乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人肝癌细胞株乙酰肝素酶表达的影响

目的:探讨乙酰肝素酶(Hpa)反义寡脱氧核苷酸对人肝癌细胞株Hpa mRNA和蛋白表达的影响。方法:设计合成互补于Hpa mRNA起始密码区的硫代反义寡脱氧核苷酸AS-ODN及相应的无义对照寡脱氧核苷酸NS-ODN,以阳离子脂质体Oligofectamine~(TM) Reagent包埋后转染SMMC-7721、BEL-7402细胞,以RT-PCR和Western-blot检测转染前后细胞Hpa mRNA以及蛋白表达的变化。结果:与正常对照组和NS-ODN相应浓度组相比,转染AS-ODN组肝癌细胞Hp amRNA和蛋白的表达均下降。结论:Hpa反义寡脱氧核苷酸下调Hpa mRNA和蛋白的表达,可能抑制肝癌的侵袭转移。     

核苷和核苷酸类药物治疗慢性乙型肝炎的长期性

核苷和核苷酸类药物（ NAs）已成功用于慢性乙型肝炎（ CHB）治疗。目前一致认为,乙型肝炎病毒（ HBV）复制是肝损伤和疾病进展的关键因素,因此CHB治疗的主要目的是最大限度地持续抑制HBV复制。现已证明,应用NAs长期治疗CHB可明显改善肝脏组织学、逆转肝纤维化或肝硬化,以及减少肝细胞癌的发生。该文对CHB长期治疗的必要性、临床获益及管理进行了综述。     

结直肠癌患者cdkn2/p16基因异常的检测及临床意义

肿瘤DNA存在于患者血液中，虽然含量极微，但可反映人体对肿瘤的负荷。ckdn2／p16基因是肿瘤抑制基因家族的重要成员，其功能异常多见于各种肿瘤；而其结构异常表现为缺失、点突变及启动子CpG岛的高度甲基化后，使其失活，不能转录和翻译。本研究对同一患者中ckdn2／p16基因几种异常单独或相互作用与病理分型和临床Duke’s分期的相关性进行探讨。     

遗传性脊髓小脑共济失调41例临床特征及分子遗传学研究

目的:探讨脊髓小脑共济失调(Spinocerebellar Ataxia,SCA)的临床特点和分子遗传学特征.方法:对华西医院2004年7月至2008年4月收治的脊髓小脑共济失调病人进行总结分析.结果:在21例作过SCA1、SCA2、SCA3、SCA6和SCA7 CAG/CAA三核苷酸重复扩增次数检测的患者中,SCA3患者8例(38.1%),SCA6患者4例,(19.0%),SCA2患者1例(4.8%),余下的8例(38.1%)患者SCA1、SCA2、SCA3、SCA6、SCA7基因检测未见异常.结论:SCA3是中国西南地区最多见的SCA亚型,SCA各亚型的临床表现相互重叠,其确诊有赖于基因检查.     

外周血清NLRP3、HMGB1水平与急性ST段抬高型心肌梗死患者PCI术后缺血再灌注损伤的关系

目的分析外周血清核苷酸寡聚化结构域样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平与急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的关系。方法选取2020年1月—2021年7月武汉亚洲心脏病医院ICU收治接受PCI的STEMI患者165例,根据PCI术后是否发生MIRI分为MIRI组103例和非MIRI组62例。比较2组临床资料及外周血清NLRP3、HMGB1水平,多因素逐步Logistic回归分析STEMI患者PCI术后MIRI影响因素,受试者工作特征曲线(ROC)分析外周血清NLRP3、HMGB1水平对STEMI患者PCI术后MIRI的预测价值。结果MIRI组患者年龄、罪犯血管为右冠状动脉比例、Killip分级、血尿素氮、血肌酐、B型脑钠肽、住院天数、心血管不良事件发生率均高于非MIRI组,收缩压、舒张压、eGFR、ACEI/ARB/ARNI使用比例低于非MIRI组(P<0.05)。外周血清NLRP3、HMGB1水平MIRI组术前高于非MIRI组;术后即刻2组均降低,但MIRI组高于非MIRI组;术后24 h 2组均再次升高,且MIRI组高于非MIRI组(P均<0.05)。多因素Logistic逐步回归分析显示,年龄大、罪犯血管为右冠状动脉、B型脑钠肽高、血清NLRP3高、血清HMGB1高为STEMI患者PCI术后发生MIRI的独立危险因素[OR(95%CI)=1.052(1.010~1.096)、1.037(1.007~1.068)、1.003(1.001~1.004)、1.440(1.232~1.684)、1.728(1.312~2.276)],而收缩压、舒张压高为独立保护因素[OR(95%CI)=0.684(0.579~0.808)、0.551(0.406~0.746)]。ROC曲线显示,血清NLRP3、HMGB1及二者联合预测STEMI患者PCI术后MIRI的曲线下面积(AUC)分别为0.769、0.740、0.835,二者联合预测的AUC大于单项预测(Z=2.297、3.149,P=0.022、0.002)。结论PCI术后发生MIRI的STEMI患者外周血清NLRP3、HMGB1水平升高,为MIRI发生的独立危险因素,可作为PCI术后MIRI预测指标。     

