例,其他结缔组织病患者5例,健康对照者10例.高效液相色谱法测定尿液中乳果糖和甘露醇(L/M)排泄率比值,比较未使用NSAIDs,使用NSAIDs后,及加用替普瑞酮后,L/M排泄率比值.结果 ①使用NSAIDs的17例患者L/M排泄率比值较10例健康对照者升高,但差异无统计学意义;使用NSAIDs的34例患者L/M排泄率比值较未使用NSAIDs患者显著升高(P＜0.01);10例使用替普瑞酮的患者L/M排泄率比值较单纯使用NSAIDs患者显著降低(P＜0.01);②服用不同NSAIDs患者L/M排泄率比值排序为奥沙普嗪＜双氯芬酸＜氯诺昔康,但3组间差异无统计学意义;③RA患者L/M排泄率比值显著高于OA患者和健康对照者,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 NSAIDs增加OA患者小肠黏膜通透性;NSAIDs对小肠黏膜通透性改变与COX-2选择性无关;RA患者肠黏膜通透性显著增加;替普瑞酮能保护NSAIDs引起的肠黏膜通透性改变.     

肝硬化患者肠道粘膜通透性及其与Child-Pugh分级相关性的研究

目的 了解肝硬化患者肠道粘膜通透性的改变并探讨其与Child-Pugh分级之间的相关性.方法 纳入66例肝硬化患者,并选择40例健康体检者作为对照,采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)、D-乳酸水平,采用高效液相色谱法测定尿乳果糖/甘露醇(lactulose/mannitol,L/M)排泄率比来评价肠道粘膜通透性.结果 肝硬化患者Child-Pugh分级各组的血DAO、D-乳酸水平及尿L/M排泄率比均明显高于对照组,差异有统计学意义(均有P＜0.05).血DAO水平与尿L/M排泄率比、血D-乳酸水平与尿L/M排泄率比均呈线性相关(r=0.518、r =0.527,均有P＜0.05).血DAO水平、血D-乳酸水平及尿L/M排泄率比与Child-Pugh评分均呈正相关(rs=0.705、rs=0.791、rs=0.851,均有P＜0.05).结论 血DAO、D-乳酸水平及尿L/M排泄率比三种检测指标能准确反映肠粘膜通透性的变化.肝硬化患者的肠粘膜通透性较对照组明显增高,且与Child-Pugh评分呈正相关,肠粘膜通透性的检测对肝硬化患者的治疗有一定的临床价值.     

溃疡性结肠炎患者骨代谢生化指标检测及其临床意义

炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)不仅可导致消化道黏膜损伤,还可引起多种全身并发症.骨质疏松(osteoporosis,OP)是IBD患者常见且易被忽视的并发症之一.研究表明IBD患者OP发生率为15％,骨量减少发生率为18％[1].IBD患者易出现骨质丢失.     

肿瘤坏死因子-α抗体对实验性结肠炎小鼠肠黏膜通透性的影响及机制

目的 研究TNF-α抗体对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的实验性结肠炎小鼠肠黏膜通透性的影响及作用机制.方法 将18只C57BL/6J小鼠均分为健康对照组、模型对照组和TNF-α抗体组,其中模型对照组和TNF-α抗体组小鼠喂饲5％DSS溶液7d.TNF-α抗体组分别于造模第1、4天予TNF-α抗体(5 mg/kg)腹腔注射给药,健康对照组和模型对照组则以等量0.9％氯化钠溶液代替.造模7d后处死小鼠,期间每日进行疾病活动指数(DAI)评分.分别采用偶氮蓝法和异硫氰酸荧光素标记葡聚糖(FITC-D)法检测小肠黏膜通透性.取结肠肠段,光学显微镜下观察并行病理组织学评分.取部分回肠肠段,电子显微镜下观察.制备10％结肠和小肠黏膜匀浆,使用相应试剂盒测定结肠黏膜髓过氧化物酶(MPO)活性、TNF-α含量和小肠黏膜肌球蛋白轻链激酶(MLCK)含量.Western印迹法检测小肠黏膜MLCK表达水平.统计学处理采用组间单因素方差分析.结果 与健康对照组比较,模型对照组小鼠DAI逐日增高.与模型对照组比较,TNF-α抗体组DAI获改善.模型对照组小鼠回肠上皮细胞胞间连接复合体缩短、变宽,细胞间隙扩大.TNF-α抗体组小鼠回肠上皮细胞连接结构紧密程度较高.模型对照组小鼠病理评分和结肠黏膜MPO活性、TNF-α含量均高于健康对照组(P值分别=0.008、0.006、0.001),TNF-α抗体组则均低于模型对照组(P值分别=0.004、0.008、0.005),三组间比较F值分别=131.98、218.28、58.93.模型对照组小鼠肠壁中偶氮蓝和血清中FITC-D含量均高于健康对照组(P值分别=0.003和0.010),TNF-α抗体组则均低于模型对照组(P值分别=0.001和0.009),三组间比较F值分别=69.36和17.96.模型对照组小鼠小肠黏膜中MLCK含量[(71.10±7.52)ng/g]高于健康对照组[(18.56±9.92)ng/g,P＜0.01],TNF-α抗体组[(37.56±15.84)ng/g]则低于模型对照组(P=0.008),三组间比较差异有统计学意义(F=17.23).Western印迹检测显示,模型对照组小鼠小肠黏膜中MLCK表达水平高于健康对照组,TNF-α抗体组则低于模型对照组.结论 TNF-α抗体具有显著的抗结肠炎作用,可改善肠黏膜通透性,其机制可能与调控MLCK表达有关.