欧前胡素阻断Noxs-ROS通路抑制MKN-45及HT-29细胞增殖活性

目的 探讨欧前胡素对人胃癌细胞(MKN-45)和人结肠癌细胞(HT-29)中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(Noxs)-活性氧(ROS)氧化应激通路的作用及对肿瘤细胞增殖活性的影响。方法 MKN-45和HT-29细胞经过不同浓度(3、10、30、100 μmol/L)的欧前胡素及阳性对照二苯基氯化碘盐(DPI)处理后,使用CCK8法检测细胞增殖活性,使用DHE荧光探针检测细胞内ROS水平,使用Western blotting检测细胞内Nox1、Nox2、Nox3、Nox4、Nox5家族蛋白表达。结果 CCK8法结果显示,欧前胡素可浓度相关性地抑制MKN-45和HT-29细胞增殖活性;DHE荧光探针法结果显示,欧前胡素干预可使MKN-45和HT-29细胞荧光强度明显减弱,ROS水平降低;Western blotting结果显示,给予欧前胡素可使MKN-45细胞Nox1、Nox2、Nox3、Nox4、Nox5蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01、0.001),使HT-29细胞Nox1、Nox2蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01)。结论 欧前胡素可通过抑制MKN-45和HT-29细胞中Noxs-ROS通路,诱导细胞增殖活性下降,发挥抗肿瘤作用。     

高通量测序技术联合瞬态诱发性耳声发射技术在新生儿遗传性聋筛查中的应用价值研究

目的 探究高通量测序（NGS）技术联合瞬态诱发性耳声发射（TEOAE）技术在新生儿遗传性聋筛查中的应用价值。方法采用整群随机抽样方法,根据纳入、排除标准选取2018年1月至2020年10月承德市中心医院625例新生儿作为研究对象,均于出生后3～7 d内行新生儿遗传性聋筛查,筛查方法采用NGS技术和TEOAE技术,并于出生后1个月、2个月采用TEO-AE技术进行第1、2次复筛,统计NGS技术、TEOAE技术筛查结果,分析NGS技术联合TEOAE技术筛查新生儿遗传性聋的价值。结果 本组共纳入625例新生儿,NGS技术筛查结果显示6.08%存在耳聋基因异常,主要为GJB2基因（2.40%）、SLC26A4基因（2.72%）异常,0.80%存在≥2个耳聋基因位点异常;TEOAE技术初筛8.48%的新生儿未通过,第1次、2次复筛未通过率分别为6.40%、5.12%;NGS技术、TEOAE技术筛查新生儿遗传性聋的曲线下面积（AUC）分别为0.920、0.880,二者联合筛查的AUC最大,为0.976,联合筛查的灵敏度、特异度分别为95.65%、99.50%。结论 NGS技术、TEOAE技术均为新生...     

荔枝核总黄酮对肝纤维化大鼠肝脏NLRP3表达的影响

目的 研究荔枝核总黄酮（Total flavones from Lychee seed, TFL）对二甲基亚硝胺（Dimethylnitrosamine, DMN）所诱发的肝脏纤维化大鼠肝脏中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（Nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3, NLRP3）表达的影响。方法 研究将Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、扶正化瘀组和TFL高、中、低剂量组。ELISA法测定血清中羟脯氨酸、透明质酸、 Ⅳ型胶原、Ⅲ型前胶原和层粘连蛋白的水平; HE染色和Masson染色观察大鼠肝脏组织的病理变化;RT-qPCR测定肝脏组织中硫氧还蛋白结合蛋白（Thioredoxin‐interacting protein, TXNIP）、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（Cysteine-aspartic proteases-1, Caspase-1）、白细胞介素-1β（Interleulin-1β, IL-1β）的mRNA表达水平。结果 TFL减轻大鼠肝脏组织纤维化程度, TFL各组血清中羟脯氨酸、透明质酸、 Ⅳ型胶原、Ⅲ型前胶原和层粘连蛋白的浓度均显著降低（P<0.05）, 且肝脏组织中TXNIP、NLRP3、Caspase-1、IL-1β的mRNA表达均下降显著（P<0.05）。结论 TFL减轻DMN所诱发的大鼠肝纤维化的作用与抑制肝脏NLRP3表达有密切关系。     

白芍总苷对系统性红斑狼疮患者外周血B细胞内TLR9表达的影响

摘要 目的 探讨白芍总苷（TGP）对系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血B细胞内Toll样受体9（TLR9）表达的影响。方法选取SLE患者60例和正常健康人30例,分离外周血单个核细胞（PBMC）,每份标本均分为4组体外培养,即空白对照组、胞嘧啶 磷酸 鸟嘌呤 寡聚脱氧核苷酸（CpG ODN）组、CpG ODN＋TGP组和TGP组。空白对照组仅加入RPMI 1640完全培养液,其他3组分别加入CpG ODN（ODN终浓度1 μmol·L 1）、CpG ODN＋TPG（TPG最适终浓度为1×10－4 mol·L－1）、TPG。各组均培养48 h后提取细胞,应用流式细胞仪检测各组B细胞内TLR9表达。结果①正常健康人：CpG ODN组和空白对照组TLR9的表达率分别为（9.10±2.12）%,（4.96±2.11）%（P＜0.01）;②SLE患者：CpG ODN组的TLR9表达率（14.86±3.42）%,显著高于空白对照组的（9.20±3.43）%（P＜0.01）,CpG ODN＋TGP组的TLR9表达率（11.95±3.63）%,低于CpG ODN组（P＜0.05）;在SLE轻度活动患者中,CpG ODN组和空白对照组TLR9的表达率分别为（10.74±3.17）%,（5.19±2.05）%（P＜0.05）;在SLE中重度活动患者中,CpG ODN组和空白对照组TLR9的表达率分别为（16.51±1.72）%,（10.80±2.37）%（P＜0.01）,CpG ODN＋TGP组TLR9的表达率（13.59±2.58）%,低于CpG ODN组（P＜0.01）。结论TGP可以拮抗CpG ODN对B细胞内TLR9表达的上调作用。     

二代测序技术应用于脑脊液检测在结核性脑膜炎中的早期诊断价值

目的评价二代测序技术应用于脑脊液检测在结核性脑膜炎（TBM）患者中的早期诊断价值。 方法前瞻性纳入2018年2月2日至2018年8月2日于山东省胸科医院就诊的临床怀疑TBM的患者共50例,并跟踪随访其诊疗结局。送检脑脊液标本均进行二代测序,测序所得原始序列与病原微生物数据库进行对比得到最终结果。二代测序结果以检测到结核分枝杆菌复合群唯一比对序列为阳性,未检测到唯一比对序列为阴性。以符合脑脊液结核分枝杆菌培养阳性、涂片阳性、Xpert MTB/RIF检测阳性及结核分枝杆菌核酸检测阳性等4项中至少1项即为确诊TBM患者;临床可疑TBM且抗结核治疗有效为临床诊断患者;有其他病原学依据或临床排除TBM者为非TBM患者。分析二代测序在TBM早期诊断中的敏感性和特异度。 结果确诊为TBM患者22例中Xpert MTB/RIF检测阳性13例,培养阳性6例,结核分枝杆菌核酸PCR检测阳性5例,临床诊断为TBM患者12例,非TBM患者16例。在确诊及临床诊断患者中,二代测序技术检测到结核分枝杆菌复合群系列20例,敏感性为58.8%（20/34）,特异度为100%（16/16）。在确诊患者中,二代测序的敏感性为63.6%（14/22）;在同步进行结核分枝杆菌培养、Xpert MTB/RIF检测与二代测序的50例标本中,以临床诊断为标准,3种方法的特异度均为100%（16/16）;传统方法、Xpert MTB/RIF检测及二代测序的敏感性分别为29.4%（10/34）、38.2（13/24）和58.8（20/34）,前两种检测方法与二代测序敏感性差异均有统计学意义（McNemar检验：χ² = 8.333、P = 0.013,χ² = 8.333、P = 0.065）。传统方法与二代测序联合检测的敏感性高达82.4%（28/34）。 结论二代测序技术能够较快速地检测脑脊液中的结核分枝杆菌复合群,且其敏感性和特异度均较高,可作为TBM的早期诊断指标。二代测序联合传统检测方法可提高检出率。